Тонус матки у беременных: Гипертонус матки при беременности — лечение гипертонуса матки на ранних стадиях в клинике «МедОк» — Женский медицинский центр МедОК

причины, симптомы, лечение. Как его снять у остеопата

Одной из частых страшилок среди женщин в положении является «гипертонус матки». Женщины так напуганы этим «диагнозом», что любые боли в животе, пояснице, крестце считают сигналом угрозы потери беременности. На самом деле, подобные жалобы не всегда связаны с повышенным тонусом матки. Тело женщины постоянно претерпевает изменения, выстраиваясь вокруг беременной матки.
Если вас беспокоят боли во время беременности, но акушеры говорят, что «гипертонуса матки» нет, приходите в клинику «Качество Жизни». Видящие руки остеопатов клиники способны без лекарств эффективно снять боль, улучшить самочувствие.

Поговорим о тонусе матки

Матка – это полый мышечный орган репродуктивной женской системы. Это некий сосуд, благодаря которому женщина может давать жизнь. В строении стенки матки выделяют 3 слоя:
• Периметрий
Является наружным слоем матки.
• Миометрий
Это гладкомышечная ткань, средний слой стенки матки, и как любая другая мышца может находиться в расслабленном или напряженном состоянии – тонусе, который может быть пониженным, нормальным и повышенным. Для миометрия матки эти свойства особенно важны, ведь иначе нельзя обеспечить рост матки при беременности, да роды невозможны. И в норме, напряжение в матке женщина никак не ощущает и не контролирует, ведь это «юрисдикция» вегетативной нервной системы.

• Эндометрий
Внутренний слой стенки матки, который обновляется каждый менструальный цикл.
Нормальный тонус матки при беременности называется базальным – это нормальное явление, ведь матка – мышечный орган. Но он может повышаться, причем на любом сроке беременности. Стенки матки напрягаются, и она становится более плотной на ощупь, на несколько секунд, потом расслабляется. Присутствуют тянущие боли внизу живота.

При таком тонусе, особенно на поздних сроках беременности, женщины могут ошибочно полагать о начале схваток, и приближающихся родах. Однако оценить реальную обстановку не сложно, главное – не паниковать.

 

Что такое гипертонус матки?

Как уже говорилось выше, матка может сокращаться, но если нет расслабления и она находиться в состоянии максимального напряжения в течение длительного времени, что сопровождается сильными болями – то это прямая угроза для развития беременности. Это и есть гипертонус матки.

Обычно такое состояние сопровождается кровянистыми выделениями, болью в животе и другими тревожными симптомами. И можно заподозрить преждевременную отслойку нормально расположенной плаценты и др.

Гипертонус матки всегда требует госпитализации и специфической помощи, направленной на его снижение и сохранение беременности. Лечением должен заниматься только акушер-гинеколог.
При гипертонусе матки на ранних сроках повышается вероятность выкидыша, плод страдает от гипоксии, а на поздних – преждевременных родов.

Такое состояние требует незамедлительной госпитализации и специфической акушерской помощи. Но к счастью, чаще диагностируется повышенный, а при таком тонусе матки, последствия менее опасные и страшные.

Что же делать и каковы причины появления столь тревожных и пугающих симптомов?

 

Причины и симптомы тонуса матки в I триместре беременности

Беременность на ранних сроках – период волнительный, любые изменения в здоровье, тяжесть и боль в животе всегда воспринимается серьезно.
Как ощущается повышенный тонус матки во многом зависит от срока гестации, но, как правило, это тянущие боли внизу живота, как перед менструацией, могут распространяться в пах или поясницу. На более поздних сроках боли становятся схваткообразными, а матка становится «каменной».
Если говорить о причинах на ранних сроках, то чаще это нехватка прогестерона – гормона, играющего беспрецедентную роль в процессе зачатия и дальнейшего развития беременности. Этот гормон не дает матке активно сокращаться, ведь это может спровоцировать выкидыш.

Но появление болей внизу живота при беременности далеко не всегда говорит о «гипертонусе», паниковать не стоит. Дело в том, что тот же самый прогестерон меняет работу пищеварительного тракта, женщины страдают от метеоризма, вздутия живота, что и вызывает боль и неприятные ощущения, возможно обострение хронических заболеваний пищеварительного тракта, а также остеохондроза.
Даже при обследовании, когда врач говорит о локальном «гипертонусе», это может быть всего лишь реакцией женщины и ее организма на влагалищное исследование или введение вагинального датчика при УЗИ.

 

Причины и симптомы «гипертонуса матки» во втором триместре беременности

На этом сроке определить состояние матки при беременности можно пальпаторно, то есть руками специалиста. И на этом сроке уже сама женщина ощущает состояние матки и с уверенностью может сказать: находиться она в напряжении или же гипертонусе, ведь ощущается как каменная.

Причины могут быть весьма разнообразными. Во-первых, нужно отметить, что эти явления могут быть спорадическими, и связаны они с резкими движениями самой женщины, физической нагрузкой, переполненным мочевым пузырем и даже с активными шевелениями плода, которые так ожидаемы семейной парой, но. Они то появляются, то исчезают и при таком «гипертонусе» напряжение кратковременное в противном случае, необходима консультация врача и осмотр.

Во-вторых, появление такого состояния можно объяснить тем, что плод давит на саму матку, а она, в свою очередь, оказывает давление на внутренние органы, отсюда и состояние «гипертонуса». Большое влияние оказывает эмоциональное и душевное состояние матери.

К сожалению, у некоторых женщин за плечами негативный опыт в прошлом: выкидыши, преждевременные роды. Забыть о таком сложно, это накладывает свой отпечаток и в будущем формирует стиль переживания беременности.

Женщины, которые постоянно ищут какие-то патологические симптомы, боль, в итоге «накручивают» нервную систему. И даже неприятные ощущения, которые связаны с другими причинами, воспринимаются как нечто страшное и предвестник осложнений, что соответствует тревожному стилю переживания беременности.

В клинике «Качество Жизни» прием ведет перинатальный психолог, который поможет справиться с любыми установками, страхами и переживаниями. Индивидуальный подход, доброжелательная атмосфера и внимательность – залог успеха.

После 20 недель есть возможность оценить реальное состояние при помощи токодатчиков. Дальнейшая расшифровка данных позволяет оценить реальное состояние и определить, с чем связано появление боли внизу живота.

Нередко происходит выявление именно абдоминальных болей у женщин – регулярных, навязчивых болей внизу живота при беременности, но при этом на кардиотокографии или токографии нет никаких признаков, указывающих на состояние гипертонуса. В таком случае необходимо выявить причину их появления, это могут быть:
• Миофасциальным напряжением в области передней брюшной стенки

Это хронические боли, которые обусловлены формированием локальных мышечных спазмов. Например, у женщин, занимающимися профессионально спортом, с очень натренированным, буквально каменным прессом, и чтобы «пробить» себе дорогу для роста матке нужно приложить огромные усилия. Из-за этого и появляется боль по передней брюшной стенке, которая ошибочно воспринимается женщиной как напряжение матки.

• Несостоятельность мышц тазового дна
По мере роста плода и, соответственно, матки, эта группа мышц испытывает повышенную нагрузку. Что может проявляться дискомфортом и болью, которая иррадиирует (распространяется) в другие области. Подобные симптомы могут быть связаны с особенностями мышечных цепей спины, в том числе и внутренних.

• Особенности пищеварительного тракта
При беременности всегда происходит изменения в работе желудочно-кишечного тракта. И это не может оставаться незамеченным. Метеоризм, запоры и другие состояния – и есть основная причина болей в животе, которая может ошибочно восприниматься как состояние гипертонуса.
• Болезни внутренних органов
При хронических болезнях почек боль также может распространяться в область живота.
• Спаечный процесс в малом тазу
Для плода и матки нужно пространство для своего роста и развития. И если в малом тазу есть спаечный процесс, чтобы развиваться она вынуждена преодолевать сильное сопротивление, прикладывать множество усилий, чтобы растянуть эти спайки и занять свое правильное положение.

Третий триместр беременности

 

Напряженная матка в этот период – вариант нормы. Она активно готовится к родам и ощущаются схватки Брекстона-Хикса, которые также называют тренировочными или ложными.

Если говорить про ощущения, стенки матки напрягаются, становятся каменными, но такое состояние быстро проходит. Такие ощущения пугают женщин, заставляет думать о том, что начались роды.
Однако если напряжение длительное, болезненное, то необходима консультация специалиста.

Поможет ли остеопат?

При гипертонусе, какое бы значение ни предавалось этому термину, необходимо специфическое акушерское лечение, иначе повышается вероятность нежелательных, а порой и фатальных осложнений.

В некоторых случаях показана госпитализация, где женщина будет находиться под пристальным наблюдением врачей и здесь же есть возможность для оказания экстренной помощи.

Тем не менее в случае когда женщин беспокоят боли и другие неприятные ощущения, но состояние матки не вызывает опасений, то есть она не напряжена, то именно видящие руки остеопата помогут улучшить состояние и избавиться даже от неприятных ощущений. Кроме того, остеопатические техники хорошо успокаивают нервную систему, снимают повышенную тревожность, улучшают сон, что способствует более благоприятному течению беременности и профилактике гипертонуса матки со всеми вытекающими последствиями.

Преимущества лечения в клинике «Качество Жизни»

Остеопаты, принимающие к клинике «Качество Жизни» имеют большой опыт в работе с беременными женщинами, преимущество их в большом опыте в акушерстве и гинекологии в прошлом. Это позволяет оценить состояние женщины, подобрать то лечение, которое действительно поможет и не причинит вреда. Ведь важно реально оценить состояние организма матери, в частности, матки.

Вся работа начинается с диагностики состояния, и уже на первом сеансе через несколько минут, многие женщины крепко засыпают. Это, кстати, также имеет положительное влияние на состояние женщины, ведь недосыпание, раздражительность также могут привести к перенапряжению матки.

Видящие руки остеопата, помогут мягко успокоить вегетативные сплетения матки, которые и отвечают за ее сократимость, кровоснабжение и развитие плода. В итоге состояние нормализуется, исчезают боли, а с ними и страхи.
Примечательно, что эти методики позволяют отказаться от медикаментов, что особенно значимо для женщин в положении, ведь любое лекарство нужно принимать с осторожностью и некоторые из них могут негативно влиять на развитие плода.
Мягкими техниками, то есть без выкручиваний и заломов, остеопат работает с центральной нервной системой, может снять напряжение. За несколько сеансов удается нормализовать ось позвоночника, твердую мозговую оболочку и это также способствует устранению боли.

В заключение

Беременность – волшебное время для каждой женщины, но это стресс и настоящее испытание для организма. Поэтому нередко могут формироваться неприятные симптомы, беспокоящие будущих матерей.
Врачи клиники «Качество Жизни» напоминают: если система таза, позвоночника, кровоснабжения и эндокринная регуляция работает в нормальном режиме и находиться в гармонии, то беременность протекает без осложнений и в нормальном режиме.
В стенах нашей клиники, в руках наших заботливых специалистов можно привести в порядок весь организм, подготовить его к столь знаменательному событию, а также пройти этот путь только в радости и без забот.

Повышенный тонус матки при беременности

Повышенный тонус матки при беременности — это патологическое состояние, при котором тоническое напряжение миометрия усиливается до ожидаемой даты родов. Проявляется дискомфортом, болью, напряжением в области таза, живота, поясницы, крестца, промежности, повышением плотности маточной стенки, при более тяжелом течении — учащением мочеиспускания, позывами на дефекацию, изменением активности плода. Диагностируется при помощи пальпации, УЗИ матки, тонусометрии, оценки уровня гормонов. Для лечения применяют спазмолитики, токолитики, седативные средства, прогестагенные препараты.

Общие сведения

В норме гладкомышечные волокна миометрия всегда находятся в тонически сокращенном состоянии, создавая в полости матки давление от 8 до 12 мм рт. ст. При увеличении внутриматочного давления выше этих показателей говорят о физиологическом или патологическом повышенном тонусе. Распространенность расстройства при беременности достигает 60-65%. Вероятность его развития после 35 лет повышается в 3 раза, что связано с увеличением количества перенесенных гинекологических болезней, абортов, диагностических и лечебных инвазивных вмешательств. Группу риска составляют беременные, которые работают на вредных производствах или в посуточном режиме, недостаточно спят, курят, употребляют алкоголь, разведены или имеют конфликтные отношения с партнером.

Повышенный тонус матки при беременности

Причины

Сократительная активность миометрия усиливается в результате нейрогуморальных воздействий и патоморфологических изменений в мускульном слое матки. Иногда повышение тонуса имеет физиологический характер (сокращения маточной мускулатуры при половом акте, тренировочные схватки во второй половине гестационного срока). Однако в большинстве случаев усиление тонической активности свидетельствует о развитии патологических процессов, представляющих угрозу для нормального течения гестации. Тонус матки повышается под влиянием таких причин, как:

  • Гормональный дисбаланс. Тонические сокращения гладкомышечных клеток миометрия усиливаются в условиях дефицита прогестерона. Гипопрогестеронемия возникает при повышенном содержании андрогенов у беременных с яичниковыми или надпочечниковыми нарушениями стероидогенеза, увеличении уровня пролактина при гипотиреозе, синдроме поликистозных яичников, циррозе печени, опухолях гипофиза, приеме противорвотных и антигистаминных препаратов.
  • Перерастяжение маточной стенки. Мышечные волокна рефлекторно сокращаются при значительном растяжении стенок растущим ребенком и его оболочками. Повышение маточного тонуса чаще наблюдается у пациенток, страдающих многоводием, вынашивающих многоплодную беременность, крупный плод. При нормальных размерах единственного плода миометрий перерастягивается у женщин с генитальным инфантилизмом, аномалиями развития (седловидной маткой и др.).
  • Патологические изменения маточной стенки. Воспалительные и неопластические процессы в слизистой, мускульной, серозной оболочках матки снижают ее способность к растяжению и создают очаги патологической импульсации, вызывающие локальные либо генерализованные сокращения мускулатуры. Причинами повышенного тонуса могут стать интерстициальные и подслизистые миомы, эндометриоз, цервицит, эндометрит, спайки в малом тазу.
  • Нарушения нервной регуляции. В норме до 38-39-й недели беременности возбудимость внутриматочных рецепторов, спинного мозга и зон коры головного мозга, отвечающих за сокращения матки, является минимальной. При эмоциональных стрессах, значительных физнагрузках, острых инфекциях с гипертермией (гриппе, ОРВИ, ангине) в ЦНС может сформироваться участок возбуждения, активность которого негативно влияет на тонус матки.

Усиление и учащение сокращений миометрия, способное спровоцировать прерывание беременности, также наблюдается при нарушениях иммунитета (Rh-конфликте, изоиммунной несовместимости), когда матка пытается избавиться от ребенка, воспринимаемого как чужеродный организм. Похожая ситуация возникает при несовместимых с жизнью аномалиях развития плода или его антенатальной гибели.

Патогенез

Ключевое звено, которое приводит к возникновению повышенного тонуса матки при беременности, — усиление сократимости мышечных волокон под влиянием внешних или внутренних раздражителей. Физиологический тонус миометрия обеспечивает автономная нервная система. Повышению сократимости препятствуют прогестерон, расслабляющий гладкомышечные волокна, и гестационная доминанта — очаг возбуждения, который формируется в коре головного мозга под влиянием афферентной импульсации из интрорецепторов матки и тормозит нервные процессы, способные нарушить гестацию. С учетом этого специалисты в сфере акушерства выделяют два механизма усиления тонуса матки — гуморальный и нейрогенный.

В первом случае повышенное тоническое сокращение развивается в ответ на уменьшение уровня прогестерона, во втором — вследствие возникновения патологического очага возбуждения в ЦНС либо ослабления гестационной доминанты из-за изменений в потоке нервных импульсов от беременной матки в случае ее перерастяжения, наличия воспалительных процессов, неоплазии. Иногда гуморальные и нейрогенные звенья патогенеза сочетаются. Усиленным физиологическим сокращением миометрия сопровождается повышенный выброс в кровь катехоламинов, других биоактивных соединений при физическом напряжении, эмоциональных переживаниях, интимной близости, вагинальном исследовании, шевелениях плода.

Классификация

Основными критериями систематизации повышения маточного тонуса при беременности являются характер, интенсивность и длительность патологических ощущений, частота их возникновения. Такой подход позволяет выработать оптимальную тактику сопровождения беременной и вовремя предупредить прерывание гестации. Различают 3 степени выраженности высокого тонуса миометрия:

  • I степень. Беременную беспокоит незначительная или умеренная кратковременная боль в нижней части живота. Дискомфортные ощущения и уплотнение матки исчезают в покое без назначения медикаментозного лечения.
  • II степень. Более выраженная болезненность отмечается не только внизу живота, но и пояснично-крестцовом отделе позвоночника. Матка существенно уплотняется. Для устранения патологических симптомов требуется прием спазмолитиков.
  • III степень. Интенсивные болезненные ощущения в животе, крестце и пояснице отмечаются даже при небольших физических нагрузках и эмоциональных переживаниях. Пальпаторно матка очень твердая. Беременную необходимо госпитализировать.

Симптомы гипертонуса матки

Признаком усиленного сокращения миометрия является появление дискомфорта в тазовой области. Женщина жалуется на тянущую или распирающую боль разной интенсивности — от легкой до выраженной, локализованную над лобком, внизу живота, в крестце, пояснице, иногда в промежности. Одновременно возникает ощущение напряжения и «твердения» живота, при котором во 2-3-м триместрах беременности через брюшную стенку пальпируется уплотненная матка. У некоторых пациенток учащается мочеиспускание, возникают позывы к дефекации, становятся более интенсивными шевеления плода. В легких случаях признаки повышенного тонуса проходят при глубоком спокойном дыхании в положении лежа. При прогрессировании состояния тоническое сокращение мускулатуры матки может перейти в схватки.

Осложнения

Нарастающее повышение тонуса гладкомышечных волокон матки способно спровоцировать ранний или поздний выкидыш в первой половине беременности и преждевременные роды во второй. Сокращение маточной стенки зачастую сопровождается нарушением кровотока в сосудах матки и плаценты, ухудшением кровоснабжения ребенка. При частом повышении тонуса II-III степени возможно возникновение фетоплацентарной недостаточности, внутриутробной гипоксии плода, задержка его развития. Расстройство повышает риск преждевременного излития околоплодных вод, истмико-цервикальной недостаточности, отслойки нормально расположенной плаценты. В родах у пациенток, которые отмечали усиление тонуса матки, чаще наблюдается бурная родовая деятельность, дискоординированные сокращения миометрия.

Диагностика

Основной задачей диагностического поиска при повышенном тонусе матки является установление причин, вызвавших расстройство, оценка его влияния на течение гестации. В некоторых случаях состояние не проявляется клинически и становится случайной находкой во время УЗИ-скрининга беременности. Рекомендованными методами обследования при подозрении на повышение тонуса маточной мускулатуры являются:

  • Пальпация живота. При нормальном тонусе во время 2-3 триместров беременности живот мягкий, на больших сроках гестации через стенку матки легко определяется положение и предлежание ребенка. О повышенном тонусе свидетельствуют уплотнение и напряженность маточной стенки, иногда достигающие степени каменистой твердости. Плод не удается пропальпировать.
  • УЗИ матки. Стенка матки локально или тотально утолщена за счет сокращения мышечных волокон. При небольшом участке уплотнения клиническая симптоматика может отсутствовать. Метод позволяет вовремя выявить признаки отслойки плаценты. При возможной фетоплацентарной недостаточности УЗИоо дополняют допплерографией маточно-плацентарного кровотока.
  • Тонусометрия. Степень сокращения миометрия оценивается в условных единицах, измеряемых специальными тонусометрами. Датчик устройства устанавливается над проекцией матки, после чего глубина погружения его штифта в маточную стенку регистрируется на шкале прибора. Для исследования используют пружинные и электрические тонусометры.
  • Анализ уровня половых гормонов. Поскольку усиление сократимости матки часто связано с дисгормональными состояниями, причины патологии удается выявить с помощью методов лабораторной диагностики. У беременных женщин с высоким маточным тонусом может определяться пониженное содержание прогестерона, повышенная концентрация тестостерона, пролактина.

В качестве дополнительных методов обследования рекомендованы цервикометрия, позволяющая обнаружить укорочение шейки матки, КТГ, фетометрия и фонокардиография плода, направленные на своевременное выявление угрозы ребенку. Дифференциальная диагностика проводится между различными заболеваниями, сопровождающимися повышенным тонусом миометрия, а также естественным локальным утолщением стенки матки в месте имплантации плода. По показаниям беременную консультируют эндокринолог, инфекционист, невропатолог, психотерапевт.

Лечение гипертонуса матки

Тактика ведения пациентки определяется степенью выраженности патологии. При легком повышении тонуса рекомендовано уменьшение физических и психологических нагрузок, нормализация режима сна и отдыха, отказ от острых продуктов и специй. Беременным с умеренным или выраженным тоническим сокращением миометрия кроме ограничения активности показана токолитическая терапия, направленная на расслабление матки. При расстройстве II степени консервативное лечение проводится амбулаторно с применением таблетированных форм спазмолитиков, при III степени — стационарно со строгим соблюдением постельного режима и преимущественно парентеральным введением лекарственных средств. Для уменьшения тонуса матки назначают:

  • Седативные препараты. Успокаивающие средства помогают уменьшить волнение, эмоциональную напряженность, страх потери ребенка, ослабить альтернативные очаги возбуждения, усилить доминанту беременности в ЦНС. При умеренно повышенном тонусе используют седативные фитосредства, при тяжелом состоянии возможно назначение транквилизаторов и даже нейролептиков.
  • Спазмолитики. Расслабление гладкой мускулатуры достигается за счет селективного угнетения активности фосфодиэстеразы IV типа и снижения внутриклеточного содержания кальция. Спазмолитические средства эффективно устраняют спазм гладкомышечных волокон как нервного, так и мышечного происхождения, усиливают кровоток в тканях.
  • Токолитики. С токолитической целью применяют β-2-симпатомиметики, активирующие аденилатциклазу. В результате повышенного синтеза цАМФ, стимуляции работы кальциевого насоса концентрация кальция в миофибриллах снижается, а сократительная активность матки угнетается. Для расслабления миометрия традиционно применяют сернокислую магнезию (ионы магния являются конкурентами кальция).

Если изменение тонуса матки вызвано прогестероновой недостаточностью, пациентке показаны препараты с селективным прогестагенным действием. Беременность у больных с повышенной сократительной активностью миометрия рекомендуется завершать естественными родами в физиологический срок. Кесарево сечение выполняется только при наличии акушерских показаний (отслойке плаценты, анатомически или клинически узком тазе, косом или поперечном положении плода, угрозе разрыва матки, обвитии пуповиной и т. п.).

Прогноз и профилактика

При 1-2 степени повышения тонуса миофибрилл матки беременность обычно протекает без серьезных осложнений, при 3 степени расстройства в отсутствие адекватной терапии прогноз ухудшается. При планировании беременности женщинам, страдающим гинекологическими заболеваниями (эндометритом, цервицитом, аднекситом, эндометриозом, миомами матки) необходимо учитывать мнение акушера-гинеколога, после наступления гестации рекомендована ранняя постановка на учет в женской консультации. С профилактической целью беременным следует уменьшить производственные, бытовые нагрузки, при необходимости и возможности перевестись на легкий труд, соблюдать режим отдыха. В момент повышения тонуса матки важно воздерживаться от сексуальных контактов.

Что делать, если поставлен тонус матки?

Счастливая женщина – это беременная женщина. Но всё это счастье оказывается под угрозой, если будущей маме ставят диагноз «тонус матки».

Он появляется из-за неправильного образа жизни, сильного переутомления, частых стрессов. Провокаторами иногда выступают дефицит прогестерона, заболевания эндометриоз, миома, оофорит. Повышенный тонус может быть обусловлен многоплодной беременностью, большими размерами ребенка, избытком околоплодных вод, нарушениями в функционировании ЦНС.

Конечно, беременная женщина начинает паниковать, связывая активность маточной мускулатуры с угрозой выкидыша. Да, тонус матки может привести к потере ребенка, но лишь в том случае, если мама ничего не предприняла.

Так бояться или не бояться?

Когда тело матки начинает напрягаться, интенсивно и неконтролируемо сокращаться задолго до родов, говорят о тонусе матки. По сути, орган выталкивает ребенка, поэтому может случиться выкидыш. К счастью, тонус восстанавливается.

Почти вся матка состоит из мышечной ткани, поэтому она способна сокращаться. Известно о трех слоях: 1) первый является наружным, он, подобно плёнке, покрывает тело матки; 2) второй (миометрий) располагается между внутренним и наружным слоем, состоит из соединительной и мышечной ткани; 3) третий (эндометрий) выстилает дно матки.

При нормальном протекании беременности (нормотонус) мышцы матки спокойны и расслаблены. Когда возникает физическое перенапряжение, волнение, мышечные волокна сжимаются, что приводит к росту давления в маточной полости и к увеличению тонуса.

Как обнаружить проблему?

Женщина способна сама определить, повышен ли тонус матки или нет. Прежде всего, наблюдаются периодические спазмы, пульсация в нижней части живота. Похожие симптомы возникают во время болезненных менструаций. Кроме того, есть ощущение, что живот каменеет. Естественно, всё это сопровождается локализованными схваткообразными болями.

Нужно лечь на спину, расположив руки так, чтобы одна легла на переднюю поверхность бедра, а вторая на место расположения матки. Если тонус бедра и матки одинаковые, можно не беспокоиться. Бить тревогу стоит тогда, когда матка ощущается более твердой. В первом триместре возможны кратковременные сокращения без особых проявлений, но в этом нет ничего страшного.

Стоит отметить, что тонус матки не является самостоятельным заболеванием. Скорее, он симптом, который указывает на опасные изменения в организме. Так или иначе, женщина должна быть очень внимательной. Желательно чаще бывать на свежем воздухе, избегать стрессовых ситуаций, переутомления.

Для беременности характерно усиление сократительной функции матки начиная с 28 недели. Тонус ощутим и болезнен. Уже на последних неделях (38–40) он выступает в роли оповестителя: роды приближаются. Тем не менее, врачи крайне внимательно относятся к подобному симптому. Длящийся несколько часов подряд и даже дней гипертонус приводит к спазмам сосудов. Это не может не отразиться на работе плаценты и, безусловно, кровоснабжении плода. Кислородное голодание ухудшает внутриутробное развитие ребенка. Дело может закончиться отслойкой плаценты или даже внутриматочным кровотечением.

Можно ли вылечить?

Основное, что рекомендуется женщинам с тонусом матки, – это снизить нагрузки, моральные и физические. На пользу идут дыхательные упражнения, регулярные прогулки, полноценный сон. Также необходим приём специальных лекарственных препаратов, в том числе с седативным эффектом.

В условиях стационара будущим роженицам дают настойку пустырника, экстракт валерианы. Если эффект слабее ожидаемого, предлагают «Нозепам», «Сибазол», «Триоксазин». Расслабляют маточную мускулатуру традиционные «Но-шпа», «Папаверин».

При нарушениях гормонального фона беременным назначают «Утрожестан» (срок не больше 16 недель), «Дюфастон». Срабатывают блокаторы кальциевых каналов: «Коринфар», «Нифедипин». Препараты «Этамзилат», «Дицитон» необходимы при кровянистых выделениях. Женщинам, которые находятся на последних месяцах беременности, вводят внутривенно спиртовой раствор (10 % спирта) на основе сернокислой магнезии. Обязательно прописываются диета, иглорефлексотерапия, физио- и психотерапия.

Тонус и гипертонус матки во время беременности. Что это, зачем нужно и опасно ли

Тонус матки – её временное напряжение – обычно не опасно для матери и плода. А вот гипертонус – затянувшееся состояние напряжения матки — может быть опасен. Гипертонус в первые недели срока может мешать зародышу прикрепиться. По ощущениям тонус и гипертонус похожи на тянущие менструальные боли внизу живота, но при этом болят поясница и копчик.

Матка, говоря по-простому, — мышечный резервуар для вынашивания детей. Она состоит из слоёв, благодаря которым матка кровоснабжается и способна сокращаться, выбрасывая отслоившийся эндометрий во время менструации и во время родов помогая появлению малыша на свет. Способность матки сокращаться очень важна. Она увеличивается в 11 раз за беременность! И потом быстро уменьшается. Норма – небольшой периодически проявляющийся тонус матки, но вот гипертонус – не совсем нормален. Интересно, что спазмы матки видны и на УЗИ.

Гипертонус угрожает плаценте, может перекрывать кислород и полезные вещества. В первом триместре беременности тонус или гипертонус могут быть и почти не ощутимы женщиной, потому что матка ещё маленькая.

Во втором и третьем триместрах тонус ощущается как внезапное напряжение, болезненная твёрдость живота, даже лёгкие схватки. Гипертонус угрожает раскрыть шейку матки раньше времени.

Инструмент противодействия тонизированию матки — прогестерон – гормон, расслабляющий мускулатуру. Он «гасит» «тревожную» матку и даже тревожность беременной, влияя на ЦНС.

Тонизирование матки в идеале не должно беспокоить беременную женщину до того момента, как беременность станет доношенной (37 недель), и когда могут появляться тренировочные схватки.

Гипертонус на более ранних сроках – повод для изучения причины и иногда повод для беспокойства, если появились кровянистые выделения и боль. Чаще всего повышенный тонус матки беременных говорит о недостатке прогестерона или (редко) о его избыточном количестве.

Матка напрягается на любом сроке из-за сочетания ряда причин:

  • Половой акт;
  • Стресс;
  • Усталость;
  • Многоплодная беременность;
  • Гормональные нарушения;
  • Эндометриоз;
  • Воспаления;
  • Приём алкоголя, курение;
  • Резус-конфликт;
  • Тяжёлый токсикоз;
  • Генетические нарушения у плода;
  • Дефицит микроэлементов;
  • Крупный плод, несколько плодов в матке;
  • Большой объём околоплодных вод;
  • Повышенная свертываемость крови;
  • Психологические проблемы;
  • Дальние поездки или перелёт на самолёте;
  • Расстройство кишечной моторики, запоры.

Обычно для расслабления миометрия матки назначают свечи с папаверином, но-шпу, дюфастон или утрожестан. Также рекомендуют соблюдать охранительный режим жизни.

Если есть ещё какие-то риски по состоянию здоровья или боли усиливаются, или есть подозрительные выделения, необходимо амбулаторное лечение — в зависимости от тяжести гипертонуса и срока беременности. Препараты могут быть в виде витаминов, уколов, капельниц. Всё для того, чтобы снять спазмы и расслабить мышцы и женщину.

Если беременная ощущает тонус и пока не может добраться до врача, ей желательно успокоиться, лечь, использовать свечи папаверина, принять но-шпу, пару таблеток валерианки. Можно встать в коленно-локтевую позицию, потом опять прилечь.

Любой беременной лучше питаться лёгкой пищей, чтобы не было вздутия живота, провоцирующего тонус, отдыхать как можно чаще, не совершать трудовых подвигов, регулярно посещать своего врача, который будет наблюдать за самочувствием в динамике.

До 12 недели беременности (1 триместр) о тонусе матки говорят боли внизу живота и в пояснице. Во 2 и 3 триместре матка сжимается, твердеет, её можно ощущать снаружи. Опасность этого состояния в том, что это сжатие ухудшает доступ кислорода к плоду.

До 22 недели при постоянном гипертонусе есть угроза выкидыша и неконтролируемого кровотечения. Если у беременной обнаруживается гипертонус матки, чаще всего назначают дополнительные исследования (КТГ, оценка кровотока сосудов и пр.) и постоянный приём препаратов прогестерона и расслабляющих мышцы свечей. Конечно, необходим также охранительный режим беременности. Если нет кровотечений и «схваткообразные» боли появляются и уходят, угрозы для плода нет, можно находится дома, а не в больнице, но избегать физической и эмоциональной нагрузок.

После 37-38 недели беременности спазмы даже приветствуются, рассматриваются совсем иначе: как тренировочные схватки, или сокращения Брэкстон-Хикса, готовящие матку к родам.

Появление гипертонуса – показание к половому покою. При гипертонусе матки может помочь диета, исключающая бобовые, яйца, кофе, копчёности. Нужен покой, режим преимущественно постельный, приём спазмолитиков, витамина В6, магния, успокоительных. Но назначение, конечно, должен дать лечащий врач. Он же и сделать заключение о том, является ли тонус матки вариантом нормы или патологией.

Предвестники родов

Беременность, к счастью, не бывает хронической и когда-нибудь она обязательно заканчивается родами. 🙂 Ваш ребёнок созрел и готов к появлению на свет при сроке беременности от 37 до 41 недели. В течение всего этого времени изменения в организме были направлены на то, чтобы сохранить беременность и способствовать её продлению.

 

Однако, чтобы наступили роды, тоже необходима подготовка. В связи с этим можно выделить так называемый «прелиминарный» (подготовительный) период – период перед родами длительностью от нескольких часов до 2-х недель.

 

Признаками этого периода являются:

 

  • Периодические сокращения матки

Приблизительно с 30 недель беременности ощущаются непроизвольные сокращения гладких мышц матки. Говорят, что матка «приходит в тонус», становится твёрдой, плотной. Как правило, женщине это не приносит неприятных ощущений. С увеличением срока беременности сокращения матки становятся чаще и продолжительнее.

 

Как отличить «ложные» схватки от начала родов? Ориентируйтесь на время между схватками и их продолжительность. Если матка приходит в тонус каждые 15-20 минут на 15-20 секунд (легко определить по часам с секундной стрелкой), то это говорит о начале родов. Если же сокращения матки нерегулярные и проходят после отдыха или сна, то ехать в роддом еще рано.

 

  • Отхождение слизистой пробки

«Слизистая пробка» – это небольшой комочек слизи буровато-коричневого цвета, иногда с прожилками крови, который находится в канале шейки матки в течение всей беременности, содержит большое количество антимикробных веществ и не даёт инфекции из влагалища попасть в полость матки.

 

В конце беременности в результате укорочения и раскрытия шейки матки этот комочек выходит из неё. Чаще происходит это постепенно в течение 1,5-2-х последних перед родами недель, иногда действительно в виде «пробки» непосредственно перед родами.

 

  • «Опускание живота»

Является следствием опускания головки плода в малый таз. Беременные отмечают, что им стало легче дышать, уменьшаются жалобы со стороны желудочно-кишечного тракта (изжога, отрыжка), однако появляется чувство распирания в лобке, некоторое учащение мочеиспусканий, что также является нормой в этот период.

 

  • Уменьшение аппетита

Следствием этого является снижение веса беременной до 1-2 килограммов перед родами.

 

  • Снижение двигательной активности ребёнка

Происходит это потому, что ему попросту тесно в матке, он ведь уже достаточно большой.

 

  • Если Вы слышали про симптом «гнездования» у беременных, то в этот период его проявления максимальны – хочется сделать ремонт в детской, переставить мебель или хотя бы купить новую шторку.

 

Как уже упоминалось, все эти симптомы могут наблюдаться в течение 2-х недель перед родами, поэтому в приёмный покой родильного дома часто обращаются беременные именно с предвестниками родов, а не с их  началом. Я рекомендую ехать в роддом с началом родовой деятельности (при отсутствии показаний для дородовой госпитализации), чтобы не удлинять время нахождения в стационаре. Дома, в привычной обстановке женщина чувствует себя увереннее и спокойнее.

 

Когда же необходимо ехать в роддом?

 

  • При наличии регулярных схваток (тянущих ощущений в низу живота, пояснице), которые появляются повторно после отдыха через 15-20 минут. Если у Вас повторные роды и промежуток между ними невелик, можно поехать чуть раньше.

 

  • При излитии околоплодных вод, независимо от того, есть у Вас схватки или нет. Околоплодные воды – жидкость, в которой ребёнок находится на протяжении всей беременности. Из половых путей появляется «вода» – много или чуть-чуть (подтекание). Иногда женщины путают это с недержанием мочи, однако если это произошло – отправляйтесь в роддом.
     
  • При появлении кровянистых выделений из половых путей.

 

Желаю, чтобы Ваши предвестники плавно перешли в роды и благополучно завершились появлением на свет здорового малыша!

 

 

(Фото Светланы Доборович-Бенько)

 

Шкода Татьяна

врач

акушер-гинеколог

 

 

 

 

Обратиться за консультацией к этому специалисту

 

 

Статья размещена 08.06.2011

 


Читать еще:

 

Справочник: РОДДОМА г.Минска

СПРАВОЧНИК: Роддом при УЗ «1-я Городская клиническая больница» г.Минска

СПРАВОЧНИК: УЗ «Городской клинический родильный дом №2» г.Минска

СПРАВОЧНИК: Родильный дом УЗ «5-ая городская клиническая больница» г.Минска

СПРАВОЧНИК: ГУ «Республиканский научно-практический центр «Мать и дитя»

Преимущества естественных родов

Что нужно знать о сексе при беременности

Частые вопросы о сексе при беременности.

Когда воздерживаться от половой жизни при беременности

  • Если раньше были выкидыши, преждевременные роды
  • Угроза прерывания данной беременности (повышенный тонус матки или короткая шейка матки)
  • Вагинальные кровотечения
  • Болезненные ощущения во время полового акта
  • Предлежание плаценты (состояние, при котором плацента располагается низко, закрывая шейку матки)
  • Многоплодная беременность (двойня, тройня и т. д.)
  • При наличии инфекций, передающихся половым путем, использовать презерватив
Проконсультируйтесь со своим врачом, потому что не всегда хорошее самочувствие означает отсутствие осложнений беременности.

Может ли половая жизнь навредить ребенку

Часто пары боятся, что они навредят ребенку. Ребенок окружен и смягчен амниотической жидкостью, мышечным слоем матки, шейкой матки, которая имеет еще и слизистую пробку.

Нормально ли не испытывать сексуального желания при беременности

 Да, это может быть. Сексуальное желание у некоторых женщин биологически обусловлено, поэтому, когда цель (наступление беременности) достигнута, некоторые женщины не испытывают сексуального влечения.

Почему во время полового акта из молочных желез появляются выделения

Молочная железа во время беременности готовится к кормлению ребенка заранее, примерно с 12 недель начинается выработка молозива (густая жидкость желтоватого цвета).

Во время полового возбуждения высвобождается гормон окситоцин. Это тот же гормон, который выделяется при кормлении грудью. «Гормон любви», который отвечает за сексуальное влечение, также обеспечивает выделение молока. Поэтому вполне естественно, что небольшое количество молозива может появляться при половом акте.

Может ли половая жизнь спровоцировать роды

Иногда после сексуальных отношений может начаться родовая деятельность, но это происходит, если организм женщины полностью готов к родам (в последние недели беременности — начиная с 37-38 недель).

Это обусловлено присутствием в сперме простагландинов – биологически активных веществ, которые стимулируют маточные сокращения. Поэтому, если срок родов уже наступил, половая жизнь может способствовать началу родов.

Физиологические изменения в организме при беременности

С самых первых дней беременности организм женщины подвергается глубоким преобразованиям. Эти преобразования являются результатом слаженной работы практически всех систем организма, а также результатом взаимодействия организма матери с организмом ребенка. Во время беременности многие внутренние органы подвергаются значительной перестройке. Эти изменения, носят адаптативный характер, и, в большинстве случаев, недолговременны и полностью исчезают после родов. Рассмотрим изменения основных систем жизнедеятельности организма женщины во время беременности.

Дыхательная система во время беременности работает усиленно. Частота дыхания увеличивается. Связано это с увеличением потребности организма матери и плода в кислороде, а также в ограничении дыхательных движений диафрагмы из-за увеличения размеров матки, занимающей значительное пространство брюшной полости.              

Сердечно-сосудистая система матери во время беременности вынуждена перекачивать большее количество крови для обеспечения адекватного снабжения плода питательными веществами и кислородом. В связи с этим, во время беременности, увеличивается толщина и сила сердечных мышц, учащается пульс и количество крови, перекачиваемое сердцем за одну минуту. Кроме того, увеличивается объем циркулирующей крови. В некоторых случаях увеличивается кровяное давление. Тонус кровеносных сосудов во время беременности снижается, что создает благоприятные условия для усиленного снабжения тканей питательными веществами и кислородом. Во время беременности резко уменьшается сеть сосудов матки, влагалища, молочных желез. На наружных половых органах, во влагалище, нижних конечностях нередко наблюдается расширение вен, иногда образование варикозных узлов. ЧСС во второй половине беременности снижается. Принято считать, что подъём АД свыше 120-130 и понижение до 100 мм.рт.ст. сигнализируют о возникновении осложнений беременности. Но важно иметь данные об исходном уровне АД.   

Изменения со стороны системы крови. Во время беременности усиливается кроветворение, возрастает количество эритроцитов, гемоглобина, плазмы и ОЦК. ОЦК к концу беременности возрастает на 30-40%, а эритроцитов—на 15-20%. У многих здоровых беременных наблюдается небольшой лейкоцитоз. СОЭ во время беременности возрастает до 30-40. В свёртывающей системе происходят изменения, которые способствуют гемостазу и предотвращению значительной кровопотере при родах или отслойке плаценты и в раннем послеродовом периоде.

Почки во время беременности работают усиленно. Они выделяют продукты распада веществ из организма матери и плода (продукты жизнедеятельности плода через плаценту переходят в кровь матери).

Изменения пищеварительной системы представлены повышением аппетита (в большинстве случаев), тягой к соленой и кислой пище. В некоторых случаях, появляется отвращение к некоторым продуктам или блюдам, которые хорошо переносились до начала беременности. Из-за повышения тонуса блуждающего нерва могут появиться запоры.

Наиболее значительные изменения, однако, происходят в половых органах беременной женщины. Эти изменения подготавливают половую систему женщины к родам и кормлению ребенка.

Матка беременной женщины значительно увеличивается в размерах. Ее масса возрастает с 50 г. – в начале беременности до 1200 г. – в конце беременности. Объем полости матки к концу беременности увеличивается более чем в 500 раз! Кровоснабжение матки значительно увеличивается. В стенках матки увеличивается количество мышечных волокон. Шейка матки заполняется густой слизью, закупоривающую полость канала шейки матки. Маточные трубы и яичники также увеличиваются в размерах. В одном из яичников наблюдается «желтое тело беременности» – место синтеза гормонов поддерживающих беременность. Стенки влагалища разрыхлятся, становятся более эластичными. Наружные половые органы (малые и большие половые губы), так же увеличиваются в размерах и становятся более эластичными. Разрыхляются ткани промежности. Кроме того, наблюдается увеличение подвижности в суставах таза и расхождение лобковых костей. Описанные выше изменения половых путей имеют крайне важно физиологическое значение для родов. Разрыхление стенок, увеличение подвижности и эластичности половых путей увеличивает их пропускную способность и облегчает продвижение по ним плода при родах.

Кожа в зоне половых органов и по срединной линии живота обычно становится более темного цвета. Иногда на коже боковых частей живота образуются «растяжки», которые после родов превращаются в белесоватые полоски.

Молочные железы увеличиваются в размерах, становятся более упругими, напряженными. При надавливании на сосок наблюдается выделения молозива (первого молока).

Изменения костного скелета и мышечной системы.Увеличение концентрации в крови гормонов релаксина и прогестерона способствуют вымыванию кальция из костной системы. Это способствует уменьшению жесткости соединений между костями таза и повышению эластичности тазового кольца. Повышение эластичности таза имеет большое значение в увеличении диаметра внутреннего костного кольца в первом периоде родов и дальнейшему снижению сопротивления родового тракта движению плода во втором периоде родов. Также кальций, вымываемый из костной системы матери, идет на строительство скелета плода.

Следует отметить, что соединения кальция вымываются из всех костей материнского скелета (включая кости стопы и позвоночника). Как было показано ранее, вес женщины увеличивается в течение беременности на 10 -12 кг. Эта дополнительная нагрузка на фоне уменьшения жесткости костей способна вызвать деформацию стопы и развитие плоскостопия. Смещение центра тяжести тела беременной за счет увеличения веса матки может привести к изменению кривизны позвоночника и появлению болей в спине и в костях таза. Поэтому для профилактики плоскостопия беременным рекомендуется носить удобную обувь на низком каблуке. Желательно использовать супинаторы, поддерживающие свод стопы. Для профилактики болей в спине рекомендуются специальные физические упражнения, способные разгрузить позвоночник и крестец, а также ношение удобного бандажа. Несмотря на увеличение потерь кальция костями скелета беременной женщины и увеличение их эластичности, структура и плотность костей (как это бывает при остеопорозе у пожилых женщин).

Изменения в нервной системе. В первые месяцы беременности и в конце её происходит понижение возбудимости коры головного мозга, которое достигает наибольшей степени к моменту наступления родов. К этому же периоду возрастает возбудимость рецепторов беременной матки. В начале беременности наблюдается повышение тонуса блуждающего нерва, в связи, с чем нередко возникают различные явления: изменения вкуса и обоняния, тошнота, повышенное выделение слюны и т.д.

В деятельности эндокринных желез происходят существенные изменения, способствующие правильному течению беременности и родов. Изменения массы организма. К концу беременности вес женщины увеличивается примерно на 10-12 кг. Эта величина распределяется следующим образом: плод, плацента, оболочки и околоплодные воды – примерно 4,0 – 4,5 кг, матка и грудные железы –1,0 кг, кровь – 1,5 кг, межклеточная (тканевая) жидкость – 1 кг, увеличение массы жировой ткани тела матери – 4 кг.

Стероидные гормоны и адаптация сосудов матки к беременности

Эстроген-опосредованный UBF

Влияние эстрогена на системный и маточный кровоток

UBF колеблется вместе с изменениями стероидного профиля в течение полового цикла и беременности. Во время фолликулярной фазы эстрального цикла, которая характеризуется повышенным соотношением эстрогена и прогестерона, UBF увеличивается. Во время последующей лютеиновой фазы, которая характеризуется высоким содержанием прогестерона и низким уровнем эстрогена, UBF уменьшается. 2 , 3 С другой стороны, во время беременности, которая характеризуется высоким содержанием прогестерона и эстрогена, UBF постоянно увеличивается. 4 Поскольку паттерны UBF изменяются вместе с профилем стероидных гормонов, различные исследования сосредоточены на путях, которыми индуцируются эти сосудистые ответы. Эстрадиол-17β (E2β) является сильнодействующим вазодилататором, который использовался для оценки влияния стероидных гормонов яичников на гемодинамические параметры. Предыдущие исследования на небеременных овариэктомированных овцах показали, что системная инфузия E2β изменяет сердечно-сосудистые параметры за счет увеличения частоты сердечных сокращений и сердечного выброса и снижения системного сосудистого сопротивления. 5 Системная инфузия E2β также увеличивает UBF; однако местная инфузия увеличивает UBF без изменения системных параметров, что позволяет предположить, что ответ матки на эстроген опосредуется локально и не зависит от системных эффектов. 5 Большинство исследований in vivo на сегодняшний день сосредоточено в основном на острых и негеномных эффектах эстрогена на расслабление маточной артерии, наблюдаемых при концентрациях, значительно превышающих физиологические концентрации. 5 10 Геномное действие физиологически значимых концентраций стероидного гормона на сократимость маточных артерий и миогенный тонус и их адаптация к беременности остаются недостаточно изученными.Тем не менее, различия между фармакологическими и физиологическими ответами UBF на эстроген были признаны. 11

Роль передачи сигналов рецептора эстрогена (ER) в UBF

Большая часть современной литературы поддерживает участие стероидных рецепторов в модуляции сосудистой сети для контроля кровотока. Во-первых, было установлено, что ER присутствуют как в эндотелиальном, так и в VSM маточной артерии. 12 , 13 На молекулярном уровне преобладающие биологические эффекты эстрогена проявляются ER (ERα и ERβ), которые принадлежат к суперсемейству стероидных гормонов ядерных рецепторов. 1 К настоящему времени описанные подтипы ER включают ERα и ERβ, которые опосредуют эстрогенные эффекты в тканях-мишенях. 1 После связывания с гормоном эти рецепторы действуют как факторы транскрипции, которые связываются со специфическими участками ДНК для регулирования экспрессии генов. 1 Это приводит к увеличению или уменьшению количества транскриптов мРНК в зависимости от исследуемой ткани. Это явление описывается как геномный ответ и может занять от нескольких часов до нескольких дней, прежде чем проявится начальный эффект, в отличие от негеномного ответа, при котором эффект является немедленным, но часто короче по продолжительности.Известно, что эти рецепторы присутствуют во многих тканях и видах, включая маточные артерии человека и овцы, но функциональную реакцию, запускаемую этими рецепторами, установить труднее. 13 15 Появляется все больше свидетельств того, что усиление UBF является ER-опосредованным процессом. 16 , 17 Во-первых, было показано, что разные эстрогены, включая E2β, эстрон и эстриол, вызывают одинаковый паттерн и эффективность эстрогенового повышения при UBF. 6 , 7 , 16 , 18 Во-вторых, графики Лайнуивера-Берка проиллюстрировали, что катехоловые эстрогены и эстрадиол имеют общие перехваты и , что предполагает, что они связываются с одними и теми же рецепторами. 16 , 19 В-третьих, овцы, обработанные чистым антагонистом ER ICI 182780, продемонстрировали снижение индуцированного E2β повышения UBF в результате индуцированной блокады ER. 16 Эти наблюдения демонстрируют, что ER как минимум частично ответственны за эстроген-опосредованное увеличение UBF.Присутствие ER как в эндотелиальных клетках, так и в клетках VSM маточной артерии предполагает, что оба типа клеток являются потенциальными мишенями для повышенного уровня эстрогена во время беременности. 13

Эстроген-опосредованная адаптация эндотелия маточной артерии к беременности

Тенденции в экспрессии eNOS во время воздействия эстрогена

Многочисленные исследования в прошлом указали, что оксид азота (NO) является одним из основных медиаторов в эндотелий-зависимом пути развития эстроген-индуцированная вазодилатация матки. 9 , 10 , 20 Наблюдения показали, что ингибирование NO-синтазы (NOS) ослабляет эстроген-индуцированное увеличение UBF на 60-70%. 9 , 10 Эндотелиальная синтаза оксида азота (eNOS), расположенная в эндотелии маточной артерии, частично отвечает за сосудорасширяющее действие на поздних сроках беременности. 3 , 21 Тенденция экспрессии eNOS, по-видимому, связана с тенденцией в уровнях эстрогена.Например, экспрессия белка eNOS в эндотелии маточной артерии увеличивается в периоды состояний с преобладанием эстрогена, включая нормальную беременность и фолликулярную фазу яичникового цикла. 21 С другой стороны, уровни белка eNOS и мРНК самые низкие у животных после овариэктомии и во время лютеиновой фазы, которая характеризуется низким уровнем эстрогена. 21 Эти данные не доказывают, что эстроген непосредственно отвечает за уровни и активность eNOS, но наводят на мысль о связи между повышенным уровнем эстрогена и экспрессией eNOS.

Механизмы активации eNOS

Предложены механизмы, объясняющие повышение активности eNOS во время беременности. 4 Первоначально считалось, что регуляция eNOS включает изменения в экспрессии белка или повышение концентрации кальция в цитозоле ([Ca 2+ ] i ), что, в свою очередь, способствует связыванию кальмодулина, активируемого кальцием. 22 Однако eNOS может также образовывать NO через [Ca 2+ ] i -нечувствительные пути, как было представлено в предыдущих исследованиях, которые продемонстрировали активацию eNOS в присутствии базального [Ca 2+ ] i , но отсутствие повышенного [Ca 2+ ] i . 4 , 23 27 Также было показано, что существуют киназы, которые функционируют независимо от Ca 2+ , воздействуя на несколько сайтов фосфорилирования на eNOS. 4 , 28 30 Это, в свою очередь, либо опосредует активацию eNOS, либо вызывает повышение чувствительности eNOS к колебаниям цитозольного [Ca 2+ ] i . 4 , 28 30 Хотя исследователям удалось идентифицировать сайты фосфорилирования нескольких ключевых аминокислотных остатков eNOS, которые являются потенциальными сайтами регуляции, было показано, что изменения в фосфорилировании этих остатков не является достаточным предиктором активности эндотелиальных клеток маточной артерии беременных. 22 Предполагается, что причина этого заключается в том, что активность eNOS включает множество эффектов, которые взаимодействуют друг с другом, включая фосфорилирование, влияние Ca 2+ , кофакторов и субклеточную локализацию. 22

Роль ER-зависимой передачи сигналов в продукции NO

Имеются данные, показывающие, что стимуляция ER — это событие, связанное с экспрессией eNOS во время беременности в маточной артерии. 31 , 32 Предыдущие исследования с E2β и мембранонепроницаемым конъюгатом E2β-бычий сывороточный альбумин показали, что активации плазматической мембраны или цитозольного ER было достаточно для индукции экспрессии eNOS. 32 Это предполагает, что задействованы как немедленные, острые вазодилататорные эффекты эстрогена, опосредованные стимуляцией ER плазматической мембраны, так и долгосрочные, опосредованные геномом механизмы, опосредованные цитозольным ER, который обладает активностью транскрипционного фактора. Дополнительные механистические исследования также показали, что активация eNOS блокируется обработкой специфическими антагонистами ER, блокируется ингибированием тирозинкиназ или митоген-активируемой протеинкиназы и не зависит от актиномицина D. 31 Очевидно, что эстроген-индуцированное повышение продукции NO в эндотелии маточной артерии, по крайней мере, частично опосредовано митоген-активируемым сигналом белка и ER-зависимыми механизмами. 32 Установлено, что eNOS обладает множественными сайтами фосфорилирования для киназ, включая ERK2 / 1, которые могут либо стимулировать, либо ингибировать активность eNOS в зависимости от типа эндотелиальных клеток. 31 35 Было показано, что в случае культивирования эндотелиальных клеток маточной артерии действие ERK2 / 1 является стимулирующим. 28 , 32 E2β вызывал активацию ERK2 / 1 зависимым от времени и дозозависимым образом, что, в свою очередь, увеличивало продукцию NO в культивируемых эндотелиальных клетках маточной артерии. 32 Однако при ингибировании пути ERK с помощью PD98059, E2β-опосредованная активация eNOS и продукция NO были предотвращены. 32 Хотя также показано, что eNOS обладает сайтами фосфорилирования для киназы Akt, ингибирование активации Akt путем предварительной обработки {«type»: «entrez-нуклеотид», «attrs»: {«text»: «LY294004″, » term_id «:» 1257998348 «,» term_text «:» LY294004 «}} LY294004 не подавляет эстроген-опосредованную продукцию NO. 32 , 36 , 37 Похоже, что передача сигналов ERK2 / 1, но не Akt, участвует в индуцированной эстрогеном активации eNOS и продукции NO в эндотелиальных клетках маточной артерии. 32

Роль тканеспецифических факторов в чувствительности к эстрогену

eNOS не распространяется только на маточную артерию, но также может быть обнаружена в непродуктивных тканях. Однако не все эти ткани имеют eNOS, экспрессия которой изменяется эстрогеном и прогестероном.Количество eNOS изменяется во время лечения половыми стероидами в маточной артерии; однако об изменениях eNOS сальниковой, почечной или молочной артерии не сообщается. 3 В соответствии с этими выводами показано, что эстроген увеличивает кровоток в маточной артерии, но не влияет на кровоток в сальниковой артерии. 12 Это говорит о том, что маточная артерия обладает уникальными характеристиками, которые отличают ее от других артерий. Одно из возможных объяснений может быть связано с различиями в плотности и распределении рецепторов в тканях-мишенях.Документально подтверждено, что уровни ERα и ERβ варьируются в зависимости от сосудистого русла, и их относительное соотношение имеет решающее значение для общего биологического ответа на эстроген. 13 Хотя ER присутствуют в эндотелии сальниковой артерии, их уровни не изменяются яичниковым циклом, овариэктомией или заместительной гормональной терапией. 12 Однако маточная артерия содержит ERα и ERβ, которые по-разному регулируются в ответ на половые стероиды. 12 Например, исследования овец показали, что экзогенный эстроген, прогестерон или комбинация этих двух стероидов увеличивает уровни эндотелиального ERβ; однако только лечение эстрогеном, но не прогестероном или их комбинацией, увеличивает экспрессию ERα. 12 Исследование in vitro культивированных эндотелиальных клеток маточной артерии показало, что лечение эстрогенами не влияет на мРНК ERα или ERβ, но вызывает подавление их ассоциированных белков. 38 Предлагаемая гипотеза состоит в том, что эстроген активирует протеасомный путь, опосредуя деградацию ER. 38 Об этом свидетельствуют исследования, показывающие, что использования необратимого ингибитора протеасом, лактацистина, достаточно для блокирования деградации ERα и ERβ. 38 Инсулин, который является известным обратимым ингибитором деградации белка, ингибирует деградацию для подтипа ERα, но не для подтипа ERβ. 39 Избирательное действие инсулина можно отнести к пути, который блокирует активность убиквитинлигазы, которая специфична для ERα, но не для ERβ. 38 Требуются дальнейшие исследования, демонстрирующие различия в регуляции изоформ ER.

Роль кавеолина-1 в регуляции ER во время воздействия эстрогена

Интересный механизм, который объясняет эстроген-опосредованную регуляцию ER, включает секвестрирующий эффект кавеолина-1 на плазматической мембране.Кавеолин-1 действует как белок плазматической мембраны, который секвестрирует eNOS, делая его менее активным или неактивным. 10 , 40 Он действует как эндогенный ингибитор eNOS, связываясь с ним, что приводит к инактивации этого фермента. Как только кавеолин-1 отделяется от комплекса, активность eNOS восстанавливается, и, таким образом, происходит выработка NO. 41 Было показано, что кавеолин-1 совместно с ERα и eNOS формирует функциональный регуляторный комплекс на плазматической мембране эндотелиальных клеток маточной артерии. 13 , 42 Хотя ERβ также присутствует на плазматической мембране, его связь с кавеолином-1 остается неизвестной, поскольку предыдущие попытки обнаружения с помощью иммуноцитохимического анализа были безуспешными. 13 , 42 Понимание значения индивидуальных ролей изоформ ER представляет интерес для будущих исследований.

Эффект беременности или лечения стероидами на регуляцию изоформ ER

Показано, что в культивируемых эндотелиальных клетках маточной артерии, выделенных от беременных овец, уровни мРНК ERα значительно превышают уровни мРНК ERβ, что подтверждает аргумент, что Вариант играет более важную роль в осуществлении эффектов эстрогена, по крайней мере, для этого конкретного типа клеток. 13 В другом исследовании, однако, Вестерн-анализ показал, что у интактных овец беременность связана с увеличением только β-варианта по сравнению с лютеиновой фазой. 12 У овариэктомированных носителей только вариант ERβ, но не вариант ERα, значительно снижен. Экзогенного эстрогена, прогестерона или их комбинации было достаточно для повышения эндотелиальных уровней ERβ; однако только лечение эстрогеном, но не прогестероном или их комбинацией, увеличивало экспрессию ERα. 12 Неясно, какая из 2 изоформ более значима в отношении эстроген-опосредованной вазодилатации маточной артерии; однако эти данные подтверждают мнение о том, что ERα и ERβ по-разному регулируются в ответ на половые стероиды яичников.

Эстроген-опосредованная адаптация гладких мышц маточной артерии к беременности

Роль VSM-зависимых путей в эстроген-опосредованной вазодилатации маточной артерии

Многие исследования были сосредоточены на эндотелий / NO-зависимом пути для изучения эстроген-индуцированной вазодилатации матки .Однако на это приходится только примерно 65–70% вазодилатации матки, что подразумевает участие альтернативных путей, которые могут быть независимыми от эндотелия. 9 , 13 Недавно было показано, что эстроген воздействует на VSM маточной артерии с помощью различных стратегий, которые включают путь циклического гуанозинмонофосфата (cGMP) и активацию калиевых каналов VSM. 17 Розенфельд и др. 9 сообщили о нескольких интересных открытиях, касающихся пути цГМФ.Показано, что инфузия E2β увеличивает секрецию цГМФ и UBF; однако ингибирование NOS с помощью L-NAME снижает секрецию цГМФ примерно на 66%. 9 Хотя L-NAME смог снизить секрецию цГМФ как у беременных, так и у небеременных животных, UBF упал в группе небеременных, но не пострадал в группе беременных. 9 Очевидно, что механизм цГМФ, хотя и интересен и особенно применим к небеременным UBF, не является доминирующей стратегией во время беременности.Что касается эффектов NOS, продуцирование NO ранее считалось механизмом, специфичным для эндотелия, но растет поддержка того, что NOS в VSM также может быть задействована. Salhab et al. 43 впервые представили, что nNOS присутствует в миоцитах сосудов матки и что его экспрессия увеличивается при длительном, но не остром воздействии эстрогена. Однако индивидуальный вклад этого конкретного изофермента во время беременности до сих пор не известен. Может быть интересно рассмотреть связь между передачей сигналов, опосредованной VSM ER, с ранее упомянутыми эндотелий-независимыми путями.Гладкая мышца является потенциальной мишенью для эстрогена, поскольку оба подтипа ER, α и β, были обнаружены в клетках гладких мышц маточной артерии. 13 Было показано, что лечение антагонистом ER ICI 182780 влияет на UBF, но эти исследования не информативны об индивидуальном вкладе VSM в отличие от всей маточной артерии в целом. 16 Возможно, стоит обратиться к исследованиям ex vivo на маточной артерии, чтобы определить функциональный эффект антагонизма рецепторов в отношении слоя гладких мышц.

Активированные кальцием каналы K
+ модулируют активность VSM маточной артерии во время воздействия эстрогена

Помимо пути цГМФ, каналы K + также важны из-за их способности регулировать базальный артериальный тонус. 44 Это опосредуется гиперполяризацией гладкомышечной мембраны, которая блокирует проникновение Ca 2+ через потенциалзависимые каналы, способствуя вазорелаксации артерии. 44 В VSM выражены несколько типов калиевых каналов, которые включают в себя потенциал-зависимые каналы K + (K v ), кальций-активируемые каналы K + (K Ca ), ATP- чувствительных каналов K + (K ATP ) и каналов внутреннего выпрямителя K + (K ir ). 45 Из них активированный кальцием калиевый канал, также известный как канал ВК Са , наиболее часто изучается во время беременности. 44 Показано, что у небеременных и беременных овцематок избирательная блокада BK Ca в маточной артерии снижает индуцированное E2β повышение UBF. 44 , 46 Инфузия тетраэтиламмония (TEA) для индукции блокады каналов BK Ca вызвала дозозависимое ослабление E2β-опосредованной вазодилатации, что аналогично эффекту одной инфузии L-NAME. 9 , 46 Когда TEA и L-NAME были введены вместе, наблюдалось полное ингибирование E2β-индуцированного повышения UBF, хотя базальный UBF оставался нетронутым. 46 Это говорит о том, что 2 пути могут взаимодействовать, но все же может быть задействован другой механизм. 17 Механизм действия E2β может включать прямое связывание с b-субъединицей канала Ca BK или непрямым путем, посредством которого E2β связывается с рецептором, чтобы запустить ферментативный каскад, который приводит к активации канала. вниз по течению. 46 , 47 Могут быть задействованы острые негеномные механизмы, потому что UBF повышается сразу после прекращения инфузии TEA. 46 Интересно, что хотя острое или ежедневное лечение E2β не влияет на плотность BK Ca , ежедневное лечение увеличивает субъединицу b 1 в проксимальном и дистальном VSM маточной артерии, что может изменить чувствительность канала / чувствительность к эстрогену. . 48 Предыдущие исследования показали, что изменения только стехиометрии a: b1 без изменения плотности каналов влияют на чувствительность канала BK Ca к E 2 β. 47 49 В соответствии с этими выводами, модели нокаута β1-субъединицы продемонстрировали более выраженные системные прессорные реакции, включая повышенный тонус сосудов и гипертензию. 43 , 50 , 51 Это говорит о том, что повышение уровня мРНК и белка β 1 -субъединицы для повышения чувствительности каналов к E 2 β является потенциальной стратегией вазорелаксации маточной артерии при уровень ВСМ при беременности.

Роль альтернативных каналов K
+ в регуляции сократительной способности маточной артерии

Что касается других типов каналов K + , текущая литература предполагает, что ингибирование канала K ATP с низкой проводимостью не имело эффекта на исходном уровне или E2β-опосредованном UBF. 17 Было также показано, что ингибирование канала K v не влияет на местные параметры, включая базальное UBF или сопротивление сосудов матки при дозах <1.0 мМ, хотя среднее артериальное давление было повышено. 17 Из всех упомянутых каналов K + , BK Ca является наиболее хорошо изученным в отношении сосудораслабляющих механизмов на уровне гладкой мускулатуры у овец. У свинок потенциально-чувствительный канал (PSC) является важной мишенью для эстрогена. Было показано, что ткань эндометрия у свинок превращает E2β и эстрон в 4-гидроксилированные формы, которые затем транспортируются в сосудистую сеть маточной артерии. 52 Попав в маточную артерию, эти эстрогены связываются и блокируют перивакулярную активность α-адренорецепторов, что снижает сужение сосудов. 2 В другом исследовании также было показано, что катехол-эстроген 4-гидроксилированный эстрадиол блокировал захват Ca 2+ через PSC, тем самым снижая сократимость маточной артерии. 52 Пониженное поглощение Ca 2+ через PSC снижает клеточную активность PKC, тем самым снижая тонус маточной артерии. 53 , 54 Эти исследования показывают, что катехол-эстрогены также важны в регуляции сократимости маточной артерии через механизмы, зависящие от гладких мышц.

Роль эстрогена в регуляции миогенного тонуса маточной артерии

Миогенная активность является внутренним свойством VSM в ответ на давление или растяжение. Он регулируется паракринными или эндокринными веществами, но не требует образования нервов или эндотелия.Физиологическое значение миогенного ответа в регуляции UBF при беременности человека было продемонстрировано на артериях миометрия доношенных беременных. 55 , 56 Было обнаружено, что миогенный тонус повышен или понижен в маточных артериях беременных крыс, мышей и кроликов. 57 59 Недавние исследования на овцах четко продемонстрировали, что индуцированная давлением миогенная реакция значительно снижается, а растяжимость маточной артерии увеличивается у беременных животных. 60 Подобные результаты показали снижение индуцированного давлением миогенного тонуса маточных, брыжеечных и почечных артерий у беременных мышей и крыс. 59 , 61 63 Среди других механизмов многочисленные исследования продемонстрировали важную роль PKC в регуляции артериального миогенного ответа. 64 68 Было продемонстрировано, что PKC играет ключевую роль в регуляции миогенного тонуса маточных артерий резистентного размера, а снижение миогенного тонуса в маточной артерии беременной в первую очередь опосредуется снижением PKC. сигнальный путь. 60 , 69 , 70 В соответствии с этими данными было показано, что беременность связана с ослаблением артериальной активности PKC. 53 , 54 , 71 73 В маточных артериях овцы у беременных животных опосредованные PKC сокращения были значительно подавлены. 70 , 74 Недавно исследования на модельной системе культуры ткани ex vivo показали, что хроническое лечение (48 часов) небеременных маточных артерий овцы физиологически релевантными концентрациями E2β (0.3-10 нМ) значительно снижали PKC-опосредованные сокращения. 75 Напротив, острое лечение стероидным гормоном не имело эффекта на PKC-опосредованные сокращения. Подобная временная реакция на повышение UBF была продемонстрирована у овец с интактными яичниками, показывая максимальное увеличение UBF примерно через 45-55 часов у животных, леченных физиологически стероидными гормонами. 11 В соответствии с геномными эффектами стероидного гормона, наблюдаемыми в небеременных маточных артериях, лечение беременных маточных артерий в течение 48 часов антагонистом ER ICI 182780 значительно увеличивало PKC-опосредованные сокращения, а также индуцированный давлением миогенный тонус и устранили разницу в PKC-опосредованных миогенных сокращениях между небеременными и беременными маточными артериями. 75 , 76 Поскольку миогенный тонус играет важную роль в регуляции сосудистого сопротивления и кровотока в различных органах, пониженный миогенный тонус маточной артерии, вероятно, будет в значительной степени способствовать адаптации сосудистой гемодинамики матки в беременность.

Влияние окситоцина и анестезии на сосудистый тонус у беременных женщин: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование с использованием неинвазивного анализа пульсовой волны | BMC: беременность и роды

Основной целью исследования было выяснить, влияет ли окситоцин как на крупные, так и на мелкие артерии, а также на функцию выброса ЛЖ сердца, с использованием метода DPA.На основании наших собственных наблюдений [4] и наблюдений Weis et al. [10], мы предположили, что окситоцин снижает тонус артериальных сосудов и увеличивает сердечный выброс (СО). Региональный комитет по этике исследований в Лунде одобрил исследование (dnr 2012/649), и все включенные в него женщины дали свое информированное устное и письменное согласие. Исследование проводилось в соответствии с Этическим кодексом Хельсинкской декларации. Женщины были последовательно набраны в отделении акушерства и гинекологии университетской больницы Сконе в Мальмё весной 2013 года в рамках магистерских проектов У.H. и S. S. Всех женщин, которым было запланировано прерывание беременности в первом триместре с помощью вакуум-аспирации или выскабливания и которые соответствовали критериям включения, было предложено принять участие. Критерии включения: здоровые женщины с I-II классами физического состояния Американского общества анестезиологов, гестационный возраст менее 12 недель, возраст старше 18 лет и понимание устного и письменного шведского языка. Всего к участию было предложено 54 женщины, из которых 3 отказались, и набор остановился после включения 51 пациентки.Размер выборки, основанный на расчете мощности, не может быть выполнен, потому что по сравнению с плацебо влияние окситоцина на переменные DPA было неизвестно.

Женщины были рандомизированы P.O. использование сетевого генератора случайных чисел [11] для первого лечения окситоцином внутривенно (IV) или плацебо. Перед началом анестезии медсестра-анестезиолог открыла запечатанный непрозрачный конверт, в котором находился курс лечения. Природа инъекции была скрыта от женщины, исследователей и хирурга.Женщинам, которым вводили окситоцин в качестве первой инъекции, вводили плацебо в качестве второй инъекции (последовательность окситоцин-плацебо, группа OP) и наоборот (последовательность плацебо-окситоцин, группа PO) (рис. 1). Инъекция окситоцина включала 1 мл окситоцина пилума 8,3 мкг / мл (5 ЕД) (Orifarm Generics, Стокгольм, Швеция), а инъекция плацебо содержала 1 мл NaCl 9 мг / мл.

Рис. 1

Блок-схема, показывающая этапы эксперимента. Первые препараты вводили между точками измерения T1 и T2, а вторые — между точками T2 и T3

Физиологические предпосылки метода DPA были описаны ранее [6, 8].Meridian DPA ™ сообщает о 17 различных переменных, но для этого исследования мы выбрали те переменные с наилучшей воспроизводимостью и наилучшей корреляцией с золотым стандартом аппланационной тонометрии: высота пульса (PH), индекс старения (AI), время выброса сердечного левого желудочка (LVET) с компенсацией. (ETc), индекс эластичности сердечного выброса (EEI), дикротический индекс (DI) и отношения b / a и d / a [5]. Переменные описаны в таблице 1.

Таблица 1 Описание переменных цифрового анализа пульсовой волны, использованных в исследовании, отредактировано von Wowern et al.[5]

Последовательность мониторинга и лечения показаны на рис. 2. За три часа до запланированной операции женщинам предварительно вводили две интравагинальные таблетки мизопростола 0,2 мг (Cytotec®, Pfizer AB, Соллентуна, Швеция) и две пероральные таблетки парацетамола по 500 мг (Alvedon®, GlaxoSmithKline Consumer Healthcare, Bröndby, Дания). По прибытии в операционную был введен периферический катетер IV. ЭКГ с 5 отведениями, манжета для измерения артериального давления (АД) и датчик периферической сатурации кислорода (SaO 2 ) были подключены к монитору наблюдения (DASH 4000, GE Medical Systems Information Technologies, Дандерид, Швеция).Индекс ST на ЭКГ был автоматически получен из II отведения ЭКГ. Показания BP, SaO 2 и индекса ST были вручную записаны в форме отчета о болезни.

Рис. 2

Протокол исследования с временными последовательностями мониторинга, анестезии и внутривенных инъекций лекарств

Для измерений DPA настраиваемый датчик пульсовой оксиметрии был помещен на правый второй или третий палец, а затем подключен к Meridian DPA ™ (Meridian Co. Ltd., Корея, и Salcor AB, Упсала, Швеция).Meridian DPA был подключен к портативному компьютеру (HP 625, Hewlett Packard, Сольна, Швеция). Каждое измерение DPA занимает 70 с, в течение которых операция была остановлена.

Поскольку операция проводилась с женщиной в положении литотомии и измерения DPA чувствительны к положению тела, женщину поместили в это положение на операционном столе еще до начала анестезии. После 5 мин отдыха в этом положении были выполнены базовые измерения (момент времени T0) (рис.2). Затем женщина была предварительно насыщена кислородом 100% кислородом через дыхательную маску. Общая анестезия начиналась с инъекции 100 мкг фентанила (Fentanyl® B. Braun 50 мкг / мл) с последующей болюсной дозой пропофола (Propofol®-Lipuro B. Braun 10 мг / мл), индивидуально титруемой до потери сознания и веко-рефлекс, после которого анестезия поддерживалась только пропофолом. Во время анестезии женщин держали на дыхательных путях маски.

В каждый момент времени измерения начинались с записи DPA (продолжительностью 70 с), параллельно считыванию индекса ST ЭКГ, за которым следовало измерение АД.Вторые измерения были выполнены после индукции анестезии, но до начала операции (момент времени T1, см. Рис. 2). Первая инъекция препарата была сделана после завершения раскрытия шейки матки и начала опорожнения матки. Время инъекции составляло одну минуту. Был запущен секундомер, и запись DPA точки Т2 началась через 60 с после окончания закачки.

Вторая инъекция лекарства была сделана в конце операции, но до окончания анестезии, и измерения точки Т3 были выполнены так же, как и измерения Т2 (рис.2).

Поскольку период полувыведения окситоцина из плазмы составляет 3–20 минут [12], сравнение окситоцина с плацебо не могло быть выполнено в группе OP после второй инъекции из-за слишком короткого времени вымывания окситоцина. после первой инъекции. Таким образом, эффект окситоцина по сравнению с плацебо изучался поперечно в группе OP на T1-T2 и продольно в группе PO для T1-T2 по сравнению с T2-T3 (рис. 1). Для каждой исследуемой переменной рассчитывалась разница от до и до после введения, обозначаемая значением Δ.Положительное значение Δ означает увеличение, а отрицательное значение — уменьшение.

Данные DPA были автоматически экспортированы в файл Excel на портативном компьютере, а затем преобразованы в документ статистического программного обеспечения (StatView версии 5.0.1, Институт SAS, Кэри, Северная Каролина, США). Производитель Meridian рекомендует записывать не менее 80% пульсовых волн для обеспечения хорошего качества математического анализа контура пульсовой волны, поэтому записи с распознаванием <80% были исключены из статистического анализа.

U-критерий Манна-Уитни использовался для сравнения непрерывных переменных между группами. Для продольных сравнений внутри групп использовался критерий согласованных пар со знаковыми рангами Уилкоксона. Категориальные данные сравнивали с критерием Хи-2 или точным вероятностным тестом Фишера. Точный тест Фишера в таблицах 2 × 3 был выполнен с помощью программного обеспечения, доступного в Интернете [13]. Двусторонние значения P <0,05 считались статистически значимыми.

Некоторые из переменных DPA зависят от частоты сердечных сокращений (ЧСС) [5], и статистический анализ, соответственно, проводился как с приблизительными, так и с скорректированными по ЧСС значениями DPA.Если простой линейный регрессионный анализ показал статистически значимую корреляцию ( P <0,05) между HR и переменными DPA в момент T0, и вмешательство (анестезия, введение окситоцина или плацебо) также привело к значительному изменению HR, переменные DPA в вопрос был скорректирован до ЧСС 75 ударов в минуту, обозначенной DPA @ 75, с уравнением DPA @ 75 = DPA ± C (75-HR). C обозначает постоянную крутизны. Переменная ETc DPA и индекс ST переменной ЭКГ автоматически корректируются с учетом ЧСС при сообщении соответствующего устройства.

Причина для беспокойства, когда паттерны ненормальные

Основные выводы:

  • Сокращения матки могут сдавливать кровеносные сосуды в матке, потенциально препятствуя передаче кислорода плаценте и ребенку.
  • При нормальных родах идеальным является одно сокращение каждые две-три минуты или менее пяти сокращений за 10-минутный период.
  • Матка должна отдыхать между схватками, иметь достаточный маточный тонус покоя (мягкий на ощупь) и время покоя матки (около одной минуты).

Плод полагается на адекватное кровообращение в матке и пуповине, чтобы обеспечить достаточное количество кислорода для поддержания благополучия плода во время родов. Состояние плода оценивают во время родов, отслеживая частоту сердечных сокращений плода.

Имеются характерные образцы частоты сердечных сокращений плода, отраженные на графике, что указывает на хорошую оксигенацию. Плод подвержен риску нарушения доставки кислорода при аномальном характере сокращения матки.

Почему характер сокращения матки важен

Аномальный паттерн сокращения матки, сопровождающийся неутешительным паттерном сердечного ритма плода, вызывает беспокойство. Медсестры, акушерки и врачи должны принять меры, чтобы избежать этого.

В медицинской литературе есть много статей об интерпретации паттернов частоты сердечных сокращений плода при оценке благополучия плода, но большая часть литературы не рассматривает или адекватно не рассматривает паттерн сокращения матки как критически важную переменную при оценке состояния плода. -существование.

Существует ряд характеристик характера сокращения матки, которые могут способствовать стрессу у плода во время родов, тем самым повышая риск причинения вреда ребенку. Сокращения матки могут сдавливать кровеносные сосуды матки, потенциально препятствуя передаче кислорода плаценте и ребенку.

Сокращения также могут сдавливать пуповину, что может повлиять на приток насыщенной кислородом крови к ребенку. Оба события происходят в большинстве родов без последствий для ребенка.Но если эти события происходят слишком часто или слишком серьезно, возрастает риск травмы.

Последствия недостаточного кровотока, насыщенного кислородом

Существует ряд характеристик, свидетельствующих о чрезмерной активности матки, которых следует избегать, чтобы предотвратить повреждение плода. Чрезмерная активность матки может привести к нарушению оксигенации плода. Хотя плод обладает замечательной способностью переносить периоды нарушения оксигенации, эта толерантность имеет пределы.

В конце концов, если чрезмерная активность матки сохраняется, у плода может развиться состояние, называемое метаболическим ацидозом, и, если оно достаточно серьезное, может произойти травма головного мозга и даже смерть. Существует ряд моделей сокращений, которые могут способствовать риску травмы или смерти плода.

Как часто у вас должны быть схватки?

Частота сокращений — важный вопрос. Частота сокращений матки должна быть достаточной для расширения шейки матки и содействия опусканию плода по родовым путям.

Вообще говоря, желаемая частота сокращений матки при нормальных родах — это одно сокращение каждые две-три минуты или менее пяти сокращений за 10-минутный период.

Если схватки происходят чаще, существует риск того, что плод не перенесет дополнительный стресс, если такая картина сохраняется. Чрезмерно частые сокращения матки называют «тахисистолией».

Что такое окситоцин и почему он используется при родах?

При некоторых родах используются лекарственные препараты для улучшения активности матки.Препарат называется «окситоцин» или «синтоцинон». Действие этого препарата, вводимого матери, заключается в увеличении частоты, продолжительности и интенсивности сокращений матки для ускорения родов.

Одним из рисков, связанных с окситоцином, является возможность чрезмерной активности матки. При использовании окситоцина в случае слишком частых сокращений (чаще, чем одно сокращение каждые две минуты) окситоцин необходимо либо уменьшить, либо прекратить.

Необходимо наблюдать за патологическим характером сокращений матки, чтобы увидеть, исчезнет ли она.Если прекращение приема окситоцина не решает проблему, на этом этапе могут потребоваться родоразрешения, особенно если частота сердечных сокращений плода неутешительна.

Почему важна продолжительность схваток

Продолжительность схваток — еще одна важная характеристика. При обычных родах желаемая продолжительность схваток составляет от 45 до 60 секунд. Сокращения, которые продолжаются более 60 секунд, если они продолжаются, могут указывать на то, что матка сокращается в течение чрезмерных периодов времени, что способствует стрессу плода.

Сокращение, продолжающееся более 90 секунд, называется «тетаническим» сокращением. Опять же, слишком продолжительные схватки являются ненормальными и приводят к дополнительному стрессу для плода, и их следует избегать.

Убедитесь, что матка находится в состоянии покоя

Для благополучия плода важно, чтобы матка отдыхала между схватками. Этот отдых состоит из двух важных компонентов: тонуса покоя матки и времени покоя матки. Во время сокращений матка, которая представляет собой мышцу, напрягается, чтобы обеспечить силу, необходимую для продвижения родов.

Что такое тонус покоя матки?

Матка напряжена во время схваток или имеет повышенный «тонус». Отдых между схватками требует, чтобы матка была «мягкой» при прикосновении или пальпации и имела пониженный тонус. Если матка не мягкая, то тонус повышен. Мышца может быть недостаточно расслаблена для улучшения кровообращения.

Это может привести к снижению кровотока между схватками, что является проблемой оксигенации плода.Медсестре важно прикасаться к животу матери между схватками, чтобы матка была мягкой.

Если между схватками наблюдается стойкое усиление тонуса, необходимо определить причину этой проблемы и разработать план решения проблемы, которая может включать снижение окситоцина или ускоренные роды.

Как долго длится отдых матки?

Между схватками должно быть достаточно времени, чтобы плод «оправился» от стресса, вызванного предыдущими схватками.В идеале время отдыха между схватками должно составлять одну минуту. Короткое время отдыха может способствовать ненужному стрессу у плода.

Другие модели сокращения

Схватки, которые происходят в быстрой последовательности, также могут быть проблематичными. Когда два сокращения происходят очень быстро с небольшим перерывом между ними, это называется «сцеплением». Три сокращения в быстрой последовательности называются «утроением». Эти паттерны ненормальны, и их следует избегать.

Аномальная активность матки всегда должна рассматриваться как вызывающая беспокойство, независимо от того, наблюдаются ли паттерны с неутешительными паттернами сердечного ритма плода или без них.Если чрезмерная активность матки возникает при неутешительном ритме сердечного ритма плода, это вызывает гораздо большее беспокойство и требует лечения.

Врачи и медсестры должны быть внимательны к возможности развития метаболического ацидоза плода, когда эти состояния встречаются вместе, и от них требуется принять меры.

Свяжитесь с доверенным адвокатом по травмам, связанным с родом, сегодня

Общей чертой во многих делах, которые юристы BILA рассматривают в отношении семей детей, рожденных с церебральным параличом или другими родовыми травмами, является наличие аномальной активности матки, часто связанной с необдуманным использованием окситоцина.

Во многих из этих случаев травмы новорожденного можно было бы полностью избежать, если бы правильно распознать эти закономерности и получить соответствующую клиническую реакцию. Свяжитесь с одним из наших доверенных юристов сегодня.

Атония матки: симптомы, диагностика и лечение

Атония матки, также называемая атонией матки, является осложнением беременности, которое возникает после родов. Это нарушение сокращения матки после родов.

Это может привести к очень серьезному — даже опасному для жизни — состоянию, известному как послеродовое кровотечение (кровотечение), если не лечить немедленно.Атония матки считается наиболее частой причиной послеродового кровотечения.

В этой статье обсуждаются причины, симптомы, диагностика и лечение атонии матки.

Джастин Пэджет / Getty Images

Насколько распространена атония матки?

Атония матки встречается примерно у одного из 40 рождений в Соединенных Штатах. С этим заболеванием связано не менее 80% случаев послеродовых кровотечений.

Причины

Известно несколько факторов, препятствующих сокращению мышц матки после родов, к общим факторам относятся:

  • Чрезмерное растяжение (чрезмерное растяжение) или чрезмерное увеличение матки по разным причинам, включая многоплодную беременность (рождение более одного ребенка за раз) и многоводие (большое количество околоплодных вод)
  • Продолжительные роды
  • Быстрые роды
  • Использование окситоцина (гормона, вызывающего схватки)
  • Использование общей анестезии или других препаратов во время родов

Есть несколько факторов, связанных с повышенным риском атонии матки, в том числе:

( например, препараты, применяемые для обезболивания во время родов)
  • Возраст старше 35 лет
  • Ожирение
  • Роды с использованием щипцов или вакуумной помощи
  • Важно отметить, что атония матки может возникнуть даже у тех, у кого отсутствуют какие-либо факторы риска.

    Симптомы

    Первичный симптом атонии матки — расслабленная матка, которая не показывает признаков стеснения или напряжения после рождения. При пальпации (нащупывании вручную) после родов медицинским работником матка может казаться влажной (губчатой) или увеличенной.

    Симптомы послеродового кровотечения, вызванного атонией матки, включают:

    • Неконтролируемое кровотечение
    • Низкое артериальное давление
    • Увеличение частоты сердечных сокращений (пульса)
    • Боль в спине
    • Другая боль

    Осложнения (кровотечение)

    Осложнения атонии матки могут включать:

    • Ортостатическая / постуральная гипотензия : головокружение от низкого кровяного давления, которое обычно возникает, когда человек встает после того, как сядет или лежит
    • Анемия : низкое количество эритроцитов
    • Гиповолемический шок : серьезное, потенциально опасное для жизни осложнение атонии матки, включающее низкий объем крови из-за потери крови или других жидкостей

    Геморрагический шок — это гиповолемический шок от кровопотери.Симптомы гиповолемического шока и геморрагического шока включают:

    • Обильное кровотечение
    • Бледная прохладная кожа
    • Диафорез (обильное потоотделение)
    • Тахикардия (учащенное сердцебиение / учащенный пульс)
    • Учащенное дыхание
    • Летаргия (крайняя усталость, спутанность сознания и, возможно, потеря сознания)

    Диагностика

    Когда появляются признаки обильного кровотечения, а матка кажется разбухшей, мягкой и расслабленной, после родов часто ставится диагноз атонии матки.

    Кровопотерю можно рассчитать путем оценки количества пропитанных гигиенических прокладок или путем взвешивания прокладок или губок, используемых для впитывания крови.

    Другие источники кровотечения (например, разрыв шейки матки или влагалища) будут исключены.

    Признаки и симптомы будут тщательно контролироваться для выявления осложнений, таких как анемия или гиповолемический шок. Они могут включать тщательное наблюдение за артериальным давлением, пульсом, количеством эритроцитов и т. Д.

    Лечение

    С атонией матки обычно можно справиться с помощью ручного массажа матки, а также с помощью лекарств, способствующих сокращению матки (так называемых утеротоников).

    Эти препараты способствуют усилению сокращений матки и контролю кровотечения, к ним относятся:

    • Окситоцин
    • Метергин
    • Простагландины (например, Гемабат)
    • Алкалоиды спорыньи
    • Мизопростол

    В случаях атонии матки с осложнениями может потребоваться другое лечение, чтобы восполнить потерю жидкости и крови, например:

    • Внутривенные (IV) жидкости
    • Переливания крови
    • Продукты крови

    Лечение очень тяжелой атонии матки с осложнениями может включать:

    • Операция: Для перевязки кровеносных сосудов
    • Эмболизация маточной артерии: Блокирование кровотока в матке
    • Гистерэктомия: Хирургическое удаление матки, когда все остальные меры не помогли

    Часто задаваемые вопросы

    Как атония матки вызывает послеродовое кровотечение?

    Послеродовое кровотечение тесно связано с атонией матки.Это связано с тем, что сокращения матки способствуют процессу свертывания крови и помогают матке остановить кровотечение после родов (особенно после выхода плаценты).

    Насколько распространена атония матки?

    Довольно часто, поскольку атония матки возникает примерно у одного из 40 рождений (2,5%) в США. Однако это состояние очень серьезное, потому что на него приходится не менее 80% случаев послеродовых кровотечений.

    Как лечится атония матки?

    Атония матки лечится по-разному в зависимости от тяжести состояния и имеющихся осложнений.В первую очередь, лечение направлено на стимулирование сокращений матки и остановку кровотечения.

    Массаж матки после родов, а также введение окситоцина сегодня являются обычной профилактической практикой.

    границ | Дефицит релаксина приводит к дисфункции маточной артерии во время беременности у мышей

    Введение

    Нормальный рост и развитие плода зависит от адекватной доставки кислорода и питательных веществ к плаценте в сочетании с резким увеличением сердечного выброса матери, объема плазмы и кровотока в матке матери (Osol and Mandala, 2009; Conrad and Davison, 2014) .Многие из этих материнских сердечно-сосудистых адаптаций находятся под влиянием циркулирующих стероидных гормонов и факторов роста (Chang and Lubo, 2008; Hu et al., 2011; Corcoran et al., 2014). Несмотря на увеличение кровотока в матке, общее перфузионное давление матки во время беременности остается относительно постоянным из-за снижения сосудистого сопротивления. Структурные и функциональные адаптации маточных артерий во время беременности опосредуют снижение сосудистого сопротивления в этом сосудистом русле (Veerareddy et al., 2002; Осол и Мандала, 2009; Мандала и Осол, 2012). Неспособность сосудистой сети матки должным образом адаптироваться к беременности ставит под угрозу перфузию плаценты, при этом хроническое снижение маточного кровотока связано с задержкой роста плода и смертью (Lang et al., 2003).

    Сужение сосудов в ответ на повышение внутрипросветного давления, миогенный тонус, является фундаментальным свойством, регулирующим кровоток во многих артериях (Veerareddy et al., 2002; Davis, 2012). На поздних сроках беременности миогенный тонус значительно снижается в маточных, брыжеечных и почечных артериях (Sherwood et al., 1980; Мейер и др., 1993; Новак и др., 2002; Veerareddy et al., 2002; Кук и Дэвидж, 2003; Xiao et al., 2010). Снижение миогенного тонуса маточных артерий вместе с дополнительными функциональными адаптациями, включая усиление эндотелий-зависимой вазодилатации и рефрактерности гладких мышц к вазоконстрикторным стимулам (Ni et al., 1997; Veerareddy et al., 2002; Cooke and Davidge, 2003; Chang и Lubo, 2008; Withers et al., 2009; Hu et al., 2011), все они способствуют усилению перфузии маточно-плацентарной единицы.Неполная функциональная и структурная адаптация сосудистой сети матки во время беременности приводит к серьезным осложнениям беременности, включая задержку роста плода, гипертонию при беременности и преэклампсию (Osol and Mandala, 2009).

    Пептидный гормон релаксин играет важную роль в опосредовании некоторых материнских почечных и системных гемодинамических адаптаций во время беременности (Conrad and Davison, 2014). Наибольшие циркулирующие концентрации релаксина наблюдаются во время беременности с разными уровнями у разных видов.Пик уровня релаксина приходится на последнюю половину беременности у грызунов (Sherwood et al., 1980), но в конце первого триместра у людей (Stewart et al., 1990). С повышением уровня релаксина у беременных связано снижение сопротивления маточных и почечных артерий (Smith et al., 2006). Важно отметить, что у женщин с недостаточностью яичников, которые зачат с донорскими яйцеклетками, оплодотворением in vitro, или переносом эмбриона (без поддающегося измерению циркулирующего релаксина), системная вазодилатация во время беременности не проводится, и они подвергаются повышенному риску развития неблагоприятных исходов беременности (Конрад и Дэвисон, 2014).

    В нескольких исследованиях изучалось влияние эндогенного релаксина на сосудистую сеть матки во время беременности. Рецепторы релаксина (RXFP1) обнаруживаются в почечных артериях мышей и крыс, аорте (Novak et al., 2006; Ferreira et al., 2009; Jelinic et al., 2014) и маточных артериях (Vodstrcil et al., 2012) беременных. мыши и крысы. Введение моноклональных антител (MCA1) для нейтрализации циркулирующего релаксина у беременных крыс ослабляло почечную и системную вазодилатацию (Novak et al., 2001) и увеличивало пассивную периферическую жесткость стенки маточной артерии (Vodstrcil et al., 2012). Это было первое доказательство того, что дефицит релаксина может влиять на функцию сосудов во время беременности. Более поздние исследования на мышах с дефицитом релаксина ( Rln — / — ) продемонстрировали нарушение реактивности брыжеечной артерии (Marshall et al., 2016, 2017a) и нарушение ремоделирования маточной артерии (Gooi et al., 2013), связанное с более жесткими маточными артериями. и снижение веса плода. В этом исследовании мы проверили гипотезу о том, что дефицит релаксина во время беременности нарушает нормальную адаптацию функции маточной артерии, тем самым влияя на рост плода.Цели этого исследования состояли в том, чтобы выяснить, есть ли дефицит релаксина: (i) повышенный миогенный тонус маточной артерии во время беременности и (ii) нарушение эндотелий-зависимой вазодилатации, вызванной агонистами. Мультигенный количественный ПЦР-массив также использовался для исследования сигнальных молекул, лежащих в основе измененных механизмов функции маточной артерии.

    Материалы и методы

    Животные

    Все эксперименты на животных были одобрены Комитетом по этике экспериментов на животных Мельбурнского университета (AECC 1212387) и проводились в соответствии с Кодексом практики Австралии и руководящими принципами Национального совета по здравоохранению и медицинским исследованиям.В этом исследовании использовались мыши Rln — / — , скрещенные на фоне C57BL / 6J с поколением F 14 и однопометниками дикого типа ( Rln + / + ) той же линии (Zhao et al. ., 1999). Мышей содержали в помещении животноводческого комплекса Мельбурнского университета, расположенном в Школе биологических наук, при цикле 12 часов свет: 12 часов темноты при 20 ° C, с доступом к стандартным кормовым гранулам (Barastock, Pakenham, Vic, Australia) и воде. ad libitum . Генотипы мышей подтверждали анализом ушных зажимов с помощью ОТ-ПЦР, как описано ранее (Zhao et al., 1999). Соответствующего возраста (3–5 месяцев) Rln + / + и Rln — / — мышей изучали в двух когортах, небеременных (течка) и поздних беременных (17,5 день беременности).

    Сбор образцов и изоляция маточной артерии

    В день эксперимента мышей взвешивали, анестезировали 2% изофлуораном и подвергали эвтаназии путем смещения шейных позвонков. Маточные артерии выделяли в ледяной физиологический раствор Кребса с HEPES (PSS-HEPES), содержащий (мМ): NaCl 112, NaHCO 3 25, KCl 4.7, MgSO 4 1,2, KH 2 PO 4 0,7, HEPES 10, D -глюкоза 11,6 и CaCl 2 2,5 (pH 7,4). Основные маточные артерии тщательно очищали от рыхлой соединительной и жировой ткани. Правую маточную артерию использовали для миографии давления, а левую — для проволочной миографии. Остальные сегменты артерий мгновенно замораживали в жидком азоте и хранили при -80 ° C для последующего анализа.

    Давление миография

    Сегменты маточной артерии без утечек канюлировали на стеклянных микропипетках миографа давления (Living Systems Instrumentation, Burlington, VT, USA) и измеряли внешний диаметр с помощью видеомикроскопии (Diamtrak software, Adelaide, SA, Australia).Эксперименты проводились при отсутствии внутрипросветного кровотока при непрерывной суперфузии (4 мл / мин) с PSS-HEPES при 37 ° C. В начале каждого эксперимента артерии акклиматизировались в течение 40 мин при 50 мм рт. Ст. Затем проверяли жизнеспособность гладких мышц и эндотелиальных клеток, как описано ранее (Tare et al., 2011). Развитие миогенного тонуса оценивали в диапазоне внутрипросветного давления 10–120 мм рт. Ст. (10, 30, 50, 60, 80, 100, 120 мм рт. Ст.) С приращениями давления каждые 10 мин. Это повторяли через 30 минут предварительной инкубации с N ω -нитро- L -аргининовым метиловым эфиром (L-NAME; 200 мкмоль / л) и L-NAME и индометацином (Indo; 1 мкмоль / л) для получения исследовать вклад оксида азота (NO) и простаноидов, соответственно, в модуляцию миогенного тонуса.Чтобы определить пассивные диаметры артерий при каждом давлении, в конце каждого эксперимента протокол повышения давления повторяли в кальций (Ca 2+ ) -содержащем PSS-HEPES и 2 мМ EGTA (через 30 мин. предварительная инкубация в буфере).

    Проволочная миография

    Агонист-индуцированная сосудистая реактивность оценивалась, как описано ранее (Leo et al., 2014a, b). Вкратце, основные маточные артерии длиной ~ 2 мм устанавливали на четырехканальном проводном миографе (Danish Myo Technology, Орхус, Дания).Чтобы исследовать сокращение, опосредованное альфа-адренорецепторами, артерии подвергали кумулятивному воздействию возрастающих концентраций агониста α 1 -адренорецепторов, фенилэфрина (PE, 1–0,1 ммоль / л). Сокращения выражали в процентах от сокращения, вызванного 100 мМ физиологического раствора с высоким содержанием калия (KPSS, изотоническая замена Na + на K + ). Чтобы оценить эндотелий-зависимую и независимую вазодилататорную функцию, маточные артерии предварительно сокращали до аналогичного уровня (60–70% от максимального сокращения KPSS) с использованием PE (0.1–3 мкмоль / л) и кривые концентрация-ответ для эндотелий-зависимых агонистов ацетилхолина (ACh, от 0,1 нмоль / л до 10 мкмоль / л) или брадикинина (BK, от 0,1 нмоль / л до 1 мкмоль / л), и эндотелий-независимые агонисты нитропруссид натрия (SNP, от 0,1 нмоль / л до 10 мкмоль / л) и илопрост (от 0,1 нмоль / л до 1 мкмоль / л) (Marshall et al., 2016). Расслабление выражали в процентах от уровня предварительного сужения. Ответы на ACh и BK также исследовали через 30 мин инкубации с различными комбинациями фармакологических блокаторов, включая L-NAME и Indo.Остаточное расслабление после блокады синтазы оксида азота (NOS) и циклооксигеназы (COX) объясняется гиперполяризацией эндотелия (EDH). Вклад активированных кальцием калиевых каналов с промежуточной и малой проводимостью в EDH-опосредованную релаксацию оценивали путем предварительной инкубации с TRAM-34 (5 мкмоль / л) и апамином (0,1 мкмоль / л), соответственно, в присутствии L -ИМЯ + Индо.

    Массив количественной ПЦР

    Замороженные маточные артерии беременных Rln + / + ( n = 5) и Rln — / — ( n = 5) мышей помещали в предварительно охлажденные Wig-L-Bug . ® и измельчили в амальгаматоре Digital Wig-L-Bug ® (Dentsply-Rinn, Элгин, Иллинойс, США).Измельченные ткани ресуспендировали в 1 мл TriReagent (Ambion Inc., Scoresbury, VIC, Australia) и затем экстрагировали общую РНК, как описано ранее, с дополнительной заключительной промывкой в ​​70% этаноле (Vodstrcil et al., 2012; Leo et al., 2014b). Осадки РНК ресуспендировали в 12 мкл RNA Secure ™ (Ambion). Количество РНК анализировали с использованием спектрофотометра NanoDrop ® ND100 (Thermo Fischer Scientific Australia Pty Ltd, Скорсби, Виктория, Австралия) с отношениями A 260 : A 280 > 1.8, что свидетельствует о достаточном качестве для анализа количественной ПЦР. В среднем накопленная маточная артерия 4 беременных мышей (после функциональных исследований) дала ~ 0,7 мкг РНК для создания 1 точки данных, оставляя недостаточно РНК для проверки целостности с помощью гель-электрофореза. Синтез первой цепи кДНК выполняли с использованием набора RT 2 First Strand Kit (QIAGEN, Chadstone, VIC, Australia) в соответствии с инструкциями набора, используя 0,5 мкг общей РНК на реакцию. QPCR выполняли с использованием RT 2 Profiler TM PCR Hypertension Array для мышей, анализирующих 84 гена (QIAGEN; Cat.No. PARN-037Z) в соответствии с инструкциями по набору для установки для ПЦР AB Applied Biosystems ViiA7 (Life Technologies, Mulgrave, VIC, Australia) в быстрых реакциях объемом 20 мкл. β-актин ( Actb ), β-глюкуронидаза ( Gusb ) и белок теплового шока 90-α-B1 ( Hsp90ab1 ) были эталонными генами, выбранными производителем. Для каждого гена среднее значение Ct для эталонных генов вычитали из среднего значения Ct интересующего гена для нормализации представляющего интерес гена относительно эталонных генов.Кратность разницы и статистические различия в экспрессии между Rln + / + и Rln — / — мышей для каждого гена были рассчитаны с использованием центра анализа данных QIAGEN GeneGlobe с использованием метода 2 −Δ Ct . анализа.

    Кривая частотного распределения плода и масса плаценты

    С помощью лапаротомии собрали

    плодов, промокнули и измерили влажный вес (количество плодов, Rln + / + = 161 из 21 л и Rln — / — = 150 из 17 л).Гистограммы были построены с измерениями и рассчитан 5-й процентиль веса, как описано ранее (Dilworth et al., 2011). После отделения плаценты плодные оболочки удаляли, и плаценты сушили на тканях перед взвешиванием (количество плаценты, Rln + / + = 36 из 7 л и Rln — / — = 40 из 8 л. ).

    Химические вещества

    Все препараты были приобретены у Sigma-Aldrich. Лекарства растворяли в дистиллированной воде, за исключением индометацина (0.1 моль / л карбоната натрия) и TRAM-34 (диметилсульфоксид) с последующими разбавлениями в дистиллированной воде.

    Расчеты и статистический анализ

    Все результаты выражены как среднее ± SEM; «N» представляет количество животных в группе, за исключением анализа генов, где каждое «n» представляет объединенные основные маточные артерии от n = 3-5 животных. Миогенный тонус рассчитывали как ((D 1 — D 2 ) / D 1 ) × 100, где D 1 — внешний диаметр в PSS без Ca 2+ , а D 2 — это наружный диаметр в присутствии внеклеточного Ca 2+ .Относительный вклад NO и простаноидов вазодилататора в регуляцию миогенного тонуса определяли путем анализа площади под кривой (AUC). Вкратце, роль простаноидного компонента вазодилататора рассчитывалась путем вычитания AUC в присутствии L-NAME + Indo из значения, полученного только для L-NAME. Точно так же компонент ответа, опосредованный NO, определяли путем вычитания AUC в L-NAME из AUC, полученного в отсутствие ингибиторов.

    Для экспериментов с проволочной миографией сигмовидные кривые были подогнаны к данным реакции на концентрацию, индуцированной агонистами, с использованием метода наименьших квадратов (Prism version 6.0, GraphPad Software, Сан-Диего, Калифорния, США) для расчета чувствительности каждого агониста (pEC 50 ). Максимальное расслабление (R max ) для ACh, BK, SNP и илопроста измерялось как процент предварительного сжатия до PE. Относительный вклад NO, простаноидов, расширяющих сосуды, и EDH в релаксацию, вызванную ACh или BK, определяли путем анализа AUC кривых ответа ACh или BK, как описано ранее (Marshall et al., 2017b). Вклад калиевого канала с промежуточной проводимостью Ca 2+ (IK Ca ) в EDH-опосредованную релаксацию определяли путем вычитания AUC в L-NAME + Indo + TRAM-34 из значения, полученного с L-NAME + Indo. .Точно так же вклад калиевого канала с низкой проводимостью Ca 2+ (SK Ca ) в EDH-опосредованную релаксацию определяли путем вычитания AUC в L-NAME + Indo + TRAM-34 + апамин из L-NAME +. Индо + ТРАМВАЙ-34. Групповые значения pEC , 50 , R max и AUC сравнивали с использованием однофакторного дисперсионного анализа с апостериорным анализом Бонферрони или независимыми тестами Стьюдента t . Кривые «концентрация-ответ» также анализировали с помощью двухфакторного дисперсионного анализа с использованием апостериорного анализа Bonferroni (обработка vs.концентрация). P <0,05 считалось статистически значимым. Оценка средних предельных значений веса плода и плаценты с поправкой на самку и размер помета была проанализирована с использованием SPSS (версия 25.0, SPSS, Чикаго, Иллинойс, США).

    Результаты

    Влияние дефицита релаксина на развитие миогенного тонуса

    Дефицит релаксина не влияет на развитие миогенного тонуса в маточных артериях небеременных мышей

    Маточные артерии небеременных мышей Rln + / + и Rln — / — развили миогенный тонус с внутрипросветным повышением давления в присутствии Ca 2+ (рисунок 1A).Величина развития миогенного тонуса существенно не различалась между маточными артериями небеременных Rln + / + и Rln — / — животных (Фигуры 1A, B). Вазодилататоры эндотелия могут модулировать развитие миогенного тонуса. Здесь мы исследовали вклад NO и простаноидов, расширяющих сосуды, в этой роли. После ингибирования активности NOS с помощью L-NAME развитие миогенного тонуса в маточных артериях значительно увеличилось с Rln + / + ( P = 0.02) и Rln — / — ( P = 0,02) мышей (Фигуры 1C, D). Последующее ингибирование синтеза простаноидов вазодилататора с помощью Indo в присутствии L-NAME не имело дальнейшего значительного эффекта (Фигуры 1C, D). Анализ AUC показал, что общая величина повышения тонуса в присутствии ингибирования NOS и COX не различалась у мышей Rln + / + и Rln — / — (фигура 1E). У небеременных мышей сосудорасширяющие простаноиды играют незначительную роль в модуляции миогенного тонуса маточной артерии.В отсутствие Ca 2+ не было обнаружено различий между пассивным наружным диаметром маточных артерий Rln + / + и Rln — / — мышей. При беременности произошло значительное увеличение пассивного наружного диаметра маточной артерии ( P, <0,0001; Рисунок 1F) без различий между генотипами.

    Рисунок 1 . Развитие миогенного тонуса в основной маточной артерии у небеременных мышей Rln + / + (закрашено черным цветом) и Rln — / — мышей (закрашено белым) ( n = 5 на группу). (A) Развитие миогенного тонуса с увеличением давления (мм рт. Ст.) И (B) площадь под кривой (AUC). Миогенный тонус основной маточной артерии у небеременных (C) Rln + / + и (D) Rln — / — мышей после предварительной обработки артерий без (квадрат; контроль ) или с ингибитором NOS (треугольник) L-NAME или (ромб) L-NAME и ингибитором COX Indo (L-NAME + Indo). (E) AUC анализ относительного вклада NO и вазодилататорных простаноидов (PG) в развитие миогенного тонуса в маточных артериях небеременных мышей Rln + / + и Rln — / — мышей. (F) Пассивные наружные диаметры основных маточных артерий после внутрипросветного повышения давления (10–120 мм рт. поздняя беременность (d17,5; квадраты) ( n = 6–8 на группу). * P <0,05 двухфакторный контроль ANOVA по сравнению с L-NAME (C, D) или небеременная по сравнению с беременной (F) ; # P <0,05 односторонний контроль ANOVA по сравнению с PG; * P <0.05 односторонний ANOVA NO против PG (E) .

    Развитие миогенного тонуса в маточных артериях у беременных мышей с дефицитом релаксина

    На поздних сроках беременности развитие миогенного тонуса все еще происходило в маточных артериях беременных мышей Rln + / + и Rln — / — . Миогенный тонус был значительно ослаблен в артериях беременных мышей Rln + / + (фиг. 2A, P <0,0001). Анализ AUC показал, что общее развитие миогенного тонуса в маточных артериях у мышей Rln — / — было вдвое больше, чем у мышей Rln + / + ( P <0.01, рисунок 2В).

    Рисунок 2 . Развитие миогенного тонуса в маточных артериях поздних беременных мышей Rln + / + и Rln — / — . Миогенный тонус: (A), с повышением давления (мм рт. Ст.) И (B), площадь под кривой (AUC). ( n = 8–9 на группу). Миогенный тонус: поздно беременные (C) Rln + / + и (D) Rln — / — мышей после предварительной обработки артерий без (квадраты) или с ингибитором NOS ( треугольник) L-NAME или (ромбики) L-NAME и ингибитор ЦОГ Indo (L-NAME + Indo).Вклад NO и простаноидов вазодилататора (PG) в миогенный тонус анализируется как AUC ( n = 5–9 на группу) в основной маточной артерии беременной (E) и сравнивается между (F) небеременными (NP) и беременная (d17,5) Rln + / + и Rln — / — мышей. Данные представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего. * P <0,05 по сравнению с генотипом, двусторонний ANOVA (A) , # P <0,05 между генотипами, критерий Стьюдента t , * P <0.05 по сравнению с контролем, двусторонним контролем ANOVA против L-NAME (C, D) ; P <0,05 односторонний контроль ANOVA против NO, * P <0,05 односторонний контроль ANOVA против NO (E) ; α P <0,05 односторонний дисперсионный анализ NO по сравнению с PG (E) . λ P <0,05 двусторонний дисперсионный анализ с факторами статуса беременности или эндотелиальными факторами (F) .

    Обработка только L-NAME значительно увеличивала развитие миогенного тонуса в артериях обеих Rln + / + ( P = 0.04) и Rln — / — мышей ( P = 0,0005, Фигуры 2C, D). Подавление синтеза простаноидов не имело дальнейшего значительного эффекта. Анализ AUC показал, что как NO ( P = 0,007), так и простаноиды ( P = 0,002) вносят важный и значительный вклад в регуляцию миогенного тонуса у здоровых беременных мышей Rln + / + (рис. 2E). . Для маточных артерий мышей Rln — / — анализ AUC показал, что, хотя и NO, и простаноиды вазодилататора способствуют регуляции миогенного тонуса, роль NO была значительно выше ( P <0.0001; Рисунок 2E).

    При сравнении общей AUC миогенного тонуса в маточных артериях небеременных и беременных мышей очевидно, что, хотя у мышей Rln — / — усилена регуляция компонента NO, увеличения простаноидного компонента не наблюдается. у этих мышей во время беременности. Повышенная регуляция простаноидного компонента была отмечена в маточных артериях на уровне Rln + / + во время беременности (рис. 2F).

    Индуцированная агонистами эндотелий-зависимая релаксация

    Эндотелиальная дисфункция в маточных артериях небеременных мышей с дефицитом релаксина

    ACh индуцировал зависимое от концентрации расслабление в артериях у мышей Rln + / + и Rln — / — (Фигуры 3A, B).Чувствительность к ACh была снижена в два раза (pEC 50 , P <0,05), а общая AUC для релаксации была значительно снижена у небеременных Rln — / — по сравнению с Rln + / + мышей (рис. 3С; таблица 1). Максимальное расслабление не отличалось между артериями мышей Rln + / + и Rln — / — (Таблица 1).

    Рисунок 3 . Кривые концентрация-ответ для эндотелий-зависимого агониста ацетилхолина (ACh) в основных маточных артериях небеременных (A) Rln + / + и (B) Rln — / — мышей в отсутствие (кружок; контроль) или в присутствии ингибитора NOS (треугольник) L-NAME или (ромб) L-NAME и ингибитора COX Indo (L-NAME + Indo). (C) Анализ площади под кривой (AUC) вклада оксида азота (NO), простаноидов-вазодилататоров (PG) и гиперполяризации эндотелия (EDH) в индуцированное ACh расслабление в основных маточных артериях небеременной женщины Rln + / + и Rln — / — мышей и (D) изменение максимальной эндотелий-зависимой релаксации (R max ) после инкубации с L-NAME или L-NAME + Indo; остальная релаксация приписывается EDH.Кривые концентрация-ответ на ACh у небеременных (E) Rln + / + и (F) Rln — / — мышей после предварительной обработки артерий (квадрат) L- НАЗВАНИЕ + Индо, (круг) ИМЯ L + Индо + ТРАМ-34, (треугольник) ИМЯ Л + Индо + ТРАМ-34 + апамин. (G) AUC-анализ EDH-опосредованной релаксации и вклады калиевых каналов с промежуточной (IK Ca ) и малой проводимостью (SK Ca ) Ca 2+ в вызванную ACh релаксацию в матке артерии небеременных Rln + / + и Rln — / — мышей и (H) изменение максимального расслабления (R max ) ( n = 5–8 на группу ).* P <0,0001 двусторонний дисперсионный анализ по сравнению с контролем; # P <0,05 двусторонний дисперсионный анализ L-NAME по сравнению с L-NAME + Indo; λ P <0,05 двусторонний дисперсионный анализ по отношению к L-NAME + Indo; α P <0,05 двусторонний дисперсионный анализ L-NAME + Indo + TRAM-34 по сравнению с L-NAME + Indo + TRAM-34 + апамин; P <0,05 на основании однофакторного дисперсионного анализа генотипа.

    Таблица 1 . Реактивность маточной артерии у мышей Rln + / + и Rln — / — .

    Ингибирование

    NOS значительно снижает индуцированное ACh расслабление (R max и AUC, P <0,05) и чувствительность ( P <0,05) в маточных артериях небеременных мышей (Фигуры 3A – D; Таблица 1). Чувствительность и максимальный ответ на ACh не различались у мышей Rln — / — и Rln + / + у L-NAME (Фигуры 3A, B, D; Таблица 1). Блокада продукции простаноидов вызывала дальнейшее торможение релаксации.В присутствии Indo чувствительность к ACh была ниже (вдвое, P = 0,02) у мышей Rln — / — (таблица 1). Расслабление, остающееся в присутствии L-NAME + Indo, приписывается EDH.

    Общая AUC для релаксации была значительно меньше в артериях у мышей Rln — / — (рис. 3С). Анализ AUC показал, что вклад NO, сосудорасширяющих простаноидов и EDH в эндотелий-зависимую релаксацию не отличался у мышей Rln + / + и Rln — / — .Изменение максимальной релаксации, вызванной L-NAME и Indo, и максимальной релаксации, вызванной EDH, существенно не различались между группами (рис. 3D).

    Относительный вклад каналов IK Ca и SK Ca в EDH-опосредованную релаксацию был исследован в присутствии L-NAME + Indo только с TRAM-34 или комбинации TRAM-34 + апамин (Рисунки 3E, F ). Ингибирование активности IK Ca с помощью TRAM-34 не изменяет чувствительность к ACh, но значительно снижает максимальное EDH-опосредованное расслабление в артериях как от Rln + / + ( P = 0.006) и Rln — / — ( P = 0,002) мышей, однако степень восстановления, производимого TRAM-34, не различалась между генотипами (Фигуры 3E – H; Таблица 1). Последующая блокада активности канала SK Ca апамином дополнительно снижает EDH-опосредованную релаксацию (pEC 50 , R max и AUC) (Фигуры 3E – H; Таблица 1). Максимальное расслабление было значительно снижено как для Rln + / + ( P = 0,01), так и для Rln — / — ( P = 0.04) мышей (рис. 3F). Эффект ингибирования SK Ca на максимальное EDH-опосредованное расслабление было больше в маточных артериях у мышей Rln + / + по сравнению с Rln — / — мышей (фигура 3H). Релаксация EDH практически не происходила в присутствии ингибирования каналов IK Ca и SK Ca в маточных артериях от мышей Rln + / + и Rln — / — .

    Анализ

    AUC показал, что общая релаксация EDH не различалась у мышей Rln + / + и Rln — / — (фигура 3G).Основной вклад каналов IK Ca не изменился, но вклад каналов SK Ca был значительно ( P <0,05) снижен в артериях мышей Rln — / — (Рисунки 3G, H).

    Влияние беременности на эндотелий-зависимую релаксацию

    Во время беременности не было значительной разницы в чувствительности маточной артерии, AUC или максимальной релаксации к ACh между беременными мышами Rln — / — и Rln + / + (Рисунки 4A – C; Таблица 1).Анализ AUC показал, что вклад NO, простаноидов, расширяющих сосуды, и EDH в общую эндотелий-зависимую релаксацию не отличался между генотипами. Общий вклад ЭДГ в эндотелий-зависимую релаксацию в маточной артерии был значительно увеличен во время беременности как у Rln + / + ( P = 0,0008), так и у Rln — / — ( P = 0,002) мышей (рисунок 4C по сравнению с рисунком 3C; таблица 1).

    Рисунок 4 .Кривые зависимости от концентрации эндотелий-зависимого агониста ацетилхолина (ACh) в основных маточных артериях поздней беременности (A) Rln + / + и (B) Rln — / — мышей после предварительной обработки артерий без (кружок; контроль) или с ингибитором NOS (треугольник) L-NAME или (ромб) L-NAME и ингибитором COX Indo (L-NAME + Indo). (C) Вклад оксида азота (NO), сосудорасширяющих простаноидов (PG) и гиперполяризации эндотелия (EDH) в индуцированное ACh расслабление у поздней беременности Rln + / + и Rln — / — мышей) и (D) изменение максимальной релаксации (R max ) на ACh после инкубации с L-NAME и L-NAME + Indo, при этом оставшаяся релаксация приписывается EDH.Кривые концентрация-ответ на ACh в основных маточных артериях поздней беременности (E) Rln + / + и (F) Rln — / — мышей после предварительной обработки артерий ( квадрат) L-NAME + Indo, (круг) L-NAME + Indo + TRAM-34, (треугольник) L-NAME + Indo + TRAM-34 + apamin. (G) Вклад EDH, промежуточной проводимости (IK Ca ) и низкой проводимости (SK Ca ) Ca 2+ -активированных калиевых каналов в индуцированном ACh расслаблении в основных маточных артериях небеременных Rln + / + и Rln — / — мышей при анализе как AUC и (H) изменение максимальной релаксации (R max ) на ACh после инкубации с TRAM-34 и TRAM- 34 + апамин ( n = 7–9 на группу).* P <0,0001 двусторонний дисперсионный анализ по сравнению с контролем; # P <0,05 двусторонний дисперсионный анализ L-NAME по сравнению с L-NAME + Indo; λ P <0,0001 двусторонний дисперсионный анализ по отношению к L-NAME + Indo; α P <0,05 двусторонний дисперсионный анализ L-NAME + Indo + TRAM-34 по сравнению с L-NAME + Indo + TRAM-34 + апамин; P <0,05 на основании однофакторного дисперсионного анализа генотипа.

    Предварительная инкубация с L-NAME значительно снижала ACh-индуцированную релаксацию (pEC 50 , R max и AUC, P <0.05) в маточных артериях беременных мышей. Эффект L-NAME на расслабление не отличался между артериями мышей Rln — / — и Rln + / + (Фигуры 4A – D; Таблица 1). Последующее воздействие Indo не оказало дальнейшего значительного влияния на чувствительность к ACh, но максимальное расслабление было дополнительно снижено в артериях от Rln + / + ( P = 0,018), но не Rln — / — мышей ( Рисунок 4D).

    Во время беременности чувствительность к ACh-вызванной EDH-опосредованной релаксации не различалась у мышей Rln + / + и Rln — / — (Рисунки 4E, F; Таблица 1).Основной вклад каналов Ca IK в EDH-опосредованную релаксацию был значительно ( P <0,05) увеличен, однако роль каналов SK Ca была значительно ( P <0,05) снижена в Rln — / — мышей (Рисунки 4E – H; Таблица 1).

    Нарушение BK-опосредованной эндотелий-зависимой релаксации у небеременных мышей с дефицитом релаксина

    В то время как ACh вызывал максимальное эндотелий-зависимое расслабление, BK вызывал субмаксимальное расслабление даже при самой высокой концентрации, используемой у небеременных мышей (рисунки 5A, C; таблица 1).Несмотря на сильную BK-опосредованную релаксацию в маточных артериях небеременных мышей Rln + / + (рис. 5A; Таблица 1), BK не смог произвести значительного расслабления в маточных артериях небеременных Rln — / — мышей (рис. 5C; таблица 1). В отличие от ACh, релаксация, вызванная BK, полностью опосредована NO (Рисунок 5A; Таблица 1).

    Рисунок 5 . Кривые концентрация-ответ на эндотелий-зависимый агонист брадикинин (ВК) в основных маточных артериях от Rln + / + (A) небеременных и (B) беременных мышей и от Rln — / — (C) небеременных и (D) беременных мышей после предварительной обработки артерий без (кружок; контроль) или с ингибитором NOS (треугольник) L-NAME или (ромб) L-NAME и ингибитор ЦОГ Indo (L-NAME + Indo).Кривые концентрация-ответ на эндотелий-независимый агонист нитропруссида натрия (SNP) в основных маточных артериях от (E) небеременных и (F) беременных Rln + / + и Rln — / — мышей ( n = 7–9 на группу).

    Во время беременности максимальное расслабление, вызванное BK, не отличалось в маточных артериях от небеременных мышей Rln + / + (Рисунок 5B; Таблица 1). Однако BK-опосредованная релаксация была значительно увеличена в артериях у беременных мышей Rln — / — (фиг. 5D), так что максимальное BK-опосредованное расслабление не отличалось от релаксации в артериях из Rln + / + мышей (Фигуры 5B, D; Таблица 1).Большая часть BK-опосредованного расслабления приписывается NO, однако небольшой компонент, связанный с вазодилатирующим простаноидом, появился во время беременности в маточных артериях как от Rln + / + , так и от Rln — / — мышей (Рисунки 5B). , D; таблица 1).

    Эндотелий-независимая релаксация в маточной артерии мышей с дефицитом релаксина

    Не было значительных различий в чувствительности гладких мышц к SNP в маточных артериях у мышей Rln — / — и Rln + / + при отсутствии беременности (Рисунок 5E; Таблица 1) и во время беременности (Рисунок 5F). ; Таблица 1).При адаптации к беременности чувствительность гладких мышц к SNP не изменилась в маточных артериях у мышей Rln + / + (фигура 5F; таблица 1). Однако чувствительность к SNP была значительно ( P = 0,035) увеличена у мышей Rln — / — (рисунок 5F; таблица 1). Максимальное расслабление по отношению к SNP было значительно увеличено с беременностью для маточных артерий как от Rln + / + ( P = 0,0003), так и от Rln — / — ( P = 0.0012) мышей (Фигуры 5E, F; Таблица 1).

    Чувствительность и максимальный ответ на илопрост не различались в маточных артериях мышей Rln + / + или Rln — / — , и на них не влияла беременность (Таблица 1).

    Дефицит релаксина слабо влияет на экспрессию генов, связанных с гипертензией, на поздних сроках беременности

    Для скрининга потенциальных механизмов, регулирующих повышенный миогенный тонус и аберрантную релаксацию маточной артерии у мышей на поздних сроках беременности Rln — / — , мы проанализировали 84 представляющих интерес гена с использованием массива qPCR.Удивительно, но дефицит релаксина значительно изменил экспрессию только 8 генов (из 84 проанализированных). Несмотря на его влияние на миогенный тонус, дефицит релаксина не изменяет гены, участвующие в синтезе NO; эндотелиальный NOS (eNOS; Nos3 , фигура 6A; таблица 2), белок, взаимодействующий с NOS ( Nosip ) или транспортный белок NOS (, нострин ; таблица 2). Экспрессия рецептора простагландина I 2 ( Ptgir ) продемонстрировала тенденцию к снижению экспрессии у мышей Rln — / — , но не достигла значимости ( P = 0.06; Рисунок 6B; Таблица 2). Также не наблюдалось значительного влияния дефицита релаксина на экспрессию эндотелин-превращающего фермента 1 ( Ece1, P = 0,08; Рисунок 6C; Таблица 2), эндотелина-1 (ET-1, Edn1 ), эндотелина-2. ( End2 ) и рецепторы эндотелина (ET A , Ednra и ET B , Ednrb ; таблица 2).

    Рисунок 6 . Количественный ПЦР-анализ (A) эндотелиальных NOS ( Nos3 ), (B) рецептор простагландина I 2 рецептор ( Ptgir ), (C) эндотелин-превращающий фермент 1 ( Ece6 ) (D) никотиновый холинорецептор типа β1 ( Chrnb1 ), (E) , кодирующий циклический нуклеотидно-управляемый канал α4 ( Cnga4 ), (F) инозитол-1,4,5-трифосфатный рецептор-2 (905 Itpr1, ), (G), , инозитол, 1,4,5-трифосфатный рецептор-2 ( Itpr2, ) и (H), , натриевый беспотенциально закрытый канал типа 1α ( Scnn1a ) в маточной артерии в последнее время -беременные (•) Rln + / + и (•) Rln — / — мышей ( n = 4–6 на группу).* P <0,05 Непарные t -тесты Стьюдента на основе генотипа.

    Таблица 2 . Экспрессия генов в маточных артериях мышей на поздних сроках беременности.

    Анализ кПЦР также выявил новые гены, на которые влияет дефицит релаксина, в том числе никотиновый холинергический рецептор типа β1 ( Chrnb1 ), кодирующий циклический нуклеотидно-управляемый канал α4 ( Cnga4 ), инозитол-1,4,5-трифосфатный рецептор-2 ( Itpr1 ) и инозитол-1,4,5-трифосфатного рецептора-2 ( Itpr2 ), все они были значительно активированы в 2 раза или более ( P <0.05, рисунки 6D – H; Таблица 2).

    Влияние дефицита релаксина на вес плода и плаценты

    Распределение веса плода жизнеспособных плодов Rln — / — мышей было смещено влево (указывает на более низкий вес) с 39% плодов от Rln — / — мышей с массой ниже 10-го. центиль (<732,4 мг) нормального распределения мышей Rln + / + (фигура 7A). Жизнеспособное количество детенышей в помете не изменилось в зависимости от генотипа ( Rln + / + = 7.9 ± 1,6; Rln — / — = 8,8 ± 1,6, рисунок 7B). Необработанные средние веса пометов от беременных мышей Rln — / — были значительно снижены по сравнению с мышами Rln + / + , весящими примерно на 10% меньше (Рисунок 7C; Таблица 3; P = 0,001). После корректировки на самок и размер помета расчетные средние предельные значения плодов от беременных мышей Rln — / — все еще были значительно снижены по сравнению с Rln + / + мышей (фигура 7D; таблица 3; P < 0.001). Интересно, что вес плаценты на 17-й день беременности не зависел от генотипа даже после поправки на самок и размер помета (Рисунки 7E, F; Таблица 3).

    Рисунок 7. (A) Распределение веса плодов с 17-го дня беременности Rln + / + и Rln — / — самок мышей как% от популяции плода исследования. Вертикальная пунктирная линия представляет 10-й центиль для распределения веса плода при 732,4 мг. (B) Количество жизнеспособных щенков в помете из Rln + / + и Rln — / — пометов. (C) Необработанный средний вес плода (мг), (D) расчетное предельное среднее значение веса плода (мг), (E) необработанный средний вес плаценты (мг) и (F) расчетное маргинальное среднее веса плаценты (мг) из Rln + / + и Rln — / — пометов. * P <0,05 Непарные t -тесты Стьюдента для необработанных данных, основанные на генотипе или общей линейной модели для оцененных маргинальных средних.

    Таблица 3 .Масса плода и плаценты из пометов соответствующего возраста Rln + / + и Rln — / — пометов.

    Обсуждение

    Это исследование показало, что релаксин является регулятором функции маточной артерии у беременных и не беременных. Важно отметить, что релаксин необходим для нормальной адаптации маточной артерии к беременности, особенно для снижения миогенного тонуса маточной артерии. Чувствительность маточной артерии к агонистам эндотелия была значительно снижена у небеременных мышей Rln — / — , при этом различия исчезли во время беременности.Основной вклад каналов K Ca в EDH-опосредованную релаксацию был нарушен у мышей с дефицитом релаксина, что сохранялось от отсутствия беременности до беременности. Нарушение регуляции миогенного тонуса маточной артерии во время беременности, вероятно, будет нарушать маточно-плацентарную перфузию и вносить вклад в ограничение роста плода у мышей Rln — / — .

    В отсутствие беременности развитие и регуляция миогенного тонуса маточной артерии были сходными у мышей Rln + / + и Rln — / — .Сходные результаты были также получены для мелких почечных артерий у небеременных мышей Rln — / — (Novak et al., 2006). В маточных артериях небеременных животных обоих генотипов NO играет важную роль в регуляции миогенного тонуса. По-видимому, роль сосудорасширяющих простаноидов незначительна, поскольку ингибирование ЦОГ не оказывает значительного влияния на развитие миогенного тонуса. Общий вклад NO и простаноидов, расширяющих сосуды, в регуляцию миогенного тонуса оказался сходным в артериях обоих генотипов.

    Подавление развития миогенного тонуса в маточной артерии во время беременности было зарегистрировано у нескольких видов (Veerareddy et al., 2002; Xiao et al., 2010; Hu et al., 2011). При адаптации к беременности мы также обнаружили, что развитие миогенного тонуса было значительно снижено в маточных артериях наших поздних беременных мышей Rln + / + . Хотя NO играет важную роль в регуляции миогенного тонуса, роль простаноидов, предположительно простациклина, была значительно повышена в маточных артериях беременных мышей Rln + / + .Поразительным открытием настоящего исследования является то, что нормальное подавление миогенного тонуса во время беременности не наблюдалось у мышей Rln — / — . Степень развития миогенного тонуса в маточных артериях у беременных мышей Rln — / — была неотличима от таковой у небеременных мышей. Интересно, что это произошло, несмотря на значительное повышение роли NO в регуляции миогенного тонуса в маточных артериях беременных мышей Rln — / — .Напротив, поддержание высокого уровня миогенного тонуса маточной артерии объясняется отсутствием активации простаноидного компонента во время беременности на фоне дефицита релаксина. Эти данные подтверждаются тенденцией к снижению экспрессии мРНК рецептора простациклина. Однако ферменты, участвующие в каскаде простагландинов, ЦОГ-1 и ЦОГ-2, не были затронуты. Кроме того, мы ранее продемонстрировали на беременных мышах Rln — / — , что существует дефицит продукции простаноидов, производных от гладкомышечных вазодилататоров, в брыжеечных артериях (Marshall et al., 2016), которые можно было восстановить с помощью 5-дневной непрерывной инфузии релаксина (Marshall et al., 2017a). Таким образом, сниженная продукция простаноидов-вазодилататоров и / или экспрессия их рецепторов в маточной артерии беременных мышей Rln — / — лежит в основе поддержания высокого уровня миогенного тонуса.

    Лечение релаксином небеременных крыс снижает развитие миогенного тонуса в почечных и брыжеечных артериях (Novak et al., 2002) до уровней тонуса, аналогичных тем, которые наблюдаются в этих артериях во время беременности (Gandley et al., 2001). Такое подавление тонуса в артериях небеременных крыс объясняется повышенной биодоступностью NO за счет усиления передачи сигналов эндотелиального и эндотелиального рецепторов ET B и повышенной активности eNOS (Gandley et al., 2001; Novak et al., 2002). Однако в нашей модели дефицита релаксина дефицита роли NO в регуляции миогенного тонуса во время беременности не наблюдалось. Фактически, роль NO была усилена в маточных артериях беременных мышей Rln — / — .Мы не обнаружили различий в экспрессии генов, участвующих в синтезе NO, или генов, связанных с сигнальным путем рецептора ET B . Повышение активности eNOS и / или биодоступности NO, вероятно, лежит в основе усиленной NO-зависимой регуляции миогенного тонуса у беременных мышей Rln — / — и может отражать компенсаторный механизм для противодействия отказу вазодилататорного простаноидного пути.

    Наши результаты показали ключевую роль эндогенного релаксина в обеспечении адаптивного снижения миогенного тонуса основной маточной артерии во время беременности.Это снижение миогенного тонуса будет способствовать увеличению перфузии маточно-плацентарного отдела для поддержания здоровой беременности. В самом деле, это подтверждается аналогичными данными для малых почечных артерий, когда беременные крысы в ​​середине беременности, получавшие нейтрализующие релаксин антитела (MCA1), больше не демонстрировали нормального снижения миогенного тонуса, связанного с беременностью (Novak et al., 2001). Кроме того, у беременных крыс, получавших MCA1, не наблюдалось гестационного увеличения сердечного выброса, общей артериальной податливости и снижения системного сосудистого сопротивления, которые происходят во время беременности у здоровых крыс (Debrah et al., 2006). В совокупности текущее исследование и предыдущие результаты других групп подчеркивают важность релаксина как интегральной молекулы, участвующей в адаптации сердечно-сосудистой системы матери к беременности.

    Маточные артерии небеременных Rln — / — мышей проявляли эндотелиальную вазодилататорную дисфункцию при стимуляции ACh или BK. ACh высвобождает набор сосудорасширяющих средств, включая NO, EDH и простаноидное вазодилататорное средство, вероятно, простациклин. Чувствительность к ACh была значительно снижена у мышей Rln — / — , хотя максимальная релаксация не различалась между генотипами.Сходным образом, в исследовании самцов мышей Rln — / — брыжеечные артерии имели пониженную чувствительность к ACh-опосредованной релаксации (Leo et al., 2014a). Нарушение у мужчин объясняется активацией простаноидного вазоконстрикторного пути, однако у нас нет доказательств того, что нарушение у Rln — / — женщин вызвано этим. Наше исследование также коррелирует с исследованиями лечения релаксином (Leo et al., 2014b, 2017; Ng et al., 2016). После блокады синтеза NO не было различий в чувствительности к ACh между генотипами, однако после ингибирования продукции простаноидов чувствительность к ACh и, следовательно, EDH-опосредованная релаксация ухудшалась.Дальнейшее исследование роли каналов K Ca , участвующих в EDH-опосредованной релаксации, показало, что вклад каналов SK Ca был уменьшен в маточных артериях небеременных мышей Rln — / — . Нарушение экспрессии и / или активности канала SK Ca в артериях было зарегистрировано при различных сердечно-сосудистых заболеваниях (Félétou, 2016).

    В маточных артериях общее эндотелий-зависимое расслабление, вызванное BK, было лишь частью релаксации, вызванной ACh.В то время как ACh вызывал высвобождение различных сосудорасширяющих средств из эндотелия маточных артерий мышей, как было опубликовано ранее (Cooke and Davidge, 2003), у небеременных мышей BK вызывал релаксацию, которая полностью опосредована NO. Интересно, что BK-опосредованная релаксация практически отсутствовала в артериях небеременных мышей Rln — / — . Отсутствие ответа на BK, вероятно, также усугублялось нарушением чувствительности гладких мышц маточной артерии к NO у небеременных мышей Rln — / — .У самцов крыс лечение релаксином (острая внутривенная инъекция или 72-часовая непрерывная инфузия) избирательно увеличивало BK-опосредованное расслабление в брыжеечной артерии за счет усиления выработки простациклина (Leo et al., 2014b, 2016b), тогда как 48-часовая инфузия релаксина усиливала BK -опосредованная релаксация по пути NO (Leo et al., 2016b). Предполагается, что релаксин сигнализирует тщательно продуманным гетеродимерам, состоящим из рецептора релаксина и рецепторов BK (RXFP1-B 2 R), чтобы влиять на дилатацию (Leo et al., 2016a).Из-за тканевых ограничений маточной артерии небеременных мышей мы не смогли дополнительно исследовать, повлиял ли дефицит релаксина на эти гетеродимеры или гены, связанные с ACh-опосредованной релаксацией.

    Различия в чувствительности к ACh и ответной реакции на BK, наблюдаемые между маточными артериями мышей Rln + / + и Rln — / — , исчезли с беременностью. Вазодилататорная функция эндотелия усиливается во время беременности с повышенной активностью путей NO, простациклина и EDH под влиянием стероидных гормонов, таких как эстроген (Weiner et al., 1994; Vagnoni et al., 1998; Чжан и др., 2001; Egan et al., 2004; Бут и др., 2008; Гокина и др., 2010). Несмотря на то, что чувствительность ACh к EDH-опосредованной релаксации не различалась во время беременности между генотипами, оставалась основная дисрегуляция вкладов каналов IK Ca и SK Ca в артериях мышей с дефицитом релаксина. Роль каналов Ca IK была повышена, в то время как роль каналов SK Ca была снижена в маточных артериях мышей Rln — / — .Ранее было продемонстрировано, что релаксин стимулирует активность миометриальных кальций-активируемых калиевых каналов (Meera et al., 1995) и активирует активность канала IK Ca в брыжеечных артериях крыс и паренхиматозных артериолах головного мозга (Leo et al., 2016a). Однако потенциальные эффекты релаксина на эти активируемые кальцием калиевые каналы во время беременности в маточной артерии остаются неизученными. Связано ли несоответствие вкладов каналов IK Ca и SK Ca между Rln — / — и Rln + / + с различиями в экспрессии каналов или механизмах передачи сигналов (Гокина и др., 2010; Félétou, 2016) необходимо будет изучить в будущих исследованиях.

    Чтобы максимизировать экспериментальный результат для ограниченной доступной ткани, подход к анализу массивов кПЦР оценивал, как дефицит релаксина влияет на экспрессию 84 различных генов в основной маточной артерии поздних беременных мышей (Moradipoor et al., 2016). Это позволило провести широкий скрининг генов, связанных с сердечно-сосудистой системой, чего нельзя было достичь с помощью других количественных методов. Тем не менее, мы наблюдали тенденции в экспрессии генов, которые не достигли значимости, и для этих анализов была бы полезна дополнительная ткань, если бы она была доступна.Из 8 генов, значительно модулируемых дефицитом релаксина, большинство были новыми и неожиданными. Дефицит релаксина не оказывает значительного влияния на гены, участвующие в синтезе NO или PGI 2 , но усиливает экспрессию мРНК ACh рецептора Chrnb1 (Albuquerque et al., 2009). Поскольку маточные артерии мышей Rln — / — больше не демонстрировали пониженной чувствительности к ACh на поздних сроках беременности в отсутствие ингибиторов, это может быть связано с увеличением экспрессии рецепторов ACh.Из новых генов, на которые влияет дефицит релаксина, Cnga3 , субъединица канала с циклическими нуклеотидами, участвует в передаче сигнала и может находиться под влиянием ионов кальция (Dai et al., 2014), что делает эту находку интересной. Фактор гипоксии α ( Hif1 α), субъединица фактора транскрипции, действующего на гипоксию (Benita et al., 2009), подавлялся в маточной артерии поздней беременности мышей Rln — / — . Остается выяснить, трансформируются ли и в какой степени эти изменения в экспрессии генов в измененный фенотип основной маточной артерии.

    Таким образом, эндогенный релаксин играет обязательную роль в нормальном, связанном с беременностью подавлении миогенного тонуса в маточной артерии. Во время беременности эндогенный релаксин критически активизирует модуляцию миогенного тонуса, опосредованную простаноидами вазодилататора, для поддержки маточно-плацентарной перфузии и роста плода.

    Авторские взносы

    LP и MT разработали исследовательский проект. SM, SS, MJ, KO и MT проводили исследования. Компания SM произвела разведение мышей, проверила течку, установила беременность, наблюдала за всеми мышами и завершила сбор всех тканей.Рукопись написали С.М., М.Т. и С.С. SM, SS, MJ и MT проанализировали данные и выполнили статистический анализ. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

    Финансирование

    Автор (ы) раскрыл получение следующей финансовой поддержки для исследования, авторства и / или публикации этой статьи: эта работа была поддержана грантом проекта Австралийского национального совета по здравоохранению и медицинским исследованиям (LP1064845) и Университета Мельбурна. Грант раннего научного сотрудника SS.SM и MJ получили австралийские награды для аспирантов.

    Заявление о конфликте интересов

    Авторы сообщают, что LP был оплачиваемым консультантом Novartis Pharma AG с 2012 по 2015 годы.

    Другие авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

    Благодарности

    Авторы благодарят г-жу Таню Лонг и г-на Даррена Чиполлу (Университет Мельбурна) за помощь в поддержании колонии мышей, а также доктора Марка Дилворта (Университет Манчестера) и его исследовательскую группу за их помощь в представлении данных о весе плода в виде нормального распределения. кривые.Авторы также благодарят доктора Миранду Дэвис-Так (Центр Ричи, Гудзоновский институт медицинских исследований, Университет Монаша) за ее неоценимую помощь в статистическом анализе веса плода и плаценты.

    Список литературы

    Альбукерке, Э. X., Перейра, Э. Ф., Алкондон, М., и Роджерс, С. У. (2009). Никотиновые ацетилхолиновые рецепторы млекопитающих: от структуры к функции. Physiol. Rev. 89, 73–120. DOI: 10.1152 / Physrev.00015.2008

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Бенита, Ю., Кикучи, Х., Смит, А. Д., Чжан, М. К., Чунг, Д. К., и Ксавьер, Р. Дж. (2009). Подход интегративной геномики позволяет идентифицировать гены-мишени фактора-1, индуцируемого гипоксией (HIF-1), которые формируют основной ответ на гипоксию. Nucleic Acids Res. 37, 4587–4602. DOI: 10.1093 / nar / gkp425

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Бут, Э. А., Флинт, Р. Р., Лукас, К. Л., Книттель, А. К., и Луччези, Б. Р. (2008). Эстроген защищает сердце от повреждения ишемией-реперфузией через PGI2, производный от COX-2. J. Cardiovasc. Pharmacol. 52, 228–235. DOI: 10.1097 / FJC.0b013e3181824d59

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Конрад, К. П., и Дэвисон, Дж. М. (2014). Почечное кровообращение при нормальной беременности и преэклампсии: есть ли место релаксину? Am. J. Physiol. Почечный 306, F1121 – F1135. DOI: 10.1152 / ajprenal.00042.2014

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Кук, К.-Л., и Дэвидж, С.Т. (2003). Вызванные беременностью изменения сосудистой функции брыжеечных и маточных артерий мышей. Biol. Репродукция. 68, 1072–1077. DOI: 10.1095 / биолрепрод.102.009886

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Коркоран, Дж. Дж., Николсон, К., Суини, М., Чарнок, Дж. К., Робсон, С. С., Вествуд, М., и др. (2014). Человеческие маточные и плацентарные артерии проявляют тканеспецифические острые реакции на 17-бета-эстрадиол и агонисты рецепторов эстрогена. Мол. Гм. Репродукция. 20, 433–441. DOI: 10,1093 / мольхр / gat095

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Дай, Г., Шерпа, Т., и Варнум, М. Д. (2014). Альтернативный сплайсинг регулирует чувствительность конусных циклических нуклеотид-управляемых (CNG) каналов к регуляции фосфоинозитидами. J. Biol. Chem. 289, 13680–13690. DOI: 10.1074 / jbc.M114.562272

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Дебра, Д. О., Новак, Дж., Мэтьюз, Дж.Э., Рамирес Р. Дж., Шрофф С. Г. и Конрад К. П. (2006). Релаксин необходим для системного расширения сосудов и повышения общей эластичности артерий во время ранней беременности у крыс в сознании. Эндокринология 147, 5126–5131. DOI: 10.1210 / en.2006-0567

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Дилворт, М. Р., Кусински, Л. К., Бейкер, Б. К., Реншалл, Л. Дж., Гринвуд, С. Л., Сибли, К. П. и др. (2011). Определение ограничения роста плода у мышей: стандартизованный и клинически значимый подход. Плацента 32, 914–916. DOI: 10.1016 / j.placenta.2011.08.007

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Иган, К. М., Лоусон, Дж. А., Фрис, С., Коллер, Б., Рейдер, Д. Дж., Смит, Э. М. и др. (2004). Простациклин, производный от ЦОГ-2, обеспечивает атерозащиту у самок мышей. Наука 306, 1954–1957. DOI: 10.1126 / science.1103333

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Феррейра В. М., Гомеш Т. С., Рейс Л.A., Ferreira, A. T., Razvickas, C. V., Schor, N., et al. (2009). Рецептор-индуцированная дилатация в системной и внутрипочечной адаптации крыс к беременности. PLoS ONE 4: e4845. DOI: 10.1371 / journal.pone.0004845

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Гэндли Р. Э., Конрад К. П. и Маклафлин М. К. (2001). Эндотелин и оксид азота опосредуют снижение миогенной реактивности мелких почечных артерий беременных крыс. Am. J. Physiol. Regul.Интегр. Комп. Physiol. 280, R1 – R7. DOI: 10.1152 / ajpregu.2001.280.1.R1

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Гокина Н. И., Кузина О. Ю., Вэнс А. М. (2010). Усиленная передача сигналов EDHF в маточно-плацентарной сосудистой сети крыс на поздних сроках беременности. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 299, h2642 – h2652. DOI: 10.1152 / ajpheart.00227.2010

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Гуи, Дж. Х., Ричардсон, М.L., Jelinic, M., Girling, J.E., Wlodek, M.E., Tare, M., et al. (2013). Повышенная жесткость маточной артерии у старых беременных мышей с мутантным релаксином устраняется обработкой экзогенным релаксином. Biol. Репродукция. 89, 1–11. DOI: 10.1095 / биолрепрод.113.108118

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Hu, X.Q., Xiao, D., Zhu, R., Huang, X., Yang, S., Wilson, S., et al. (2011). Беременность активирует активность канала K (+) , активированного Ca (2+) с высокой проводимостью, и снижает миогенный тонус в маточных артериях. Гипертония 58, 1132–1139. DOI: 10.1161 / HYPERTENSIONAHA.111.179952

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Jelinic, M., Leo, C.-H., Uiterweer, E. D. P., Sandow, S. L., Gooi, J. H., Wlodek, M. E., et al. (2014). Локализация рецепторов релаксина в артериях и венах, а также регионально-специфическое повышение податливости и опосредованной брадикинином релаксации после лечения in vivo серелаксином. FASEB J. 28, 275–287. DOI: 10.1096 / fj.13-233429

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ланг, У., Бейкер, Р. С., Брамс, Г., Зигмунт, М., Кунзель, В., и Кларк, К. Э. (2003). Маточный кровоток — определяющий фактор роста плода. Eur. J. Obstet. Гинеколь. Репродукция. Биол. 22, S55 – S61. DOI: 10.1016 / S0301-2115 (03) 00173-8

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Лео, К. Х., Елинич, М., Гуи, Дж. Х., Тэр, М., и Парри, Л. Дж. (2014a). Вазоактивная роль эндогенного релаксина в брыжеечных артериях самцов мышей. PLoS ONE 9: e107382. DOI: 10.1371 / journal.pone.0107382

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Leo, C.H., Jelinic, M., Ng, H.H., Marshall, S.A., Novak, J., Tare, M., et al. (2017). Сосудистое действие релаксина: оксид азота и не только. Br. J. Pharmacol. 174, 1002–1014. DOI: 10.1111 / bph.13614

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Лео, К. Х., Елинич, М., Нг, Х. Х., Тэр, М., и Парри, Л.J. (2016a). Серелаксин: новое лекарство от сосудистых заболеваний. Trends Pharmacol. Sci. 37, 498–507. DOI: 10.1016 / j.tips.2016.04.001

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Лео, К. Х., Елинич, М., Нг, Х. Х., Тэр, М., и Парри, Л. Дж. (2016b). Зависящая от времени активация путей простациклина и оксида азота при непрерывном внутривенном введении. инфузия серелаксина (рекомбинантный человеческий релаксин h3). Br. J. Pharmacol. 173, 1005–1017. DOI: 10.1111 / бут. / Час. 13404

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Лео, К. Х., Елинич, М., Паркингтон, Х. К., Тэр, М., и Парри, Л. Дж. (2014b). Острая внутривенная инъекция серелаксина (рекомбинантного человеческого релаксина-2) вызывает быструю и стойкую опосредованную брадикинином вазорелаксацию. J. Am. Сердце доц. 3, 1–15. DOI: 10.1161 / JAHA.113.000493

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Мандала, М., Осол, Г. (2012).Физиологическое ремоделирование маточного кровообращения у матери во время беременности. Basic Clin. Pharmacol. Toxicol. 110, 12–18. DOI: 10.1111 / j.1742-7843.2011.00793.x

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Маршалл, С.А., Лео, К.Х., Гирлинг, Дж. Э., Тэр, М., Берд, С., Ханнан, Н. Дж. И др. (2017a). Лечение релаксином снижает вызванное ангиотензином II сужение сосудов во время беременности и защищает от эндотелиальной дисфункции. Biol. Репродукция. 96, 895–906. DOI: 10.1093 / biolre / iox023

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Маршалл, С. А., Лео, К. Х., Сенадхера, С. Н., Гирлинг, Дж. Э., Тэр, М., и Парри, Л. Дж. (2016). Дефицит релаксина ослабляет индуцированную беременностью адаптацию брыжеечной артерии к ангиотензину II у мышей. Am. J. Physiol. Regul. Интегр. Комп. Physiol. 310, R847 – R857. DOI: 10.1152 / ajpregu.00506.2015

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Маршалл, С.A., O’Sullivan, K., Ng, H.H., Bathgate, R.A.D., Parry, L.J., Akhter Hossain, M., et al. (2017b). B7-33 воспроизводит вазопротекторные функции человеческого релаксина-2 (серелаксина). Eur. J. Pharmacol. 807, 190–197. DOI: 10.1016 / j.ejphar.2017.05.005

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Мира, П., Анвер, К., Монга, М., Оберти, К., Стефани, Э., Торо, Л. и др. (1995). Релаксин стимулирует активность кальций-активируемых калиевых каналов миометрия через протеинкиназу А. Am. J. Physiol. 269 (2, часть 1), C312 – C317. DOI: 10.1152 / ajpcell.1995.269.2.C312

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Мейер, М. К., Брайден, Дж. Э. и Маклафлин, М. К. (1993). Характеристики гладкой мускулатуры сосудов в кровообращении материнского сопротивления во время беременности у крыс. Am. J. Obstet. Гинеколь. 169, 1510–1516. DOI: 10.1016 / 0002-9378 (93) -K

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Морадипур, С., Исмаил, П., Этемад, А., Ван Сулейман, В. А., и Ахмадло, С. (2016). Профилирование экспрессии генов, связанных с биологией эндотелиальных клеток, у пациентов с диабетом 2 типа и пациентов с преддиабетом. Biomed Res. Int. 2016: 1845638. DOI: 10.1155 / 2016/1845638

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Нг, Х. Х., Лео, К. Х. и Парри, Л. Дж. (2016). Серелаксин (рекомбинантный человеческий релаксин-2) предотвращает эндотелиальную дисфункцию, вызванную высоким уровнем глюкозы, за счет улучшения продукции простациклина в аорте мыши. Pharmacol. Res. 107, 220–228. DOI: 10.1016 / j.phrs.2016.03.011

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ни, Ю., Мейер, М., и Осол, Г. (1997). Беременность увеличивает опосредованную оксидом азота вазодилатацию в маточных артериях крыс. Am. J. Obstet. Гинеколь. 176, 856–864. DOI: 10.1016 / S0002-9378 (97) 70611-2

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Новак, Дж., Дэниэлсон, Л. А., Керчнер, Л. Дж., Шервуд, О.Д., Рамирес, Р. Дж., Моалли, П. А. и др. (2001). Релаксин необходим для расширения почечных сосудов во время беременности у крыс в сознании. J. Clin. Инвестировать. 107, 1469–1475. DOI: 10.1172 / JCI11975

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Новак Дж., Парри Л. Дж., Мэтьюз Дж. Э., Керхнер Л. Дж., Индонива К., Хэнли-Янез К. и др. (2006). Доказательства локальной экспрессии и функции рецептора лиганда релаксина в артериях. FASEB J. 20, 2352–2352.DOI: 10.1096 / fj.06-6263com

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Новак, Дж., Рамирес, Р. Дж. Дж., Гэндли, Р. Э., Шервуд, О. Д., и Конрад, К. П. (2002). Миогенная реактивность снижена в мелких почечных артериях, выделенных от крыс, получавших релаксин. Am. J. Physiol. Regul. Интегр. Комп. Physiol. 283, R349 – R355. DOI: 10.1152 / ajpregu.00635.2001

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Шервуд, О. Д., Црнекович, В.Э., Гордон У. Л. и Резерфорд Дж. Э. (1980). Радиоиммуноанализ релаксина на протяжении всей беременности и во время родов у крыс. Эндокринология 107, 691–698. DOI: 10.1210 / эндо-107-3-691

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Смит, М. К., Мердок, А. П., Дэниелсон, Л. А., Конрад, К. П., и Дэвисон, Дж. М. (2006). Релаксин играет роль в установлении почечной реакции во время беременности. Fertil. Стерил. 86, 253–255. DOI: 10.1016 / j.fertnstert.2005.11.070

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Стюарт, Д. Р., Сельникер, А. К., Тейлор, К. А., Краган, Дж. Р., Оверстрит, Дж. У. и Ласли, Б. Л. (1990). Релаксин в периимплантационном периоде. J. Clin. Эндокринол. Метаб. 70, 1771–1773. DOI: 10.1210 / jcem-70-6-1771

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Тэр, М., Эммет, С. Дж., Коулман, Х. А., Скордилис, К., Эйлз, Д. У., Морли, Р., и другие. (2011). Недостаточность витамина D связана с нарушением функции эндотелия и гладких мышц сосудов и гипертонией у молодых крыс. J. Physiol. 589 (Pt 19), 4777–4786. DOI: 10.1113 / jphysiol.2011.214726

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ваньони, К. Э., Шоу, К. Э., Фернеттон, Т. М., Меглин, Б. М., Берд, И. М., и Магнесс, Р. Р. (1998). Производство эндотелиальных вазодилататоров маточными и системными артериями. III. Влияние яичников и эстрогенов на NO-синтазу. Am. J. Physiol. 275 (5 Pt 2), h2845 – h2856. DOI: 10.1152 / ajpheart.1998.275.5.h2845

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Veerareddy, S., Cooke, C.-L. М., Бейкер П. Н., Дэвидж С. Т. (2002). Сосудистая адаптация к беременности у мышей: влияние на миогенный тонус. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 283, h3226 – h3233. DOI: 10.1152 / ajpheart.00593.2002

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Водстрцил, Л.A., Tare, M., Novak, J., Dragomir, N., Ramirez, R.J., Wlodek, M.E., et al. (2012). Релаксин обеспечивает эластичность маточных артерий во время беременности и увеличивает маточный кровоток. FASEB J. 26, 4035–4044. DOI: 10.1096 / fj.12-210567

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Вайнер, К. П., Лизасоайн, И., Бейлис, С. А., Ноулз, Р. Г., Чарльз, И. Г., и Монкада, С. (1994). Индукция кальций-зависимых синтаз оксида азота половыми гормонами. Proc.Natl. Акад. Sci. США 91, 5212–5216. DOI: 10.1073 / pnas.91.11.5212

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Уизерс, С. Б., Таггарт, М. Дж., Бейкер, П., и Остин, К. (2009). Ответы изолированных маточных артерий крыс под давлением на изменения давления: эффекты предварительного сужения, эндотелия и беременности. Плацента 30, 529–535. DOI: 10.1016 / j.placenta.2009.03.011

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Сяо, Д., Хуанг, X., Ян, С., Лонго, Л. Д., и Чжан, Л. (2010). Беременность подавляет полимеризацию актина и зависимый от давления миогенный тонус в маточных артериях овцы. Гипертония 56, 1009–1015. DOI: 10.1161 / HYPERTENSIONAHA.110.159137

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Чжан Ю., Стюарт К. Г. и Дэвидж С. Т. (2001). Эндогенный эстроген опосредует сосудистую реактивность и растяжимость брыжеечных артерий беременных крыс. Am.J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 280, H956 – H961. DOI: 10.1152 / ajpheart.2001.280.3.H956

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Zhao, L., Roche, P.J., Gunnersen, J.M., Hammond, V.E., Tregear, G.W., и Wintour, E.M. (1999). Мыши без функционального гена релаксина не могут давать молоко своим детенышам. Эндокринология 140, 445–453. DOI: 10.1210 / endo.140.1.6404

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Хроническая гипоксия во время беременности усиливает миогенный тонус маточных артерий за счет повышенного окислительного стресса

    Abstract

    Хроническая гипоксия во время беременности оказывает серьезное неблагоприятное воздействие на адаптацию маточно-плацентарного кровообращения во время беременности.Тем не менее, лежащие в основе механизмы до конца не изучены. Настоящее исследование проверило гипотезу о том, что повышенная продукция активных форм кислорода (АФК) в маточных артериях играет решающую роль в дезадаптации маточного кровообращения, связанной с хронической гипоксией. Маточные артерии были изолированы от небеременных и недоношенных овец, которые содержались на уровне моря (~ 300 м) или подвергались гипоксии на высоте (3801 м) в течение 110 дней. Гипоксия значительно увеличивает продукцию АФК в маточных артериях беременных, но не небеременных овец.Это было связано со значительным увеличением NADPH-оксидазы (Nox) 2, но не Nox1 или Nox4, изобилия белка и общей активности Nox в маточных артериях беременных животных. Хроническая гипоксия значительно повышала зависимый от давления миогенный тонус маточных артерий у беременных овец, который отменялся ингибитором Nox апоцинином. Кроме того, вызванное гипоксией увеличение миогенной реактивности маточных артерий на форбол 12,13-дибутират у беременных овец блокировалось апоцинином и темполом.В соответствии с миогенными ответами, опосредованное гипоксией подавление активности канала BK Ca в маточных артериях беременных животных было обращено апоцинином. Полученные данные свидетельствуют о том, что повышенный окислительный стресс в маточных артериях играет ключевую роль в подавлении активности канала BK Ca , что приводит к повышенной миогенной реактивности и дезадаптации маточно-плацентарного кровообращения, вызванной хронической гипоксией во время беременности.

    Образец цитирования: Xiao D, Hu X-Q, Huang X, Zhou J, Wilson SM, Yang S, et al.(2013) Хроническая гипоксия во время беременности усиливает миогенный тонус маточных артерий за счет повышенного окислительного стресса. PLoS ONE 8 (9): e73731. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073731

    Редактор: Сянлинь Ши, Университет Кентукки, Соединенные Штаты Америки

    Поступила: 10 мая 2013 г .; Одобрена: 19 июля 2013 г .; Опубликовано: 16 сентября 2013 г.

    Авторские права: © 2013 Xiao et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

    Финансирование: Эта работа была поддержана грантами Национального института здравоохранения HL110125 (LZ), HL089012 (LZ), HD031226 (LZ), DA032510 (DX), HD069746 (SMW). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

    Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

    Введение

    Миогенная реактивность сосудов матки является ключевым физиологическим механизмом в регулировании базального сосудистого тонуса и маточного кровотока, а снижение зависимого от давления миогенного тонуса сосудов матки вносит значительный вклад в адаптацию маточно-плацентарного кровообращения во время беременности [1] — [7] . Повышенная активность Ca 2+ -активированного канала K + (BK Ca ) играет ключевую роль в ослаблении миогенного тонуса маточной артерии при беременности [8] — [10].Хроническая гипоксия во время беременности является обычным стрессом для сердечно-сосудистого гомеостаза матери и оказывает серьезное неблагоприятное воздействие на маточно-плацентарное кровообращение, приводя к 2–4-кратному увеличению частоты преэклампсии и задержки внутриутробного развития плода [11] — [13]. Наши недавние исследования показали, что хроническая гипоксия во время беременности приводит к ингибированию активности канала BK Ca и увеличению миогенного тонуса, зависимого от давления и опосредованной протеинкиназой C (PKC) миогенной реактивности маточных артерий у беременных овец [14] — [17].Однако молекулярные механизмы, лежащие в основе изменений сосудистой функции матки, опосредованных гестационной гипоксией, до конца не изучены.

    Активные формы кислорода (АФК), выступающие в качестве важных сигнальных молекул в гладкомышечных клетках сосудов, опосредуют многочисленные физиологические процессы. Важно, что АФК участвуют в патогенезе ряда сосудистых дисфункций, включая легочную гипертензию и преэклампсию [18] — [20]. Hoffmann и др. [21] продемонстрировали важную причинную роль увеличения АФК в развитии гипертензии и в патогенезе преэклампсии на животной модели, которая спонтанно развивает заболевание.Хотя внутриклеточные АФК могут генерироваться из различных источников, НАДФН-оксидаза (Nox), по-видимому, является основным генератором АФК в сосудистой сети. Недавние исследования показывают, что гипоксия увеличивает генерацию АФК посредством сигнальных путей Nox, а ингибирование Nox снижает опосредованные гипоксией ответы в сосудистой сети [22], [23]. Кроме того, фармакологическое ингибирование и генетическое подавление генерации ROS блокировало индуцированную гипоксией активацию PKC и миогенный ответ [24], [25]. Однако роль АФК в регуляции сосудистой функции матки в ответ на хроническую гипоксию во время беременности не исследовалась.Здесь мы представляем доказательства того, что повышенная продукция АФК, опосредованная Nox, подавляет активность канала BK Ca и приводит к увеличению PKC-опосредованной миогенной реактивности и миогенного тонуса маточных артерий у беременных овец, акклиматизированных к длительной высотной гипоксии.

    Материалы и методы

    Препарат ткани

    Маточные артерии были получены от небеременных и недоношенных (~ 140 дней беременности) беременных овец, содержащихся на уровне моря (~ 300 м) или подвергшихся высокогорной (3801 м) гипоксии (артериальный Po 2 : 60 мм рт. на 110 дней [15].Животных анестезировали тиамилалом (10 мг / кг, внутривенно) с последующей ингаляцией от 1,5% до 2,0% галотана. В брюшной полости сделали разрез и обнажили матку. Маточные артерии были изолированы и удалены без растяжения и помещены в модифицированный раствор Кребса. Все процедуры и протоколы были одобрены Комитетом по уходу и использованию институциональных животных Университета Лома Линда (IACUC # 8110004) и следовали рекомендациям Национального института здравоохранения по уходу и использованию лабораторных животных.

    Измерение продукции сосудистых АФК

    Флуоресценцию

    дигидроэтидия (DHE) использовали для изображения ROS in situ , как описано ранее [26] — [28]. Вкратце, незакрепленные замороженные сегменты маточной артерии разрезали на срезы толщиной 20 мкм с использованием криостата Leica CM 3050S при -20 ° C. Срезы тканей инкубировали с DHE (5 мкМ) при 37 ° C в течение 30 мин. Слайды просматривали с помощью микроскопа Olympus BH-2, а изображения получали с помощью системы визуализации цифровой камеры SPOT. Общее количество ROS в сегментах маточной артерии измеряли с помощью набора для анализа ROS / RNS Oxiselect ™ in vitro (Cell Biolabs, Inc.Сан-Диего, Калифорния), следуя инструкциям производителя, как описано ранее [27], [28].

    Измерение миогенного тонуса

    Зависимый от давления миогенный тонус маточных артерий резистентного размера (~ 150 мкм в диаметре) измеряли, как описано ранее [14], [15], [29]. Вкратце, маточные артерии рассекали, устанавливали и подвергали воздействию давления в камере для органов (Living Systems, Burlington, VT). Внутрипросветное давление контролировали с помощью сервосистемы, а диаметр артерии регистрировали с помощью подсистемы SoftEdge Acquisition Subsystem (IonOptix LLC, Milton MA).После периода уравновешивания внутрипросветное давление повышалось ступенчато с 10 до 100 мм рт. Ст. С шагом 10 мм рт. Ст. Для определения максимального пассивного диаметра зависимость пассивного давления от диаметра была проведена в физиологическом растворе без Ca 2+ , содержащем 3,0 ммоль / л EGTA. Следующая формула была использована для расчета процента миогенного тонуса на каждой ступени давления:% миогенного тонуса = (D1 — D2) / D1 × 100, где D1 — пассивный диаметр в физиологическом растворе без Ca 2+ (0 Ca ). 2+ с 3.0 ммоль / л EGTA), а D2 — это активный диаметр с нормальным физиологическим солевым раствором в присутствии внеклеточного Ca 2+ .

    Исследования сокращения

    Четвертые ветви основных маточных артерий беременных и небеременных овец были изолированы, разрезаны на кольцевые сегменты диаметром 2 мм и помещены в 10-миллилитровые ванны для тканей, содержащие модифицированный раствор Кребса, уравновешенный смесью 95% O 2 и 5% СО 2 . Индуцированные форболом 12,13-дибутират (PDBu) зависящие от концентрации сокращения были получены путем кумулятивного добавления PDBu примерно с половиной логарифмического приращения в отсутствие или в присутствии ингибитора Nox апоцинина или темпола, миметика SOD, как описано ранее [ 15], [26], [29].

    Вестерн иммуноблоттинг

    Маточные артерии гомогенизировали в буфере для лизиса с последующим центрифугированием при 10 000 g при 4 ° C в течение 10 мин. Собирали супернатанты, загружали образцы с равным количеством белка и разделяли с помощью SDS-PAGE. Мембраны инкубировали с кроличьими антителами против Nox1 (Sigma-Aldrich), мышиными антителами против Nox2 (BD Biosciences), кроличьими антителами против Nox4 (Abcam Inc) или против HIF-1α (BD Biosciences), соответственно, с последующим введением вторичных антител хрена. антитела, конъюгированные с пероксидазой [26], [27].Белки визуализировали с помощью реагентов с усиленной хемилюминесценцией, и блоты подвергали воздействию Hyperfilm. Результаты были количественно оценены с помощью системы документации и анализа электрофореза Kodak. Содержание белка-мишени было нормализовано по β-актину.

    Измерение активности Nox в сосудах

    Активность

    Nox измеряли с помощью хемилюминесцентного анализа на основе люцигенина, как описано [30]. Вкратце, маточную артерию промывали ледяным PBS и гомогенизировали в холодном буфере для лизиса (20 ммоль / л Kh3PO4, pH 7.0,1 ммоль / л EGTA, 10 мкг / мл апротинина, 0,5 мкг / мл лейпептина, 0,7 мкг / мл пепстатина и 0,5 ммоль / л PMSF). Гомогенат центрифугировали при 1000 g в течение 10 минут при 4 ° C. Осадок суспендировали в буфере для лизиса, содержащем ингибиторы протеаз, и вручную гомогенизировали на льду. Активность Nox измеряли с помощью люминесцентного анализа в фосфатном буфере 50 ммоль / л, pH 7,0, содержащем 1 ммоль / л EGTA, 150 ммоль / л сахарозы, 5 мкмоль / л адаптированный к темноте люцигенин в качестве акцептора электронов и 100 мкмоль / л. L НАДФН в качестве субстрата.Хемилюминесцентный сигнал измеряли с помощью люминметра Synergy HT (Biotek, Vermont). Данные были нормализованы по содержанию белка в каждом образце.

    Электрофизиология

    Гладкомышечные клетки были ферментативно диссоциированы от маточных артерий резистентного размера, и токи целых клеток K + регистрировали с использованием усилителя патч-кламп EPC 10 с программным обеспечением Patchmaster (HEKA, Lambrecht / Pfalz, Германия) при комнатной температуре, как описано ранее [8], [14].Вкратце, капли клеточной суспензии помещали в записывающую камеру, и прилипшие клетки непрерывно переливали с забуференным HEPES физиологическим солевым раствором. Микропипетки извлекались из боросиликатного стекла и имели сопротивление от 2 до 5 МОм при заполнении пипеточным раствором, содержащим (ммоль / л) 140,0 KCl, 1,0 MgCl 2 , 5,0 Na 2 ATP, 5,0 EGTA, 10,0 HEPES (pH 7,2). ). Клетки выдерживали при –50 мВ, и токи K + для целых клеток вызывали ступенями напряжения от –60 мВ до +80 мВ с помощью ступенчатых деполяризующих импульсов 10 мВ.Токи BK Ca регистрировали при непрерывной перфузии физиологического раствора с буфером HEPES, содержащего 5 ммоль / л 4-аминопиридина (4-AP), который блокирует потенциал-управляемые каналы K + . Токи K + были нормированы на емкость ячейки и выражены в пикоампер на пикофарад (пА / пФ).

    Анализ данных

    Результаты выражали как средние значения ± стандартная ошибка среднего, полученные от числа (n) приведенных экспериментальных животных. Кривые «концентрация-ответ» анализировали с помощью компьютерной нелинейной регрессии для соответствия данным с помощью GraphPad Prism (GraphPad Software, Сан-Диего, Калифорния) для получения pD 2 (−log EC 50 ) и максимального отклика (E max. ).Различия оценивали на предмет статистической значимости (P <0,05) с помощью ANOVA или теста t , где это необходимо.

    Результаты

    Хроническая гипоксия увеличивает экспрессию HIF-1α

    Фактор-1, индуцируемый гипоксией (HIF-1), является ключевым фактором транскрипции для ответа на низкий уровень кислорода. Чтобы определить, оказывает ли хроническая гипоксия прямое влияние на функцию сосудов матки, мы измерили экспрессию белка HIF-1α в маточной артерии. Как показано на Рисунке 1, хроническая гипоксия значительно повышала уровни белка HIF-1α как в беременных, так и в небеременных маточных артериях по сравнению с контрольными артериями.

    Рисунок 1. Влияние хронической гипоксии на экспрессию белка HIF-1α в маточных артериях.

    Маточные артерии были изолированы от недоношенных и небеременных овец, которые содержались на уровне моря (контроль) или подвергались высокогорной гипоксии в течение 110 дней. Обилие белка HIF-1α определяли с помощью Вестерн-блоттинга. Данные представляют собой средние значения ± стандартная ошибка среднего для тканей от 4 животных в каждой группе *, P <0,05 по сравнению с контролем.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073731.g001

    Хроническая гипоксия увеличивает продукцию АФК

    Продукцию

    ROS в маточных артериях измеряли in situ с помощью супероксид-опосредованной флуоресценции DHE, а также с помощью набора для количественного анализа на основе флуоресцентного 2 ‘, 7’-дихлородигидрофлуоресцеина (DCF). Как показано на рисунке 2А, ​​хроническая гипоксия увеличивала флуоресценцию in situ DHE в сосудистой стенке маточных артерий беременных овец, но не у небеременных животных. Соответственно, измерение ROS с помощью количественного анализа продемонстрировало значительное увеличение продукции ROS в маточных артериях беременных, но не небеременных животных, акклиматизированных к длительной высотной гипоксии (рис. 2B).

    Рисунок 2. Влияние хронической гипоксии на уровни АФК в маточных артериях.

    Маточные артерии были изолированы от небеременных (NPUA) и недоношенных (PUA) овец, которых содержали на уровне моря (контроль) или подвергали высокогорной гипоксии в течение 110 дней. A. ROS обнаружил in situ в стенках маточных артерий с флуоресценцией дигидроэтидия. B. Уровни ROS, измеренные с помощью набора для количественного анализа на основе DCF. Данные представляют собой средние значения ± стандартная ошибка среднего для тканей 5–7 животных каждой группы.*, P <0,05, по сравнению с контролем.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073731.g002

    Хроническая гипоксия увеличивает экспрессию Nox2 и общую активность Nox

    Nox является основным источником образования АФК в сосудистой сети. Среди 7 изоформ семейства Nox, Nox1, Nox2 и Nox4 преимущественно экспрессируются в сосудистой сети и играют важную роль в регуляции функции сосудов. Чтобы определить, влияет ли хроническая гипоксия на экспрессию Nox в маточных артериях, с помощью Вестерн-блоттинга определяли содержание белков Nox1, Nox2 и Nox4 в маточных артериях как нормоксичных, так и гипоксических животных.Как показано на рисунке 3А, хроническая гипоксия не оказала значительного влияния на экспрессию белков Nox1 и Nox4, но значительно увеличила содержание белка Nox2 в маточных артериях беременных овец. Напротив, ни одна из трех изоформ Nox не претерпела значительных изменений в результате хронической гипоксии в маточных артериях небеременных животных (рис. 3В). Кроме того, хроническая гипоксия значительно увеличивала общую активность Nox в маточных артериях беременных, но не небеременных, по сравнению с контрольными группами (рис. 4).

    Рисунок 3. Влияние хронической гипоксии на экспрессию Nox в маточных артериях.

    Маточные артерии были изолированы от недоношенных ( A ) и небеременных ( B ) овец, находящихся на уровне моря (контроль) или подвергшихся высокогорной гипоксии в течение 110 дней. Обилие белка Nox определяли с помощью Вестерн-блоттинга. Данные представляют собой средние значения ± стандартная ошибка среднего для тканей 5 животных в каждой группе *, P <0,05 по сравнению с контролем.

    https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0073731.g003

    Рис. 4. Влияние хронической гипоксии на активность Nox в маточных артериях.

    Маточные артерии были изолированы от недоношенных и небеременных овец, которые содержались на уровне моря (контроль) или подвергались высокогорной гипоксии в течение 110 дней. Активность НАДФН-оксидазы (Nox) измеряли по люминесценции люцигенина в маточных артериях. Данные представляют собой средние значения ± стандартная ошибка среднего для тканей 5 животных в каждой группе *, P <0,05 по сравнению с контролем.

    https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0073731.g004

    Ингибирование АФК, подавленных гипоксией, миогенного тонуса

    Наши предыдущие исследования показали, что беременность снижает зависимый от давления миогенный тонус маточных артерий, который подавляется хронической гипоксией во время беременности [15], [29]. Как показано на Фигуре 5, в отсутствие апоцинина, ингибитора Nox, зависимый от давления миогенный тонус маточных артерий у беременных овец был значительно повышен у животных, акклиматизированных к длительной высотной гипоксии, по сравнению с контролем.Апоцинин вызывал значительное подавление зависимого от давления миогенного тонуса у животных с гипоксией. В присутствии апоцинина не было существенной разницы в миогенном тонусе маточных артерий между контрольными и гипоксическими животными.

    Рис. 5. Влияние апоцинина на гипоксический миогенный тонус маточных артерий.

    Маточные артерии были изолированы от недоношенных овец, содержавшихся на уровне моря (контроль) или подвергшихся высотной гипоксии в течение 110 дней. Зависимый от давления миогенный тонус маточных артерий определяли в отсутствие или в присутствии апоцинина (100 мкмоль / л).Данные представляют собой средние значения ± стандартная ошибка среднего для тканей 5 животных из каждой группы. *, P <0,05, по сравнению с + апоцинином.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073731.g005

    Ингибирование АФК устраняет вызванные гипоксией PKC-опосредованные сокращения

    Предыдущие исследования показали, что PKC играет важную роль в зависимом от давления миогенном ответе резистентности маточных артерий, а хроническая гипоксия значительно увеличивает PKC-опосредованную миогенную реактивность в маточных артериях беременных овец [7], [14], [15], [29].Как показано на рисунке 6, индуцированные PDBu сокращения маточных артерий беременных овец были значительно увеличены у животных, акклиматизированных к длительной высотной гипоксии, по сравнению с контрольными животными (E max : 66,1 ± 2,5% против 39,7 ± 3,1%). %, P <0,05). Апоцинин не оказывал значимого влияния на вызванные PDBu сокращения у нормоксичных беременных овец (E max : 45,0 ± 5,6% против 39,7 ± 3,1%, P> 0,05), но значительно снижал максимальный ответ, вызванный PDBu, у животных с гипоксией (E макс : 46.9 ± 1,5% против 66,1 ± 2,5%, P <0,05). В присутствии апоцинина не было значительной разницы в индуцированных PDBu сокращениях маточных артерий у нормоксических и гипоксических беременных животных (Emax: 45,0 ± 5,6% по сравнению с 46,9 ± 1,5%, P> 0,05). У небеременных животных ни гипоксия, ни апоцинин не оказывали значительного влияния на сокращения, вызванные PDBu (рис. 6). Аналогичные результаты были получены с миметиком SOD (рис. 7).

    Фиг. 6. Эффект апоцинина на вызванные гипоксией PKC-опосредованные сокращения маточных артерий.

    Маточные артерии были изолированы от небеременных (NPUA) и недоношенных (PUA) овец, которых содержали на уровне моря (контроль) или подвергали высокогорной гипоксии в течение 110 дней. PDBu-индуцированные зависимые от концентрации миогенные вазоконстрикции определяли в отсутствие или в присутствии апоцинина (100 мкмоль / л). Данные представляют собой средние значения ± стандартная ошибка среднего для тканей от 4–6 животных.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073731.g006

    Рис. 7. Влияние темпола на вызванные гипоксией сокращения маточных артерий, опосредованные PKC.

    Маточные артерии были изолированы от небеременных (NPUA) и недоношенных (PUA) овец, которых содержали на уровне моря (контроль) или подвергали высокогорной гипоксии в течение 110 дней. PDBu-индуцированные зависимые от концентрации миогенные вазоконстрикции определяли в отсутствие или в присутствии темпола (100 мкмоль / л). Данные представляют собой средние значения ± стандартная ошибка среднего для тканей от 4–6 животных.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073731.g007

    Ингибирование АФК с подавлением обратной гипоксии BK

    Ca Активность канала

    Наше предыдущее исследование продемонстрировало функциональную связь канала BK Ca в опосредованном беременностью подавлении PKC и миогенного тонуса в маточных артериях [8].На фигуре 8 показано влияние апоцинина на активность канала BK Ca в миоцитах маточных артерий беременных овец. В соответствии с предыдущими данными [14], хроническая гипоксия подавляла активность канала BK Ca и значительно снижала цельноклеточные токи K + в миоцитах маточной артерии (55,3 ± 2,0 пА / пФ против 39,2 ± 0,9 пА / пФ при +80 мВ, P <0,05). Апоцинин не влиял на цельноклеточные токи K + в маточных артериях нормоксичных животных (55,6 ± 2.4 pA / pF против 55,3 ± 2,0 pA / pF при +80 мВ, P> 0,05), но значительно увеличили токи K + в маточных артериях животных, акклиматизированных к длительной высотной гипоксии (47,1 ± 1,5 pA / pF против 39,2 ± 0,9 пА / пФ при +80 мВ, P <0,05). Для дальнейшего определения специфического воздействия апоцинина на активность канала BK Ca потенциал-зависимый канал K + блокировали 4-аминопиридином. В присутствии 4-аминопиридина токи целых клеток K + снизились с 55.От 3 ± 2,0 пА / пФ до 31,2 ± 1,5 пА / пФ у нормоксических животных и от 39,2 ± 0,9 пА / пФ до 18,9 ± 1,6 пА / пФ у гипоксических животных, соответственно, а остальные токи K + представляют в основном компонент каналов ВК Са . Апоцинин не влиял на активность канала BK Ca у нормоксических животных (31,2 ± 1,5 пА / пФ против 32,3 ± 1,5 пА / пФ при +80 мВ, P> 0,05), но значительно увеличивал его у животных с гипоксией (26,5 ± 2,2 пА / пФ против 18,9 ± 1,6 пА / пФ при +80 мВ, P <0,05). В то время как в отсутствие апоцинина наблюдалось значительное снижение активности канала BK Ca при гипоксии (18.9 ± 1,6 пА / пФ), по сравнению с нормоксичными (32,3 ± 1,5 пФ) животными (P <0,05), в присутствии апоцинина не было существенной разницы в активности канала BK Ca между гипоксическими ( 26,5 ± 2,2 пА / пФ) и нормоксичных (31,2 ± 1,5 пА / пФ) животных (P> 0,05). Ни гипоксия, ни апоцинин не влияли на активность канала BK Ca в артериальных миоцитах матки небеременных животных (данные не представлены).

    Фиг. 8. Влияние апоцинина на активность канала BK Ca в маточных артериях, подавляемую гипоксией.

    Клетки гладкой мускулатуры были выделены из маточных артерий недоношенных овец, которые содержались на уровне моря (контроль) или подвергались высокогорной гипоксии в течение 110 дней. A. Токи K + целых клеток регистрировали в отсутствие (Ctr) или в присутствии апоцинина (APO, 100 мкмоль / л). B. BK Ca токи в присутствии 4-AP (5 ммоль / л) регистрировали в отсутствие (Ctr) или в присутствии апоцинина (APO, 100 мкмоль / л). Данные представляют собой средние значения ± SEM для 4–8 клеток от 4–6 животных каждой группы.*, P <0,05, по сравнению с -апоцинином (Ctr).

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073731.g008

    Обсуждение

    Настоящее исследование впервые представляет доказательства того, что высокогорная хроническая гипоксия во время гестации увеличивает продукцию АФК маточными артериальными формами. Повышенная генерация АФК совпадала с увеличением экспрессии белка Nox2 в стенках маточных артерий беременных животных. Важно отметить, что индуцированное гипоксией нарушение активности канала BK Ca и увеличение PKC-опосредованной миогенной реактивности маточных артерий у беременных животных было обращено ингибированием продукции ROS и / или удалением ROS.Эти данные предоставляют функциональные доказательства причинной роли повышенного окислительного стресса в дезадаптации маточного кровообращения, вызванной хронической гипоксией во время беременности.

    В настоящем исследовании наши выводы о том, что хроническая гипоксия увеличивает экспрессию HIF-1α в маточных артериях, позволяют предположить, что гипоксия может напрямую регулировать молекулярные сигнальные пути сосудов матки и функцию сосудов. Текущие данные о том, что хроническая гипоксия значительно увеличивает продукцию АФК в маточных артериях во время беременности, согласуются с предыдущими данными о легочных артериях, подвергшихся гипоксии [31], [32].Эти наблюдения предполагают, что клетки гладких мышц сосудов могут воспринимать низкую концентрацию O 2 и сигнализировать о гипоксическом HIF-1 путем высвобождения ROS, и подтверждают мнение о том, что гипоксия вызывает дисфункцию сосудов из-за повышенной регуляции уровней ROS в сосудистой сети. АФК состоят из разнообразного семейства небольших молекул, таких как супероксид-анион (O 2 ) и перекись водорода, а фермент Nox является первичным генератором АФК в кровеносных сосудах. Наши текущие данные о том, что хроническая гипоксия значительно увеличивает общую активность Nox в маточных артериях беременных, также предполагают, что Nox может быть основным генератором ROS и способствовать аберрантным ответам маточных артерий у овец, подвергшихся хронической гипоксии.Хотя Nox1, Nox2 и Nox4 экспрессировались в маточных артериях, хроническая гипоксия избирательно повышала экспрессию Nox2 у беременных животных. Это открытие предполагает, что производные Nox2 ROS могут функционально приписывать индуцированные хронической гипоксией изменения миогенной реактивности матки и тонуса сосудов. Кроме того, хроническая гипоксия увеличивала экспрессию белка Nox2 в стенках маточных артерий только у беременных, но не у небеременных животных, предполагая, что половые стероидные гормоны могут участвовать в регуляции экспрессии гена Nox2.Действительно, экспрессия Nox в эндотелиальных клетках человека подавлялась эстрогеном [33]. Овариэктомия привела к повышению артериального давления и усилению окислительного стресса в аорте крыс, чувствительных к соли Даля, из-за повышенной экспрессии Nox, которая была устранена добавлением эстрогена [34]. Кроме того, эстроген также регулирует активность Nox. Было продемонстрировано, что эстроген ослабляет ишемическое окислительное повреждение посредством , опосредованного рецептором эстрогена α-опосредованного ингибирования активации Nox [35]. Следовательно, эстроген играет важную роль в защите сердечно-сосудистой системы от неблагоприятных воздействий, опосредованных АФК.Хроническая гипоксия во время беременности значительно подавляла экспрессию рецептора эстрогена α в маточных артериях из-за повышенного метилирования промотора [16], [36]. Таким образом, подавление эстрогеном экспрессии и / или активности Nox в маточных артериях, вероятно, будет устранено хронической гипоксией, что приведет к усилению генерации ROS.

    В настоящем исследовании мы обнаружили, что хроническая гипоксия значительно увеличивает экспрессию белка Nox2 (gp91 phox ) в маточных артериях беременных животных.Было показано, что для активации Nox2 требуется сборка по крайней мере пяти дополнительных компонентов [37]. Эти дополнительные белки включают мембраносвязанный p22 phox , который помогает стабилизировать белки Nox и цитозольные белки p47 phox , p67 phox , небольшой GTP ase Rac и p40 phox , которые вместе модулируют и приводят к активации фермента Nox. Недавние исследования показали, что острая гипоксия значительно увеличивает активность Nox и транслокацию белка p47 phox к плазматической мембране легочных артерий.Кроме того, делеция гена p47 phox ослабляла индуцированную гипоксией активацию Nox и продукцию АФК в легочных артериях [38]. Эти данные свидетельствуют о том, что субъединицы, ассоциированные с Nox, могут играть важную роль в продукции АФК, опосредованной гипоксией. Необходимы дальнейшие исследования для дальнейшего изучения взаимодействия между этими белками, связанными с Nox, и их роли в выработке АФК, вызванной хронической гипоксией, и повышении тонуса сосудов матки.

    В соответствии с предыдущими исследованиями [7], [29], настоящее исследование продемонстрировало ослабление индуцированного давлением миогенного тонуса маточных артерий во время беременности.Механизмы опосредованного беременностью снижения миогенного тонуса матки до конца не изучены. Миогенный тонус является внутренним свойством гладкой мускулатуры и не зависит от нервных, метаболических и эндотелиальных влияний. Тем не менее, миогенный тонус может быть изменен различными физиологическими и патологическими факторами. Наше предыдущее исследование показало, что стероидные гормоны и восходящие сигнальные пути, связанные с гормонами во время беременности, играют ключевую роль в ослаблении миогенного тонуса маточной артерии [29].Настоящее открытие, что ингибирование генерации АФК не изменяет индуцированную давлением миогенную реактивность маточных артерий как у небеременных, так и у беременных овец нормоксичных животных (данные не показаны), предполагает, что базальные уровни АФК могут не вносить вклад в регуляцию тонуса сосудов матки при физиологических условиях. условия. Однако повышенные уровни АФК приводили к сосудистым осложнениям при сахарном диабете, а ингибирование продукции АФК обращало вспять повышенный миогенный тонус диабетической церебральной артерии [39], предполагая, что повышение АФК может способствовать изменению миогенного тонуса сосудов при патофизиологических условиях.Это мнение было подтверждено нашими выводами о том, что ингибирование генерации АФК привело к ослаблению индуцированного давлением миогенного тонуса маточных артерий у беременных животных, акклиматизировавшихся к длительной высотной гипоксии. Обнаружение того, что ингибирование АФК устраняет разницу в миогенном тонусе маточных артерий между нормоксическими и гипоксическими беременными животными, предполагает основную причинную роль увеличения продукции АФК в повышенном миогенном тонусе маточных артерий в ответ на хроническую гипоксию.

    Дополнительные доказательства получены из открытия, что ингибирование продукции ROS и / или удаление ROS устраняет индуцированную гипоксией повышающую регуляцию PKC-опосредованного миогенного сужения маточных артерий у беременных животных. Предыдущие исследования продемонстрировали, что подавление PKC значительно способствует снижению миогенного тонуса маточных артерий во время беременности, что отменяется хронической гипоксией [7], [15], [16], [29]. Настоящее открытие, что усиленная миогенная вазоконстрикция матки, вызванная активацией PKC у гипоксических беременных животных, была устранена с помощью ингибитора Nox апоцинина или миметика SOD, усиливает представление о том, что гипоксия-опосредованная продукция ROS является причиной повышенной миогенной реактивности маточных артерий. у беременных животных.

    Возможный механизм индуцированного ROS увеличения миогенной реактивности маточной артерии — через подавление активности канала BK Ca . Каналы BK Ca играют ключевую роль в регуляции миогенного тонуса маточных артерий во время беременности, а также в ответ на хроническую гипоксию [8], [14]. Хроническая гипоксия во время беременности избирательно нарушала активность канала BK Ca в маточных артериях беременных животных [14]. Настоящее исследование продемонстрировало, что ингибирование АФК апоцинином обращает вспять вызванное хронической гипоксией подавление активности канала BK Ca в маточных артериях беременных животных, обеспечивая механическую связь канала BK Ca между повышенным окислительным стрессом и повышенным миогенным воздействием. тонус маточных артерий беременных животных, акклиматизированных к длительной высотной гипоксии.Ингибирование активности канала BK Ca с помощью ROS также наблюдалось в рекомбинантных экспрессирующих системах, гладкомышечных клетках сосудов и эндотелиальных клетках [40] — [44]. АФК, вероятно, оказывают свое ингибирующее действие на каналы Ca BK , воздействуя на остаток цистеина около чаши Ca 2+ α-субъединицы канала Ca BK , чтобы изменить восприятие Ca 2+ [43].

    Перспективы

    Хроническая гипоксия во время беременности увеличивает частоту преэклампсии и задержки внутриутробного развития плода из-за дезадаптации маточно-плацентарного кровообращения.Однако механизмы, лежащие в основе этих эффектов, остаются плохо изученными. Повышенный окислительный стресс связан с множеством патофизиологических состояний, включая преэклампсию. Настоящее исследование демонстрирует, что хроническая гипоксия во время беременности стимулирует экспрессию Nox2 в маточных артериях, что приводит к увеличению продукции ROS, что, в свою очередь, приводит к подавлению активности канала Ca BK и повышению миогенного тонуса маточных артерий. Таким образом, настоящее открытие обеспечивает механистическое понимание повышенного окислительного стресса при дезадаптации маточно-плацентарного кровообращения, связанного с хронической гипоксией во время беременности, и может пролить свет на причинный фактор в патофизиологии преэклампсии.

    Вклад авторов

    Задумал и спроектировал эксперименты: DX X-QH LZ. Проведены эксперименты: DX X-QH XH JZ. Проанализированы данные: DX X-QH XH JZ LZ. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты для анализа: DX SY SMW LZ. Написал статью: DX X-QH SY LZ.

    Список литературы

    1. 1. Meyer MC, Brayden JE, McLaughlin MK (1993) Характеристики гладких мышц сосудов в кровообращении материнского сопротивления во время беременности у крыс. Am J Obstet Gynecol.169: 1510–1516.
    2. 2. Kublickiene KR, Cockell AP, Nisell H, Poston L (1997) Роль оксида азота в регуляции сосудистого тонуса в находящихся под давлением и перфузируемых резистентных миометриальных артериях у доношенных беременных женщин. Am J Obstet Gynecol. 177: 1263–1269.
    3. 3. Kublickiene KR, Kublickas M, Lindblom B, Lunell NO, Nisell H (1997) Сравнение миогенных и эндотелиальных свойств сосудов сопротивления миометрия и сальника на поздних сроках беременности. Am J Obstet Gynecol.176: 560–566.
    4. 4. Meyer MC, Osol G, McLaughlin M (1997) Flow снижает миогенную реактивность брыжеечных артерий беременных крыс. J Soc Gynecol Investig. 4: 293–297.
    5. 5. Gandley RE, Conrad KP, McLaughlin MK (2001) Эндотелин и оксид азота опосредуют снижение миогенной реактивности мелких почечных артерий беременных крыс. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 280: R1–7.
    6. 6. Veerareddy S, Cooke CL, Baker PN, Davidge ST (2002) Сосудистая адаптация к беременности у мышей: влияние на миогенный тонус.Am J Physiol Heart Circ Physiol. 283: h3226–2233.
    7. 7. Xiao D, Buchholz JN, Zhang L (2006) Беременность снижает сосудистый тонус, зависящий от давления маточной артерии: роль пути PKC / ERK. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 290: h3337–2343.
    8. 8. Ху XQ, Сяо Д., Чжу Р., Хуанг Х, Ян С. и др. (2011) Беременность активизирует активность канала K + , активированного Ca 2+ с большой проводимостью, и снижает миогенный тонус в маточных артериях. Гипертония.58: 1132–1139.
    9. 9. Rosenfeld CR, Cornfield DN, Roy T (2001) Ca 2+ -активированные каналы K + модулируют базальное и E2beta-индуцированное повышение маточного кровотока при беременности овец. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 281: h522 – h531.
    10. 10. Rosenfeld CR, Liu XT, DeSpain K (2009) Беременность изменяет активированный Ca 2+ канал K + с большой проводимостью и cGMP-зависимый сигнальный путь в гладких мышцах сосудов матки.Am J Physiol Heart Circ Physiol. 296: h2878 – h2887.
    11. 11. Замудио С., Палмер С.К., Дамс Т.Э., Берман Дж.С., Янг Д.А. и др. (1995) Изменения маточно-плацентарного кровотока предшествуют гипертензии при преэклампсии на большой высоте. J Appl Physiol. 79: 15–22.
    12. 12. Палмер С.К., Мур Л.Г., Янг Д., Креггер Б., Берман Дж. С. и др. (1999) Измененный курс артериального давления во время нормальной беременности и усиление преэклампсии на большой высоте (3100 метров) в Колорадо. Am J Obstet Gynecol.180: 1161–1168.
    13. 13. Keyes LE, Armaza JF, Niermeyer S, Vargas E, Young DA и др. (2003) Ограничение внутриутробного развития, преэклампсия и внутриутробная смертность на большой высоте в Боливии. Pediatr Res. 54: 20–25.
    14. 14. Ху XQ, Сяо Д., Чжу Р., Хуанг Х, Ян С. и др. (2012) Хроническая гипоксия подавляет вызванную беременностью повышающую регуляцию активности Са2 + -канала с высокой проводимостью в маточных артериях. Гипертония. 60: 214–222.
    15. 15.Chang K, Xiao D, Huang X, Longo LD, Zhang L (2009) Хроническая гипоксия увеличивает зависимый от давления миогенный тонус маточной артерии у беременных овец: роль пути ERK / PKC. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 296: h2840–1849.
    16. 16. Чанг К., Сяо Д., Хуанг Х, Сюэ З., Ян С. и др. (2010) Хроническая гипоксия ингибирует опосредованное половыми стероидными гормонами ослабление миогенного тонуса маточных артерий овцы во время беременности. Гипертония. 56: 750–757.
    17. 17. Xiao D, Huang X, Zhang L (2012) Хроническая гипоксия по-разному регулирует опосредованное протеинкиназой C сокращение маточной артерии овцы посредством передачи сигналов полимеризации актина во время беременности.Биол Репрод. 87: 142.
    18. 18. Buetler TM, Krauskopf A, Ruegg UT (2004) Роль супероксида как сигнальной молекулы. Новости Physiol Sci. 19: 120–123.
    19. 19. Fike CD, Slaughter JC, Kaplowitz MR, Zhang Y, Aschner JL (2008) Активные формы кислорода из надфоксидазы вносят вклад в измененные реакции легочных сосудов у поросят с хронической гипоксией, вызванной легочной гипертензией. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 295: L881–888.
    20. 20. Matsubara K, Matsubara Y, Hyodo S, Katayama T, Ito M (2010) Роль оксида азота и активных форм кислорода в патогенезе преэклампсии.J Obstet Gynaecol Res. 36: 239–247.
    21. 21. Hoffmann DS, Weydert CJ, Lazartigues E, Kutschke WJ, Kienzle MF и др. (2008) Chronic tempol предотвращает гипертензию, протеинурию и плохие фетоплацентарные исходы в модели преэклампсии на мышах с ДГПЖ / 5. Гипертония. 51: 1058–1065.
    22. 22. Marshall C, Mamary AJ, Verhoeven AJ, Marshall BE (1996) НАДФН-оксидаза легочной артерии активируется при гипоксической вазоконстрикции легких. Am J Respir Cell Mol Biol. 15: 633–644.
    23. 23. Rathore R, Zheng YM, Niu CF, Liu QH, Korde A, et al. (2008) Гипоксия активирует надфоксидазу для увеличения [ROS] i и [Ca 2+ ] i через митохондриальную сигнальную ось ROS-PKCε в гладкомышечных клетках легочной артерии. Free Radic Biol Med. 45: 1223–1231.
    24. 24. Rathore R, Zheng YM, Li XQ, Wang QS, Liu QH и др. (2006) Митохондриальная сигнальная ось ros-pkcepsilon однозначно участвует в гипоксическом повышении [Ca 2+ ] и в гладкомышечных клетках легочной артерии.Biochem Biophys Res Commun. 351: 784–790.
    25. 25. Thomas HM 3rd, Carson RC, Fried ED, Novitch RS (1991) Ингибирование гипоксической вазоконстрикции легких дифенилениодонием. Biochem Pharmacol. 42: R9–12.
    26. 26. Xiao D, Huang X, Yang S, Zhang L (2011) Антенатальный никотин вызывает повышенный окислительный стресс и сосудистую дисфункцию у потомства крыс. Br J Pharmacol. 164: 1400–1409.
    27. 27. Xiong F, Xiao D, Zhang L (2012) Норэпинефрин вызывает эпигенетическую репрессию гена PKCε в сердцах грызунов, активируя Nox1-зависимую продукцию активных форм кислорода.FASEB J. 26: 2753–2763.
    28. 28. Patterson AJ, Xiao D, Xiong F, Dixon B, Zhang L (2012) Окислительный стресс, вызванный гипоксией, опосредует эпигенетическую репрессию гена PKCε в сердцах плодов крыс. Cardiovasc Res. 93: 302–310.
    29. 29. Xiao D, Huang X, Yang S, Zhang L (2009) Прямой хронический эффект стероидных гормонов в ослаблении миогенного тонуса маточной артерии: роль протеинкиназы C / киназы 1/2, регулируемой внеклеточными сигналами. Гипертония. 54: 352–358.
    30. 30.Лоди Ф., Коголлудо А., Дуарте Дж., Морено Л., Ковьелло А. и др. (2006) Повышенная активность НАДФН-оксидазы опосредована спонтанным тонусом аорты у крыс с генетической гипертензией. Eur J Pharmacol. 544: 97–103.
    31. 31. Лю JQ, Zelko IN, Erbynn EM, Sham JS, Folz RJ (2006) Гипоксическая легочная гипертензия: роль супероксида и NADPH-оксидазы (gp91phox). Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 290: L2–10.
    32. 32. Деннис К.Е., Ашнер Дж. Л., Милатович Д., Шмидт Дж. В., Ашнер М. и др.(2009) Надфоксидазы и активные формы кислорода на разных стадиях хронической гипоксии-индуцированной легочной гипертензии у новорожденных поросят. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 297: L596–607.
    33. 33. Wagner AH, Schroeter MR, Hecker M (2001) 17β-эстрадиол, ингибирующий экспрессию НАДФН-оксидазы в эндотелиальных клетках человека. FASEB J. 15: 2121–2130.
    34. 34. Zhang L, Fujii S, Kosaka H (2007) Влияние эстрогена на производство активных форм кислорода в аорте овариэктомированных крыс, чувствительных к соли dahl.J Hypertens. 25: 407–414.
    35. 35. Чжан К.Г., Раз Л., Ван Р., Хан Д., Де Севилья Л. и др. (2009) Эстроген ослабляет ишемическое окислительное повреждение через α-опосредованное ингибирование активации надфоксидазы рецептором эстрогена. J Neurosci. 29: 13823–13836.
    36. 36. Dasgupta C, Chen M, Zhang H, Yang S, Zhang L (2012) Хроническая гипоксия во время беременности вызывает эпигенетическую репрессию гена рецептора эстрогена-α в маточных артериях овцы за счет повышенного метилирования промотора.Гипертония. 60: 697–704.
    37. 37. Бедард К., Краузе К.Х. (2007) Семейство NOX производящих АФК НАДФН-оксидаз: физиология и патофизиология. Physiol Rev 87: 245–313.
    38. 38. Rathore R, Zheng YM, Niu CF, Liu QH, Korde A, et al. (2008) Гипоксия активирует НАДФН-оксидазу для увеличения [ROS] i и [Ca2 +] i через митохондриальную сигнальную ось ROS-PKCepsilon в гладкомышечных клетках легочной артерии. Free Radic Biol Med. 45: 1223–31.
    39. 39. Dong L, Xie MJ, Zhang P, Ji LL, Liu WC, et al.(2009) Ротенон частично устраняет сниженные токи BK Ca в гладкомышечных клетках церебральных артерий у мышей с индуцированным стрептозотоцином диабетом. Clin Exp Pharmacol Physiol. 36: e57–64.
    40. 40. Лю Й., Терата К., Чай К., Ли Х., Клейнман Л.Х. и др. (2002) Пероксинитрит подавляет активность активированного Ca 2+ канала K + в гладких мышцах коронарных артериол человека. Circ Res. 91: 1070–1076.
    41. 41. Soto MA, Gonzalez C, Lissi E, Vergara C, Latorre R (2002) Ca 2+ -активированное ингибирование канала K + реактивными формами кислорода.Am J Physiol Cell Physiol. 282: C461–471.
    42. 42. Бракмайер С., Эйхлер И., Кнорр А., Фашебер Т., Колер Р. и др. (2003) Модуляция активированного Ca 2+ канала K + в эндотелии почечной артерии in situ оксидом азота и активными формами кислорода. Kidney Int. 64: 199–207.
    43. 43. Tang XD, Garcia ML, Heinemann SH, Hoshi T (2004) Реактивные формы кислорода нарушают функцию канала slo1 BK, изменяя опосредованное цистеином восприятие кальция. Nat Struct Mol Biol.11: 171–178.
    44. 44. Lu T, He T, Katusic ZS, Lee HC (2006) Молекулярные механизмы, опосредующие ингибирование Ca 2+ -активированных каналов K + человека с высокой проводимостью высоким уровнем глюкозы. Circ Res. 99: 607–616.

    Медицинские термины и определения во время беременности и родов

    Как и во всех областях медицины, беременность и роды имеют ряд специализированных терминов, многие из которых вы услышите во время своей беременности и родов, а также при рождении ребенка.В следующем списке приведены определения некоторых наиболее распространенных терминов.

    аборт — прерывание (прерывание) беременности. Это может быть достигнуто либо хирургическим вмешательством, либо приемом комбинации прописанных лекарств (медикаментозный аборт)

    амниотическая жидкость — жидкость, окружающая ребенка в матке (также называемая «водами»)

    амниотический мешок — мешок вокруг ребенка внутри матки

    анестетик — лекарство, вызывающее полную или частичную потерю чувствительности части или всего тела

    анестезиолог — врач, специализирующийся на введении анестетика

    дородовое — термин, означающий «до родов» (альтернативные термины «пренатальный» и «дородовой»)

    дородовое кровотечение — кровотечение из влагалища во время беременности

    Оценка по шкале Апгар — тест, проведенный через минуту после родов. ребенок рождается, затем снова через пять минут, который оценивает внешний вид ребенка , (цвет кожи), p ulse, g rimace (отраженный x), активности (мышечный тонус) и эспирация.Идеальный балл по шкале Апгар — 10; типичные оценки по шкале Апгар — семь, восемь или девять. Оценка ниже семи означает, что ребенку может потребоваться помощь в дыхании.

    Вспомогательные репродуктивные технологии — любая процедура, выполняемая для достижения беременности

    baby blues — легкая депрессия после родов; обычно результат гормональных колебаний

    родовой канал — канал (состоящий из шейки матки и влагалища), через который проходит ребенок во время родов

    план родов — письменный документ, описывающий предпочтения женщины в отношении ухода за ней во время родов и рождение

    переливание крови — процедура, при которой женщине дают кровь

    схватки Брэкстона-Хикса — сжатие матки (матки), которое может ощущаться как схватка.Схватки Брэкстона-Хикса безболезненны и не становятся сильнее и ближе друг к другу, как настоящие схватки (также называемые «ложные роды»)

    разрыв воды — когда практикующий врач разрывает мешок с околоплодными водами с помощью остроконечного инструмента. кончик. Часто используется для ускорения родов, которые замедлились. доставляется через разрез в брюшной полости и матке (также называемый кесаревым сечением)

    шейка матки — узкий нижний конец матки, который смягчается и открывается во время родов, чтобы позволить ребенку выйти наружу

    зачатие — процесс зачатия, когда сперматозоид и яйцеклетка соединяются в единую клетку (альтернативные термины включают «оплодотворение», «оплодотворение» и «осеменение»)

    сокращение — часто сильное и болезненное сжатие матки во время родов, вызывающих расширение шейки матки и помогающих протолкнуть ребенка через родовые пути

    венчающий — время во время родов, когда голова ребенка достигла наружного влагалища внутреннее отверстие и видно снаружи

    дилатация — отверстие шейки матки, измеряемое как диаметр шейки матки в сантиметрах

    внематочная беременность — когда оплодотворенная яйцеклетка имплантируется и растет за пределами матки, обычно в маточной трубе.В большинстве случаев внематочная беременность нежизнеспособна.

    эмбрион — название, данное оплодотворенной яйцеклетке с момента зачатия до восьмой недели

    эпидуральная анестезия — тип анестетика, обычно применяемый в родах, где лекарства используются для обезболивания нижней половины тела

    фаллопиевы трубы — узкие протоки или трубы в брюшной полости женщины, по которым яйцеклетка проходит от яичников к матке. Здесь чаще всего происходит оплодотворение.

    ложные роды — см. «Схватки Брэкстона-Хикса»

    фертильность — возможность зачать и выносить ребенка до конца беременности

    лечение бесплодия — лечение который помогает женщине забеременеть

    разрыв первой степени — разрыв, затрагивающий только кожу промежности (рядом с входом во влагалище), который возникает во время родов и не всегда требует наложения швов

    первый триместр — первые 14 недель беременности

    фолиевая кислота — витамин B, содержащийся в зеленых листовых овощах, который помогает предотвратить анемию и снижает частоту некоторых врожденных дефектов, включая расщелину позвоночника (см. определение ниже)

    родничков — шесть мягких мест на голове ребенка, которые позволяют его черепу сжиматься во время родов, чтобы он мог пройти через родовую канаву л.Роднички полностью срастаются к тому времени, когда ребенку исполняется два года

    щипцы — инструменты в форме язычка, помещаемые вокруг головы ребенка, чтобы помочь ему перемещаться по родовым путям во время родов

    полный срок — когда беременность наступила. нормальная продолжительность (37–42 недели беременности)

    гестация — продолжительность (в днях или неделях), в течение которой ребенок находится в матке

    гестационный диабет — состояние, которое развивается во время беременности, когда уровень сахара в крови женщины уровни становятся слишком высокими из-за недостаточного уровня инсулина.Состояние поддается лечению и обычно исчезает после беременности

    гинеколог — врач, прошедший специальную подготовку по вопросам женского здоровья

    кровотечение — сильное кровотечение

    домашние роды — роды и роды, которые происходят дома, в условиях наблюдение акушерки

    иммунизация — введение вакцины, часто путем инъекции, которая делает организм устойчивым к определенным бактериям или вирусам

    внутриутробно — термин, означающий «внутри матки»

    экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) — процесс, используемый для зачатия ребенка вне тела, при котором женские яйцеклетки оплодотворяются мужской спермой, а затем помещаются в матку женщины

    недержание мочи — неспособность контролировать свой мочевой пузырь или дефекацию

    индуцированный — когда медицинский работник пытается искусственно «запустить» женщину роды

    желтуха — заболевание, при котором кожа человека и белки его глаз приобретают желтоватый оттенок.Это вызвано избытком в крови химического вещества, называемого билирубином, и у новорожденных часто разрешается само собой

    половые губы — лоскуты кожи вокруг влагалища женщины

    роды — процесс, через который проходит тело женщины, когда ее ребенок родился

    консультант по грудному вскармливанию — медицинский работник, обученный предоставлять информацию и поддержку в отношении грудного вскармливания

    низкий вес при рождении — когда ребенок при рождении весит менее 2500 граммов

    медсестра по охране здоровья матери и ребенка — a квалифицированная медсестра, которая специализируется на здоровье и развитии детей от рождения до школьного возраста.

    меконий — смолистое вещество, которое ребенок передается в качестве первого помета.Передача мекония до родов может быть признаком дистресса плода

    акушерка — человек, специально обученный уходу за женщинами во время беременности, родов, родов и в послеродовой период

    модель ухода — способ организована охрана материнства

    утреннее недомогание — тошнота, рвота и отвращение к определенным продуктам и запахам, которые в той или иной степени затрагивают большинство беременных женщин. Утреннее недомогание может возникнуть в любое время дня, обычно начинается на сроке от четырех до восьми недель и обычно проходит к 16 неделе беременности

    многоплодная беременность — когда женщина вынашивает более одного ребенка

    естественные роды — роды без каких-либо вмешательств, например естественные роды, а не кесарево сечение

    неонатальный период — время от рождения ребенка до четырехнедельного возраста

    отделение интенсивной терапии новорожденных (NICU) — отделение в больнице для младенцы, нуждающиеся в особом медицинском уходе высокого уровня

    новорожденный — новорожденный в возрасте до четырех недель

    новорожденный — ребенок в возрасте от рождения до четырех недель

    детская — комната в больница, где младенцы могут оставаться днем ​​или ночью

    акушер — врач, прошедший специальную подготовку по вопросам беременности и родовb irth

    яичников — женские репродуктивные органы, которые выпускают яйцеклетки в маточные трубы, где они могут быть оплодотворены, если присутствует сперма

    овуляция — ежемесячный выпуск зрелой яйцеклетки из яичника.Женщина наиболее плодовита в период овуляции

    яйцеклетка — человеческое яйцо

    педиатр — врач, прошедший специальную подготовку по лечению детей

    упражнения для тазового дна — упражнения, которые женщина может выполнять для укрепления мышцы влагалища и вокруг него

    гематома промежности — скопление крови, напоминающее синяк, в области между влагалищем и анусом

    промежность — область между влагалищем и анусом

    плацента — орган, который соединяется со стенкой матки и питает ребенка через пуповину

    послеродовой — термин, означающий «после рождения» (альтернативные термины «послеродовой» и «послеродовой»)

    послеродовая депрессия — состояние, которое поражает некоторых матерей в дни, недели или месяцы после родов

    послеродовое кровотечение 9 0618 — когда женщина теряет более 500 мл крови после рождения

    недоношенных — когда ребенок рождается до 37 недель беременности

    пренатальный — термин, означающий «до рождения» (альтернативные термины «дородовой» и ‘antepartum’)

    разрыв второй степени — разрыв промежности, затрагивающий и кожу, и мышцы, но не задний проход.Разрыв второй степени часто требует наложения швов

    Второй период родов — время от полного раскрытия шейки матки (10 см) до родов

    второй триместр — время от 14 до 26 недель беременности

    Детский сад особого ухода (SCN) — отделение в больнице для младенцев, нуждающихся в особой медицинской помощи

    spina bifida — врожденный дефект, который возникает в течение первого месяца беременности, когда позвоночник ребенка не полностью закрывается, оставляя часть спинного мозга обнажена.Расщелина позвоночника не поддается лечению, но доступен ряд методов лечения и лечения. до рождения

    растяжки — обесцвеченные полосатые узоры, которые могут появиться на животе, груди, ягодицах или ногах во время беременности из-за растяжения кожи. Обычно они медленно исчезают после родов

    Аппарат TENS — аппарат для «трансэлектрической стимуляции нервов», используемый для снятия боли во время родов

    прерывание беременности — см. «Аборт» выше

    театр — операционная в больнице или другом медицинском учреждении

    разрыв третьей или четвертой степени — серьезный разрыв промежности, затрагивающий кожу, мышцы и задний проход.Для заживления этих разрывов используются швы

    Третий период родов — время от рождения ребенка до рождения плаценты

    третий триместр — время начиная с 26 недель беременности

    триместр — промежуток времени в три месяца во время беременности, каждый из которых отмечен разными фазами развития плода

    УЗИ — сканирование матки (матки) женщины и ребенка во время беременности пуповина — пуповина, соединяющая ребенка с маткой плацента, позволяющая переносить питательные вещества (витамины и минералы) и кислород от женщины к ее ребенку

    матка — матка женщины

    вакуумный колпачок или вентхаус — присоска, которая иногда используется во время родов, чтобы помочь вытащить ребенка из родовых путей

    VBAC (вагинальные роды после кесарева сечения) — когда женщина рожает через естественные родовые пути после одного или нескольких предыдущих родов.

    Разное

    Leave a Comment

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *