Причины зрр: Задержка речевого развития у детей

Причины и проявления задержки речевого развития

01 апр. 2019 г., 15:20

В последние годы отмечается тенденция к увеличению количества детей с задержкой речевого развития (ЗРР) — отставанием от возрастной нормы речевого развития в возрасте до четырёх лет. Логопеды, дефектологи, психологи и неврологи бьют тревогу по поводу недоразвития речи, поскольку от неё зависит общее психологическое развитие ребёнка и формирование сферы межличностного взаимодействия. Также от развития речи зависит и развитие познавательных процессов у ребенка: памяти, мышления, воображения, внимания.

 

Что считается речью? Рамки, которые учитываются нормами развития, достаточно гибкие. Если малыш в год говорит не 10 слов, а семь, то тревогу бить не стоит. Колебания в сторону чуть раньше или чуть позже допустимы в пределах двух–трёх месяцев. Причём для мальчиков возможно отставание от девочек на четыре–пять месяцев. До возраста двух с половиной лет допустимо, если ребёнок говорит «малышковым языком». Словами считаются не только полноценные «мама» и «папа», но и «би-би» вместо «машина», «кар-кар» вместо «ворона» и «куп-куп» вместо «идём купаться». Ребёнок может придумывать собственные обозначения предметам. Если ребёнок упорно называет макароны «камани» — это тоже слово. Допустимо, чтобы одно и то же сочетание звуков использовалось для обозначения разных предметов («ки» — киска, носки, кинуть). Но если ребёнок в два с половиной года не пытается говорить фразами из трёх–четырёх слов вроде «мама дё куп-куп» (мама идёт купаться), то надо однозначно обращаться за помощью к специалистам. У большинства малышей речь вообще отсутствует (ребёнок мычит, использует невербальные способы общения — жесты и интонацию), некоторые дети употребляют отдельные слова, имеющие усечённое, искажённое строение, слова-заменители или лепетные слова, но объём их значительно ниже возрастной нормы. Дети не пытаются повторять слова за взрослым, не проявляют интереса к чужой речи. Попадая в детский сад, некоторые из них начинают ощущать свою беспомощность, переживают от того, что их никто не понимает, замыкаются и перестают разговаривать.

Развитие речи у детей очень сложный и индивидуальный процесс, который зависит от многих факторов. Речь ребёнка формируется под влиянием речи взрослых и в огромной степени зависит от достаточной речевой практики, нормального речевого окружения, от воспитания и обучения, которые начинаются с первых дней его жизни. Увеличение количества детей с ЗРР среди малышей, воспитывающихся в семьях и не ограниченных в общении со взрослыми, вызывает тревогу. Часто различные психические травмы (испуг, переживания в связи с разлукой с близкими, длительная психотравмирующая ситуация в семье и т. д.) задерживают развитие речи. Также оказывают неблагоприятное воздействие на развитие речи ребенка: общая физическая слабость, незрелость, обусловленная недоношенностью или внутриутробной патологией, заболевания внутренних органов, рахит, нарушение обмена веществ.

Таким образом, любое общее или нервно-психическое заболевание ребёнка первых трёх лет жизни обычно сопровождается нарушениями речевого развития. Для своевременного решения данной проблемы необходимо обратиться к логопеду невропатологу и детскому психологу. Специалисты помогут определить причину ЗРР, порекомендуют целенаправленные коррекционно-развивающие занятия на фоне проведения (по необходимости) медикаментозной терапии.

 

 

А.В. Филатова, логопед отделения

       помощи семье и детям ГКУСО МО СРЦН «Теремок»

Источник: http://inivanteevka.ru/novosti/materinstvo-i-detstvo/prichiny-i-proyavleniya-zaderzhki-rechevogo-razvitiya

Задержка речевого развития (ЗРР)

Задержка речевого развития (ЗРР) – позднее овладение устной речью детьми до трех лет по сравнению с возрастной нормой.

Задержка речевого развития характеризуется несформированностью самостоятельной речи, скудностью словарного запаса, отсутствием у ребенка способности говорить фразами к 2 годам и отсутствием связной речи к 3 годам.

Лечение данной патологии достаточно сложная задача, к которой необходим комплексный подход нескольких специалистов: невролога, психолога, логопеда и остеопата.

Когда нужен остеопат?

Остеопат необходим, если причиной задержки речевого развития является нарушение нормального строения черепа в результате черепно-мозговых травм малыша во время беременности, родов, травм головы в первые годы жизни. При этом смещаются кости черепа относительно друг друга.

Далее возникают такие проблемы, как:

  • недоразвитие верхней челюсти, из-за чего уменьшается свободное пространство в полости рта и язык смещается назад;
  • чрезмерное давление в области височных костей;
  • раскоординированная работа мышц, соединяющих мягкое нёбо с носоглоткой;
  • ограничение подвижности подъязычной кости из-за перенапряжения мышц горла;
  • короткая уздечка языка ;
  • нарушение иннервации языка.
Диагностика задержки речевого развития у остеопата 

Остеопат во время осмотра ребенка определяет поврежденные области и воздействует на них, возвращая их в правильное положение. Зачастую травмируются 1-2 шейный позвонок, шейно-грудной отдел позвоночника, затылочно-височные швы, внутрикостные повреждения самой затылочной кости, основной шов в черепе.

Лечение задержки речевого развития (ЗРР)

Лечение проводится при помощи деликатного физического воздействия на проблемные зоны в виде мягкого массажа. Помимо восстановления правильного положения смещенных черепных костей и нормализации тонуса мышц головы и шеи, улучшается кровоснабжение мозга. К нейронам начинает поступать должное количество кислорода и других питательных веществ. В результате нормализуются все функции головного мозга, в том числе и речь. Важно начинать лечение как можно раньше, поскольку с возрастом задержка речевого развития у детей только усугубляется и сложнее поддается терапии.

Если вас беспокоит развитие речи у ребенка, запишитесь на консультацию к нашему остеопату.

Записаться

7 причин задержки речевого развития ребёнка

Модель, которую транслирует мама: «Мир враждебен, он несет проблему». Подсознательная реакция ребенка: «Я не буду с этим миром общаться». Но это еще не все. Своим сочувствием ребенку после трудной работы родители программируют кроху на то, что там, где его заставляют трудиться, его обижают. Занятия по развитию речи, конечно, пойдут ребенку на пользу, но не в том объеме, в котором хотелось бы взрослым.

Причина №4 — Заниженная самооценка родителей

На диагностике перед курсом «Запуск речи» специалист просит ребенка выполнить задания. Не успевает мальчик обвести карандашом круг, как папа кидается к нему на помощь: «Не так делаешь, надо так». Попытка выполнить следующее задание также проваливается: «Опять не то, разве не видишь? Надо вот так».

Родители с низкой самооценкой (а это именно она!) неумышленно считают, что их собственные способности (не рисовать, конечно, — воспитывать) оцениваются через призму того, насколько хорошо их ребенок умеет справляться с заданием. Они подсознательно сливают в одно целое себя и своего малыша. И несовершенная речь ребенка в представлении таких родителей — не что иное, как проявление «некачественной» работы, прежде всего их собственной. Такие родители все берут на себя: подсказывают, помогают, доделывают. В итоге ребенок перестает развиваться, теряет интерес к познанию, собственному опыту. Сначала оказывается в ситуации неуспеха, потом — безразличия к ней.

Причина № 5 — Психологическое запугивание

Снова диагностика. Скромная, с тихим голосом мама рассказывает специалисту, что четырехлетний мальчик не говорит, заторможенный, стеснительный. В кабинет заходит папа, начинается тестирование, ребенок пытается выполнить первое задание. «Ты что глупый? Не понимаешь?» — реплика отца.

На первый взгляд эти две истории очень похожи — родители не верят в своих детей. Но если в предыдущем случае папой двигало чувство благородное (так ему казалось), то в этом ситуация гораздо хуже. Отец ребенка не только в него не верит, но и утверждается за его счет. Делает это грубо. Ребенок, конечно, имеет право в 4 года многого не понимать, не уметь, не знать. Но при таком подходе он и не захочет ничего ни понимать, ни оспаривать свои права. Его единственное желание — забиться в угол и молча перетерпеть. Ключевое слово — «молча», так как, подав в такой ситуации голос, он только спровоцирует взрослого на еще большую агрессию (которая самим родителем оценивается как проявление досады, не более).

симптомы, причины, лечение и прогноз. Блог Лого-Эксперт

Чтобы понимать, какие признаки можно считать показателями ЗРР, нужно иметь представление о принятых нормах развития речи.

Фактически, первая «речь» малыша – это его плач, когда он только появляется на свет. В этом процессе участвуют главные органы речевого аппарата – голосовые, артикуляционные и дыхательные. Неонатолог уже на этом этапе может определить отклонение от нормы – первый крик должен быть в течение первой минуты жизни ребенка.

Первый год жизни новорожденного – это предречевой период. Он включает в себя несколько этапов:Гуление – появляется в 1,5-2 месяца с рождения.

  • Лепет – появляется в 4-5 месяцев.
  • Лепетные слова – примерно с 8 месяца.
  • Первые слова – появляются в интервале 9 — 12 месяцев. Исследователями доказано, что половая принадлежность ребенка играет роль во времени появления первых слов. Девочки развиваются быстрее, поэтому первые слова у них появляются раньше, чем у мальчиков.

Если ребенок развивался гармонично и правильно, то в норме уже в первый год жизни он сможет произносить порядка десяти слов. Здесь имеется в виду любое осмысленное звукоподражание, либо укороченное слово, которое обозначает действие, предмет или существо. К примеру, «ням» (кушать, еда) и «ма» (мама) уже будут считаться отдельными словами.

С 1 по 2 год жизни у малышей активно накапливается пассивный словарь, который насчитывает порядка 200 слов. Он их понимает, но не все может произнести. Ребенок может указывать на бытовые предметы или животных, понимая, на что именно он показывает. Активный же словарь должен содержать не менее 15-20 слов.

В 2 года у детей появляется фразовая речь, т.е. они могут нормально коммуницировать со взрослыми. У детей в их речи должны присутствовать глаголы («мама дай», «баба ди (иди)»).

После двух лет происходит «лексический взрыв», т.е. ребенок начинает активно формировать предложения, его словарный запас обогащается новыми словами. К трем годам в «арсенале» ребенка уже свыше 1200 слов, при этом происходит обогащение состава речи, т.е. дети начинают использовать практически все части речи (хоть и не всегда верно).

Именно возраст 2-3 года считается пограничным.  Дело в том, что на практике с двухлетнего возраста уже можно говорить о ЗРР. Но в большинстве случаев специалисты ждут появления речи до двух с половиной лет. Объясняется это тем, что многие дети успевают «выровняться» за эти шесть месяцев, но только при условии, что у них нормальное развитие в других сферах и достаточный пассивный словарь. Но если к двум с половиной годам фразовая речь не появилась, то специалист с уверенностью говорит о наличии задержки развития речи.

Задержка речевого развития у детей. Причины, проявления, лечение.

Развитие ребёнка представляет собой непрерывный процесс. С самого рождения идёт формирование новых моторных и речевых навыков и умений. При этом до года этот процесс очень динамичный: уже к 2 месяцам малыш умеет держать головку, в 3 месяца появляется гуление, воркование. К 6-7 месяцам появляется продолжительный лепет, малыш начинает сидеть, к году многие детки начинают ходить самостоятельно и говорить первые слова. В 2,5 года-в речи  много слов, появляются фразы. Уже к 3 годам многие дети умеют говорить сложными предложениями. 

Речевые и языковые навыки являются наиболее сложными функциями и тесно связаны с интеллектуальным развитием. Даже незначительная задержка в речевом развитии может быть показателем задержки психического развития. Дети с расстройствами речи и языковых навыков плохо воспринимают информацию на слух, и в дальнейшем у них часто возникают трудности с обучением в школе.  

У маленьких детей разборчивость речи, словарный запас, построение фразы, понимание речи оцениваются с учётом  их возраста. Это очень непростая задача, и существует множество причин, которые могут привести к задержке речевого и психического развития. 

Одной из главных причин задержки развития речи является патология формирующегося мозга ребёнка. 

Неблагоприятные факторы могут действовать на мозг ребёнка как до рождения, так и после появления его на свет.  

До рождения — это и тяжёлые роды, различные внутриутробные инфекции, врождённые пороки развития, генетическая патология. Обычно такие малыши с рождения растут с задержкой формирования моторных и речевых навыков. Даже когда моторные навыки формируются вовремя, проблемы с речевым развитием могут, в дальнейшем, выходить на первый план.  

После рождения ребёнка к задержке речевого развития могут приводить различные инфекции, травмы головного мозга, генетические нарушения нервной системы (например, наследственные болезни обмена, ранний детский аутизм и т.д.). 

Кроме того, для нормального развития речи очень важно в каких социальных условиях растёт ребёнок, нет ли ограничения его в  общении. Показательно, что дети без патологии мозга, но лишённые полноценного общения в раннем возрасте, например, растущие в детских домах, в асоциальных семьях, предоставленные сами себе, развиваются с задержкой речевого развития.  

При этом при регулярных занятиях, направленных на стимуляцию речи, у детей с поражением нервной системы речь может развиваться в соответствии с возрастом.  

Следует сказать, что все дети с задержкой речевого развития должны проходить проверку слуха. Даже незначительное снижение остроты слуха может приводить к выраженной задержке речи. 

Какие же специалисты должны осмотреть ребёнка с задержкой речевого  развития? Обязательна консультация невролога, генетика, сурдолога, психиатра, логопеда. 

Если при осмотре выявляется патология, то специалистом назначается соответствующее лечение. При этом лечение должно быть последовательным и регулярным, проводиться в условиях стационара или амбулаторно. При любой причине задержки речевого развития обязательно проводятся занятия с логопедом, дефектологом, используются  стимуляции мозга с помощью различных  методик. 

Итак, с самого рождения необходимо обращать внимание на формирование доречевых, а потом и речевых навыков у малыша. Ведь чем раньше выявлена причина задержки речи, тем благоприятнее прогноз психического развития ребёнка. 

 

 

Главный внештатный специалист детский невролог 

управления здравоохранения Липецкой области 

Сундеева Татьяна Васильевна

Почему современные дети всё чаще страдают от задержки речевого развития

Детей с задержкой речевого развития (ЗРР) становится всё больше. Растущая статистика не связана с изменением норм речевого развития. Параметры всё те же. А вот причины того, что дети начинают говорить позже, многообразны.

Об этих причинах и путях реабилитации детей с ЗРР ВашГород.ру в рамках рубрики «Мне только спросить» поговорил с Натальей Юрьевной Оликовой, заведующей детским отделением неврологии и рефлексотерапии, неврологом-эпилептологом кемеровского «Реацентра».

 — ЗРР — это отставание в формировании речи ребенка от общепринятых норм развития речи. Существует две основные предпосылки этой проблемы. Первое — это рост числа патологии беременности и родов. Сейчас медицина шагнула вперёд, специалисты выхаживают даже очень сложных детей, например с глубокой недоношенностью, но потом эти дети требуют, как правило, дополнительной реабилитации — увеличивается количество детей с неврологической патологией. Частые перенесенные детские заболевания, частые ОРВИ, особенно в первые годы жизни, не остаются бесследными для здоровья ребенка, ослабляют иммунитет. Это тоже может стать причиной развития ЗРР.

 Второе — социальные причины, которые просто «кричат»: дети недопустимо много проводят времени с гаджетами.  Даже у детей с хорошим развитием отпадает потребность в общении и в овладевании речью. «Безречевые» дети любят смотреть «безречевые» мультфильмы. А это как раз и не рекомендуется. Должной заменой мультикам должны стать «здоровые» коммуникации с ребенком. В крайнем случае, просмотр мультиков, адаптированных под возраст ребенка, должен быть коротким и с наличем внятных простых диалогов героев как, например, в известном мультфильме «Три кота». И конечно же, важно читать больше детям книжек с демонстрацией картинок, побуждать их отвечать на вопросы при чтении, называть простыми предложениями то, что ребенок видит вокруг, проявлять хорошие яркие эмоции на то, что видит ребенок.

Отмечу, что детей с педагогической запущенностью в нашем центре — единицы. С такими стоит недолго позаниматься, оградить от гаджетов — и проблема решаема. Чаще всего мы встречаемся с наличием изменений, когда обычные развивающие занятия не помогут.

 — На что и в каком возрасте стоит обратить внимание родителям?

— Нормы развития гибкие. По факту, в возрасте одного года, ребенок должен уметь понимать и выполнять простые просьбы — «принеси книжку», «дай игрушку», произносить около 10 слов, к полутора годам начинать говорить простые фразы — «мама, дай».

К 2-3 годам — быстро увеличивается словарный запас и может расшириться до 1000 слов. В речи используются вопросительные предложения: «Куда мама пошла?».

К 3-4 годам словарный запас значительно расширяется. Ребенок может пересказать легкую сказку. Разговаривает предложениями. Много вопросов и рассуждений:  « А зачем?», «А почему?».

Если есть серьезные отклонения от перечисленных норм, то стоит поторопиться за консультацией к неврологу, который в каждом конкретном случае решит, нужны ли дополнительные консультации — психолога, сурдолога, логопеда, психотерапевта или офтальмолога. Назначают и дополнительные методы исследования, такие как  электроэнцефалограмма (ЭЭГ) — для уточнения причин задержки речевого развития.

— Родителей часто успокаивают: «Не переживайте! Еще заговорит — слушать устанете». Прокомментируйте такую ситуацию.

— Комплексной оценкой возможностей ребенка не стоит пренебрегать. Действительно, для кого-то будет достаточно развивающих занятий в детском центре или с родителем дома. Но кому-то требуется помощь специалистов, и лучше начать работу как можно раньше. В более старшем возрасте, по окончании так называемого «сенситивного периода», когда дети впитывают информацию «как губка», помочь гораздо сложнее. Вот почему крайне важно — не опоздать с консультированием. Чем младше ребенок, тем оптимальнее восстановление.

 Стоит обратить особое внимание на случаи, когда ребенок не реагирует на имя, не выполняет просьб, сильно возбудим или агрессивен, гиперактивен или когда  у ребенка нарушен сон. Все это признаки того, что пора бить тревогу — недостаточно хорошо работают не только речевые зоны детского мозга, но и страдают психофизиологические процессы.

 — В каком возрасте речь ребенка должна сформироваться и все звуки встать на свои места?

 — Шипящие, свистящие звуки формируются к 4 годам, «соноры» — к 5 годам. Отклонения допускаются до полугода. Изолированное нарушение звука или группы слов — область компетенции логопеда, который при отсутствии неврологических нарушений у ребенка с этим справится. Когда мы говорим о нарушении звукопоизношений, это необязательно связано с задержкой речевого развития. В «Реацентре» мы, чаще всего, имеем дело с более сложными случаями.

— Всегда ли задержка речевого развития связана с задержкой психического развития?

— Далеко не всегда. Но если речевое развитие будет отставать, то последует и задержка психического развития. В чем это будет проявляться?  Например, ребенок не умеет формулировать свои мысли, не умеет описать картинку, составить рассказ о событиях. Это звоночки в будущее к вопросу об успешном обучении в школе и после. Речь такого ребенка будет бедной, косноязычной. Если у такого ребенка были проблемы при говорении, соответственно у такого ребенка будут те же проблемы при чтении и на письме. Существует вероятность того, что в школьном возрасте разовьется дислексия.

— Какие эффективные методики применяются в вашем центре, которые помогают детям с ЗРР?

— Каждому ребенку в нашем центре составляется индивидуальная схема  по коррекции речи в соотвествии с выявленными нарушениями.

Микротоковая рефлексотерапия (МТРТ) — один из самых прогрессивных методов воздействия на зоны головного мозга. Метод уникален тем, что стимулируются зоны головного мозга. Рекомендовано при последствиях гипоксии,  родовой травмы, полученной ребенком.

Методика безопасна и показана даже при судорожном анамнезе. При лечении исключаются точки, в проекции которых регистрируется эпилептическая активность. Лечение проводится под контролем ЭЭГ. Во время процедуры ребенок может играть игрушками. Детки хорошо переносят такой безболезненный вид лечения.

 Биоаккустическая коррекция головного мозга (БАК) производится «музыкой своего организма», которая преобразовывается из ритмов головного мозга при записи электроэнцефалограммы. Преобоазованный звук воздействует на речевые зоны коры головного мозга и вызывает их активизацию. При легкой ЗРР достаточно 1-2 курсов. У детей с синдромом гиперактивности при такой методике снижается уровень невротизации, малыш становится спокойнее, улучшается сон, появляются новые навыки, ребенок начинает сам кушать, одеваться, самостоятельно ходить в туалет.

Эффективен логопедический массаж для детей с нарушением тонуса артикуляционной мускулатуры (при алалии и дизартрии). По механизму биологически обратной связи идет импульс от артикуляционных зон в кору головного мозга, возникает доминанта в области речевых зон. Это помогает ребенку заговорить. Также высокую эффективность показывают логопедические упражнения с применением вестибулярных пластинок разного типа для улучшения тонуса артикуляционных мышц, коррекции звукопроизношения.

В нашем центре проводятся логопедические занятия с применением устройства Форбрейн (Forbrain), которое представляет собой мини-гарнитуру для костного звукопроведения, оснащенную микрофоном и динамическим фильтром, закрепленным на дужке «электронного» уха. Это уникальное многофункциональное устройство, которое позволяет тренировать аудио-вокальный круг и развивать произвольный контроль речи. Как работает Forbrain: встроенный динамический фильтр корректирует голосовой аппарат и придает ему естественное частотное звучание и модуляцию. При помощи дополнительного вибрирующего устройства собственный «исправленный» голос незамедлительно воздействует на височную долю головного мозга, в результате чего происходит общая речевая коррекция. Голос становится более ритмичным, тембрально богатым, гармоничным, плавным, интонационно окрашенным.

Гарнитура Форбрейн улучшает основные звуки разговорной речи, облегчает их восприятие и способствует реализации правильного общения и говорения.

Комплексный подход включает и классический массаж (улучшающий кровообращение коры головного мозга), тейпирование артикуляционной мускулатуры, рук, диафрагмы (для подтягивания слабых мышц, что улучшает звукопроизношение, воздействуя на проекционные зоны коры головного мозга, отвечающие за зоны речи)

 — В каком возрасте ребенок может проходить у вас реабилитацию?

— От рождения до 18-летнего возраста. Необязательно, что после обращения мы направляем на лечение. Даем квалифицированную оценку ребенку, исходя из которой следуют дальнейшие рекомендации. Могут быть назначены и просто занятия со специалистами-педагогами, которые помогают улучшить речевое развитие ребенка.

Иногда речь удается «запустить» с 1-2 курсов лечения. Но часто нам удаётся помочь и в очень сложных случаях. У нас была пациентка из Красноярского края. Она попала к нам в «Реацентр» в возрасте 4 лет с полным отсутствием речи и яркими аутистическими расстройствами. Сейчас девочке 8 лет, она готовится  пойти в обычный класс обычной школы. Речь восстановилась до возрастной нормы.

Пациенты нашего центра — это не только жители Кузбасса, к нам приезжают дети из многих городов Сибири, а также и других регионов  России и стран СНГ.

Елена Ивановна Зудилова, ведущий логопед «Реацентра» в г. Кемерово:

—  Специалисты склонны видеть причину недоразвития речи в наличии, в том числе, и ММД (минимальной мозговой дисфункции), так как у половины таких детей обнаруживаются клинические симптомы и электроэнцефалографические феномены, свидетельствующие о нарушении работы подкорковых структур мозга. Однако не надо бояться диагноза «ММД». На то они и «минимальные» нарушения, чтобы не мешать нормальному развитию ребенка.

Изучая анамнез детей с задержкой речевого развития, специалисты установили, что к нарушению нормального становления речи у детей могут приводить различные неблагоприятные воздействия в период внутриутробного развития, преждевременные, длительные или стремительные роды, долгий безводный период, родовые травмы, асфиксия плода в родах и даже ранний перевод ребенка на искусственное вскармливание.

Малыши с ЗРР — это, как правило, дети не от первой, а от повторных беременностей, поздние дети или дети из неполных семей, воспитывающиеся в плохой языковой среде, в двуязычных семьях. И хотя отрицательные социальные факторы не оказывают на ребенка патологического влияния непосредственно, они всегда так или иначе, преломляясь в его биологической природе, воздействуют на психическое развитие, тормозя его в большей или меньшей степени.

Существенную роль играет, конечно, и наследственный фактор. Если один из родителей или кто-то из близких родственников страдает косноязычием, то вполне вероятно, что малыш также будет иметь проблемы с речью.

Часто задержка речевого развития бывает связана с задержкой психомоторного или психического развития. Кроха начинает позже, чем другие дети, держать головку, сидеть, ползать, стоять, ходить. Это как раз те симптомы, которые прежде всего должны насторожить взрослых.

Марина Олеговна Куропаткина, дефектолог  «Реацентра» в г. Кемерово:

— Родителям важно знать случаи, при которых необходимо обратиться к специалисту по коррекции задержки речевого развития.

1. Вспомнить, как развивался ребенок в свой первый год.  Ребенок  после 3-х месяцев реагирует на голос мамы, оживляется и улыбается, когда с ним разговаривают. В 5-6  месяцев начинает лепетать.

2. У ребенка есть отставание в двигательном развитии.

3. Ребенок не использует невербальные способы общения (жесты, кивки головой и прочее).

4. 1.5 года нет простых слов, которыми ребенок пользуется по назначению, не знает собственного имени. Не может выполнить простейшие просьбы (иди сюда, сядь). Нет указательного жеста.

5. В 2-3  года  использует лишь несколько отдельных слов и не пытается повторить новые. В  активном словарном запасе менее 20 слов и звукоподражаний. Не выстраивает простейшую фразу из простых и лепетных слов. Плохо концентрируется на игрушках или занятиях долгое время, не знает части тела и окружающие предметы.

7. Трехлетний ребенок говорит так неразборчиво, что даже родители с трудом могут его понять, не говорит простых предложений, не понимает простых рассказов. Говорит слишком быстро, не проговаривая окончаний слов, есть нарушение в согласовании по роду, числу, падежу («чистый окно», «у меня нет кукла» и т. д.), не понимает значение многих слов, не умеет составлять предложения, рассказ по сюжетной картинке.

8. У ребенка любого возраста все время приоткрыт рот или отмечается повышенное слюноотделение без явных на то причин.

Детское отделение неврологии и рефлексотерапии ООО «Реацентр-Кузбасс»

г. Кемерово, улица Дзержинского, 14

8 800 2222 602; 8 (3842) 33-01-03; 33-01-13

Сайт www.reacenter.ru  

Инстаграм @reacenterkemerovo

Лилия Горбунова

Задержка речевого развития Ижевск

Что такое задержка речевого развития у детей и как ее выявить, следует знать каждому родителю. Чем раньше заболевание будет диагностировано, тем успешнее будет лечение и оптимистичнее прогнозы на будущее развитие ребенка. 

Задержка речевого развития (ЗРР) у детей – это отставание в речи от нормы развития детей. При диагнозе ЗРР ребенок может говорить, но по сравнению со сверстниками, у него значительно снижен словарный запас. 

Задержка в развитии речи у детей отражается на формировании психики ребенка. Она затрудняет общение ребенка с окружающими людьми, препятствует правильному формированию познавательных процессов, влияет на формирование и выражение эмоций. 

Диагноз ЗРР ставится на основании комплексного обследования неврологом, логопедом, психологом, психиатром и сурдологом. 

Причины: 

— патологии внутриутробного развития; 

— родовые травмы; 

— повышенное внутричерепное давление у ребенка; 

— дислексия в результате генетической предрасположенности; 

— психические расстройства; — физические травмы; 

— снижение слуха; 

— заболевания головного мозга; 

— недоразвитость мускулов рта и лица. 

Симптомы: 

— младенец молчит и не произносит никаких звуков; 

— годовалый ребенок не реагирует на обращение к нему, а к себе внимание привлекает исключительно плачем или жестами; 

— в возрасте 1,5 лет малыш не распознает на слух предметы, не показывает их на картинке и т.д.; 

— 1,5–2-годовалый ребенок не может свободно выполнять команды взрослого: «открой рот», «возьми ложку» и пр. 

— в 2-3 года малыш не произносит отдельных слов и целых фраз 

Лечение: 

При своевременной диагностике лечение задержки речевого развития при совместных усилиях родителей и лечащего врача заканчивается успешно. Ошибочно считать, что при этом будет достаточно одних только логопедических занятий. Данный специалист может ставить произношение букв и звуков, тогда как коррекция подразумевает комплексный подход лечения у специалистов различного профиля. 

Если у Вашего ребенка наблюдается проблема с задержкой речевого развития или у Вас появились подозрения на наличие данной патологии, рекомендуем консультацию детского невролога – Лазаревой Надежды Игнатьевны.

Поверхностные плазмоны — обзор

В отличие от SPR, LSPR имеет низкую размерность металлов, обычно это Me НЧ. Такие наночастицы также имеют слабосвязанные электроны проводимости на поверхности, которые могут колебаться под воздействием электромагнитного излучения определенной длины волны. Если размер наночастицы (dNP) очень меньше длины распространения волны SPR, то есть δSPP> dNP, волна остается локализованной, чтобы порождать LSPR. LSPR находит широкое применение в биодатчиках, газах, мониторинге окружающей среды и медицине.Также существует множество теоретических работ, раскрывающих влияние размеров наночастиц, диэлектрической проницаемости и показателя преломления окружающей среды.

6.2.1 Теория локализованного поверхностного плазмонного резонанса

LSPR имеет дополнительное ограничение на размер наночастиц. Однако как в SPR, так и в LSPR требуется решить набор уравнений Максвелла с учетом геометрии, формы и воздействия окружающей среды. В начале 19 века Густав Ми [200] решил систему уравнений Максвелла для Ме НЧ диаметром менее 10 нм.Наиболее цитируемым выражением теории Ми для коллоидных наночастиц является

(2.4) σext = 18πεm3 / 2λε2 (λ) [ε1 (λ) + 2εm] 2 + ε2 (λ) 2.

Здесь символы λ, σext, εm, ε1 и ε2 представляют длину волны падающего света, коэффициент экстинкции и диэлектрическую проницаемость металла, воздуха и окружающих диэлектрических материалов соответственно. Соответственно, зависимость диэлектрической проницаемости от длины волны света дается моделью Друде

(2,5) ε2 = 1 − ωp2ω2 + γ.

Здесь ω и ωp обозначают угловую частоту падающей волны и плазмонной волны.Поскольку модель Ми действовала для единственной сферической частицы небольшого размера в 1918 году, Ричард Ганс [201] разработал другую модель для LSPR, которая верна для сфероидной частицы любой формы, и популярное выражение имеет вид

(2.6) σabs = ωπV3c (1 / Pj) 2ε2 (λ) [ε1 (λ) +2 ((1 − Pj) / Pj) εm] 2 + ε2 (λ) 2.

Здесь сумма j учитывает три измерения частицы. P j включает P A , P B и P C , называемые коэффициенты деполяризации, для каждой оси частицы, где A > B = C для вытянутого сфероида.Коэффициенты деполяризации анизотропно изменяют значения ε 1 и ε 2 и результирующие пиковые частоты LSPR.

6.2.2 Биосенсинг с использованием локализованного поверхностного плазмонного резонанса

В отличие от SPR, LSPR использует либо лист Au NPs, либо коллоидный раствор Au NP в качестве зонда обнаружения. На рис. 14.13 тематически показано биосенсирование LSPR, управляемое специфичностью, где иммобилизованные антителами Au NP помещают на твердую стеклянную подложку, которая изменяет сигнал LSPR при добавлении специфического антигена.В большинстве сенсоров LSPR на основе Au NPs на их поверхность прикреплен конкретный биоматериал, такой как фермент, антитело или аптамер. Когда дополнительный аналит с «ключом» присоединяется к «замку» иммобилизованных НЧ Au, реакция LSPR частицы изменяется, что количественно оценивается для измерения. Изменения сигнала LSPR в жидком состоянии широко охарактеризованы с помощью спектроскопии UV-Vis. Здесь стоит отметить, что LSPR Me НЧ зависит от диэлектрических свойств окружающей среды.Таким образом, изменение сигнала LSPR при скоплении биоаналитов позволяет разрабатывать различные сенсорные технологии для безметочного обнаружения биомаркеров.

Рисунок 14.13. Демонстрирует тематическое представление биосенсинга на основе локализованного поверхностного плазмонного резонанса с использованием наночастиц золота.

Например, в пищевой промышленности технология LSPR получила широкое распространение благодаря ее точности измерения и простоте использования. Сообщается, что ряд датчиков на основе LSPR обнаруживает заражение Salmonella typhimurium в свинине или других мясных продуктах, что вызывает риск заболеваний пищевого происхождения у людей [202].Датчики LSPR также были разработаны для распознавания добавления меламина в молоко [203], которое является высокобиотоксичным по своей природе и может вызывать заболевания почек и мочевыделительной системы у человека или животных при попадании внутрь в больших количествах. Биоаккумуляция тяжелых металлов, таких как ртуть [204], в овощах или морепродуктах также была определена с помощью этой технологии обнаружения LSPR, которая при попадании в организм в больших количествах может привести к различным сердечно-сосудистым заболеваниям. Помимо обнаружения жидкой фазы, обнаружение LSPR также исследовалось на гибких бумажных поверхностях [205].Бумага со встроенным датчиком наночастиц способна определять летучие биогенные амины, выделяемые из испорченной пищи. Кроме того, был разработан ряд датчиков для мониторинга изменения показателя преломления, что расширило его применимость к плазмонному зондированию для обнаружения различных патогенов пищевого отравления [206]. Методика LSPR-зондирования также использовалась как инструмент для определения количества борной кислоты [207], которая используется в качестве консервантов или добавок в различных процессах пищевой промышленности, таких как лапша, морепродукты, молочные и мясные продукты, для контроля свежести, цвета, текстуры и т. Д. и аромат.Хорошо известно, что потребление большого количества борной кислоты может привести к диарее, рвоте и болям в животе.

Эффекты LSPR также оказались полезными в сельскохозяйственной отрасли для определения степени использования пестицидов в растениеводстве путем диагностики наличия борной кислоты в почве [207]. Точно так же количество удобрений или тяжелых металлов, используемых в сельскохозяйственной практике, можно определить путем определения уровней свинца, абсорбированного в почве [208]. Хорошо известно, что потребление большого количества этих вредных химикатов с продуктами питания, выращенными на пораженных почвах, приводит к различным сердечно-сосудистым заболеваниям и повреждает иммунную систему человека.Помимо этого, датчик LSPR также был разработан для мониторинга давления роста растений путем обнаружения цис-жасмона [209], который полезен для обнаружения атак травоядных животных. Кроме того, были разработаны эффекты LSPR для определения уровней ртути [204] или токсинов с более низкой молекулярной массой [210] в почве. Кроме того, был разработан ряд протоколов зондирования на основе LSPR для мониторинга условий окружающей среды. Например, датчики LSPR на основе Au NPs были разработаны для определения уровней бисфенола A для мониторинга качества воды [211] и обнаружения различных патогенов для проверки уровней загрязнения воды [212].Различные системы обнаружения следов для проверки загрязнения тяжелыми металлами [204, 213] в почве и водоемах также стали возможными с системами LSPR, не основанными на материалах. Технология LSPR была расширена для проверки и мониторинга загрязнителей воздуха, таких как следы паров терпена [214].

Кроме того, LSPR широко используется в биосенсорных исследованиях для обнаружения множества биомаркеров в нескольких биологических жидкостях организма [215]. Высокочувствительный иммуносенсор без метки был разработан с использованием этого метода LSPR для обнаружения ВИЧ-1 [216], использующего взаимодействие антитело-антиген на Au NP.В том же направлении была разработана доступная и портативная система LSPR для анализа белков в реальном времени [217], таких как иммуноглобулин в образцах крови, контролируемых для выявления аутоиммунного гепатита. Портативный датчик LSPR на основе прозрачной подложки [218] был разработан для определения С-реактивного белка в образцах плазмы крови для проверки здоровья сердечно-сосудистой системы. Техника LSPR также была расширена для биомаркеров рака с биомаркером нуклеиновой кислоты [219]. Система диагностики рака поджелудочной железы [220] с использованием уровня микроРНК в плазме и других жидкостях тела была создана с использованием этой технологии.Эта технология также показала свою полезность для обнаружения болезни Альцгеймера [221, 222]. Биосенсинг на основе LSPR также применялся для мониторинга витаминов [223] и мочевой кислоты [224]. В таблице 14.2 приведены различные методы SPR и LSPR, используемые для обнаружения нескольких биомаркеров.

Таблица 14.2. Приложения для измерения поверхностного плазмонного резонанса и локализованного поверхностного плазмонного резонанса.

Sl. No. Приложение Analyte Методика Ссылки
1. Антифосфолипидный синдром Антикардиолипин из сыворотки крови Поверхностный плазмонный резонанс (SPR) Schlichtiger et al. [225]
2. Брюшной тиф антитела против Salmonella typhi из сыворотки крови SPR Gupta et al. [226]
3. Группа крови Anti-A / B IgM- и IgG-антитела из сыворотки крови SPR Fischer et al.[91]
4. Денге Иммуноглобулин М из сыворотки крови SPR Jahanshahi et al. [227]
5. Диабет Антитела к инсулину SPR Kure et al. [228]
6. Инфекционный гастроэнтерит Фактор роста гепатоцитов из образца кала SPR Nayeri et al. [30]
7. Туберкулез CFP-10 из образцов мочи SPR Hong et al.[229]
8. Болезнь Альцгеймера Бета-амилоид из спинномозговой жидкости SPR Xia et al. [31]
9. Мониторинг фертильности 16-глюкуронид эстриола в образце мочи SPR Jiang et al. [230]
10. Ревматоидный артрит Антиглюкозо-6-фосфат-изомераза из синовиальной жидкости SPR Kim et al.[231]
11. Болезнь Альцгеймера Диффузные лиганды, полученные из бета-амилоида, из спинномозговой жидкости Локальный поверхностный плазмонный резонанс (LSPR) Haes et al. [232]
12. ВИЧ Вирус из цельной крови LSPR Inci et al. [60]
13. Преэклампсия Альбумин из образцов мочи LSPR Lai et al.[233]
14. Рак яичника Секреторный белок 4 придатка яичка человека (НЕ4) из сыворотки крови LSPR Yuan et al. [234]
15. Остеоартрит TNF-альфа и MMP-3 из синовиальной жидкости LSPR Huang et al. [62]
16. Хирургия искусственного кровообращения Цитокины (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-α, IFN-γ) из сыворотки крови LSPR Chen et al.[90]
17. Рак Галектин-1 из сыворотки крови LSPR Zhao et al. [235]
18. Рак поджелудочной железы miR-X (X = 21 и 10b) из плазмы крови LSPR Joshi et al. [220]
19. Syphilis Treponema pallidum антитела из сыворотки крови LSPR Nie et al. [236]
20. Группа крови Anti-A IgG из сыворотки крови LSPR Yamamichi et al. [73]

Поверхностный плазмонный резонанс — обзор

12.4.1.1 Метод

Иммуносенсоры на основе поверхностного плазмонного резонанса (ППР) обеспечивают метод неразрушающего оптического анализа, полезный для исследования взаимодействия тонкослойных биомолекул, особенно реакции антиген-антитело на поверхности сенсорного чипа. Как показано на рисунке 12.21A, когда световой луч фокусируется на золотой поверхности сенсорного чипа, фотоны затухающей волны, создаваемые падающим светом, взаимодействуют с поверхностными плазмонами, то есть свободно колеблющимися электронами, распространяющимися вдоль поверхности золотой пленки. Резонанс возникает при критическом угле (углу SPR) падающего света, и световая энергия передается электронам на поверхности металлической пленки, вызывая уменьшение отраженного света от металлической пленки на границе раздела между двумя средами с разными показателями преломления.Это явление можно использовать, измеряя изменение угла отражения света, поскольку отраженный луч охватывает тот же диапазон углов падающего света, который зависит от показателя преломления на поверхности золота. При резонансе наблюдается минимум интенсивности отраженного света, и в полосе фотоприемника появляется темная линия, что приводит к резкому падению (также называемому «провалом» ППР) на графике зависимости интенсивности отражения этой полосы от угол SPR. Угол SPR смещается, когда биомолекулы связываются с поверхностью и изменяют массу поверхностного слоя.Это изменение резонансного угла можно отслеживать в реальном времени в виде графика зависимости резонансного сигнала (пропорционального изменению массы) от времени и впоследствии использовать для расчета показателя преломления и концентрации прилипших целевых аналитов.

Типичная сенсограмма иммуносенсора на основе SPR, график резонансного сигнала (выраженного в единицах резонанса (RU) в зависимости от времени, показан на рисунке 12.21. Специфические антитела к интересующему аналиту иммобилизуются на поверхности сенсора с соответствующими химия сопряжения.Перед введением образца текущий буфер проходит через микрожидкостную проточную ячейку прибора SPR. Когда вводится образец, содержащий целевой аналит (антиген), связывание аналита с поверхностью приводит к увеличению показателя преломления и, следовательно, резонансного сигнала (фаза ассоциации). Во время этой фазы ассоциации константа скорости ассоциации (K a в M -1 s -1 ) взаимодействия антиген-антитело (количество событий связывания в единицу времени), которая является мерой антиген- образование комплекса антител можно определить путем интерпретации сенсограммы с различными концентрациями введенных антигенов-мишеней.В состоянии равновесия сигнал достигнет плато, когда количество аналита, которое связывается и диссоциирует с антителом, равно. Уровень отклика при равновесии связан с концентрацией целевого аналита в образце. Когда раствор аналита заменяется буфером, комплексу антиген-антитело позволяют диссоциировать в зависимости от константы скорости диссоциации (количества событий диссоциации в единицу времени) (K d в с -1 ), которая описывает стабильность комплекса антиген-антитело.После диссоциации поверхность сенсора может быть регенерирована для следующего измерения с использованием регенерирующего раствора (например, с высоким содержанием соли или низким pH) для удаления оставшегося связанного аналита с денатурирующим иммобилизованным антителом. Следовательно, этот иммуносенсор может определять концентрацию аналита в образце, если построена соответствующая калибровочная кривая.

12.4.1.2 Приложение

Иммуносенсор SPR был разработан для обнаружения Salmonella typhimurium в загрязненной воде и пищевых продуктах (Oh et al ., 2004). При использовании иммуносенсора SPR ориентация антитела, иммобилизованного на поверхности сенсора, имеет решающее значение для увеличения активности антитела, взаимодействующего с представляющим интерес аналитом. Это повышает чувствительность обнаружения очень низких концентраций антигенов. Поскольку белок G, иммуноглобулин-связывающий белок клеточной стенки, обнаруженный в Streptococci sp., Способен взаимодействовать с Fc-областью антитела, самособирающийся слой белка G на золотой поверхности сенсора с использованием 11-меркаптоундекановой кислоты приводит к хорошо ориентированному монослою молекул антител для целевого аналита.Сдвиг угла SPR имеет линейную зависимость от концентрации S. typhimurium в диапазоне от 10 2 до 10 9 КОЕ / мл. Таким образом, предел обнаружения этого сенсора был на четыре порядка более чувствительным, чем стандартный ELISA.

Homola et al . (2002) улучшили чувствительность двухканального иммуносенсора SPR на основе модуляции длины волны. Они использовали формат связывания сэндвичей для обнаружения стафилококкового энтеротоксина B (SEB) в молоке.SEB — экзотоксин, продуцируемый Staphylococcus aureus . Это один из токсинов, вызывающих стафилококковые пищевые отравления у людей, и в некоторых странах он был произведен в качестве биологического оружия. Двухканальный (каналы сравнения и образцы) датчик SPR может обеспечивать компенсацию неспецифического отклика датчика из-за температурных изменений показателя преломления образца. Сэндвич-связывание вторичного антитела с комплексом аналит-антитело на поверхности золотого сенсора приводит к увеличению изменения массы и показателя преломления, что может усилить реакцию сенсора в 10 раз.Было показано, что иммуносенсор SPR способен обнаруживать концентрации SEB до 5 и 0,5 нг / мл с использованием прямого и сэндвич-режимов соответственно.

4 способа уменьшить неспецифическое связывание в экспериментах с SPR

Повысьте качество ваших данных SPR с помощью этих стратегий оптимизации

Если вы не знакомы с поверхностным плазменным резонансом (SPR), проверьте
из нашей статьи о том, что такое SPR? прежде чем продолжить.

Что такое неспецифическое связывание?


Во время эксперимента SPR существует множество экспериментальных параметров, которые необходимо контролировать, чтобы оптимизировать производительность системы и генерировать высококачественные данные связывания.Из этих параметров минимизация неспецифического связывания (NSB) является одним из наиболее важных, поскольку это может напрямую повлиять на точность ваших кинетических данных. Эксперименты SPR обычно состоят из лиганда — биомолекулы, иммобилизованной на поверхности сенсора, и аналита — солюбилизированной биомолекулы, которая связывает лиганд. Анализируемое вещество протекает через иммобилизованный лиганд, и по мере их взаимодействия происходит изменение показателя преломления на поверхности сенсора. Это изменение показателя преломления измеряется в единицах отклика (RU), которые затем используются для расчета аффинности и кинетики взаимодействия.В некоторых случаях могут иметь место неспецифические взаимодействия между аналитом и нецелевыми молекулами на поверхности сенсора, которые могут раздувать измеряемый RU и приводить к ошибочно рассчитанной кинетике. Это называется неспецифическим связыванием.

Рисунок 1: Неспецифическое и специфическое связывание в эксперименте SPR.

Как происходит неспецифическое связывание?


NSB вызывается молекулярными силами между аналитом и поверхностью сенсора, которые могут принимать форму гидрофобных взаимодействий, водородных связей, ван-дер-ваальсовых взаимодействий и других неспецифических взаимодействий.Возникновение NSB в конкретном эксперименте может быть результатом нескольких факторов, таких как биомолекулярное покрытие на поверхности сенсора, химия, используемая для иммобилизации лиганда, или конформационное изменение лиганда во время иммобилизации. К счастью, существует множество стратегий, которые можно применить для уменьшения любого наблюдаемого NSB, но для максимальной эффективности обязательно, чтобы вы определяли уровень NSB до начала эксперимента.

Стратегии уменьшения неспецифического связывания


Один простой предварительный тест, который можно провести, — это провести анализируемым веществом по голой поверхности сенсора без какого-либо иммобилизованного лиганда.Если вы наблюдаете значительный уровень NSB, вы можете предпринять ряд шагов, чтобы ограничить эти взаимодействия. Общие стратегии включают:

  1. Регулировка pH вашего буфера.
  2. Использование добавок, блокирующих белок.
  3. Добавление неионных поверхностно-активных веществ.
  4. Повышение концентрации соли.

Чтобы выбрать наилучший метод, важно знать характеристики анализируемого вещества и лиганда. Знание изоэлектрической точки, заряда, размера и состава (гидрофильного, гидрофобного) молекул может помочь вам определить наиболее эффективные условия для уменьшения NSB в вашем эксперименте.

1. Отрегулируйте pH вашего буфера

pH рабочего буфера и буфера, в котором солюбилизируется ваш аналит, может иметь значительное влияние на NSB, потому что он определяет общий заряд (положительный или отрицательный) вашей биомолекулы. . Например, если вы используете pH, при котором ваш аналит заряжен положительно, аналит не будет специфически взаимодействовать с отрицательно заряженной поверхностью сенсора. В таком случае у вас есть возможность отрегулировать свой буфер до pH в пределах диапазона изоэлектрической точки (прогнозируемый общий нейтральный заряд) вашего белка или нейтрализовать поверхность сенсора.

2. Используйте буферные добавки — блокатор белка

Если вы используете белок в качестве аналита, хорошим первым шагом к предотвращению неспецифического связывания является добавление бычьего сывороточного альбумина (BSA), широко используемой добавки, блокирующей белок. в буфер и раствор образца. Будучи глобулярным белком, состоящим из доменов с различной плотностью заряда, BSA может окружать анализируемое вещество, защищая его от неспецифических белок-белковых взаимодействий, взаимодействий с заряженными поверхностями, стеклянными и пластиковыми поверхностями.Таким образом, добавки, такие как BSA, могут использоваться для минимизации NSB, а также для предотвращения потери аналита в трубках вашей системы. BSA обычно используется в концентрации 1%, но может варьироваться от эксперимента к эксперименту.

3. Добавьте поверхностно-активные вещества — Tween 20

Если происходит неспецифическое связывание из-за гидрофобных взаимодействий в вашей системе, может быть полезно использовать неионные поверхностно-активные вещества, такие как Tween 20. Низкие концентрации этого мягкого моющего средства может нарушить гидрофобные взаимодействия между анализируемым веществом и поверхностью сенсора.Подобно БСА, Твин 20 также обычно добавляют для предотвращения связывания анализируемого вещества со стенками трубок и контейнеров.

4. Повышение концентрации соли (NaCl)

В системах, где NSB возникает в основном из-за взаимодействий на основе заряда, использование более высоких концентраций соли в вашем буфере может уменьшить эти взаимодействия, оказывая экранирующий эффект на аналит. Соли, такие как NaCl, могут использоваться в различных концентрациях для предотвращения взаимодействия заряженных белков с другими заряженными поверхностями, включая поверхность сенсора.

Рисунок 2: Уменьшение NSB заряженного аналита (кроличий IgG) с добавлением 200 мМ NaCl. Красные кривые представляют неспецифическое связывание при различных концентрациях аналита. Черные кривые представляют соответствующую реакцию аналита на добавление соли в рабочий буфер.

Для подробного экспериментального анализа этих методов загрузите нашу заметку по применению .

Оптимизация производительности за счет заблаговременного планирования


Предотвращение неспецифического связывания (если оно существует) является ключом к проведению успешных экспериментов SPR.Чем больше у вас информации о лиганде и аналите, тем проще будет оптимизировать экспериментальные условия и минимизировать NSB. Хотя есть стратегии, которые можно применить в любом конкретном случае, важно отметить, что экстремальные условия могут деактивировать или денатурировать ваши биомолекулы. Таким образом, всегда помните о потенциальном воздействии на ваши биомолекулы, принимая решение о вмешательстве для предотвращения NSB. Если вы обнаружите, что не можете удалить все NSB из своей системы, но количество конкретных привязок намного больше, чем NSB, вычитание сигнала NSB из конкретного события привязки может помочь смягчить влияние NSB на ваши данные.

Исправляя неспецифическое связывание в ваших экспериментах с SPR, вы обретете уверенность в качестве ваших данных и сможете точно анализировать интересующие вас биомолекулярные взаимодействия. Это позволит вам лучше понять свою биологическую систему интерес. В Nicoya наша цель — улучшить человеческую жизнь, помогая ученым добиться успеха, и помощь в оптимизации экспериментов — лишь один из способов выполнения этой миссии. Для получения дополнительных советов по оптимизации ознакомьтесь с нашим сообщением в блоге о повышении качества данных SPR.Если у вас есть какие-либо вопросы о сокращении NSB или вы хотите узнать о том, как SPR можно применить к вашему исследованию, мы будем рады помочь!

4 Проблемы анализа SPR, которые можно решить путем улучшения качества белка

Наверняка вы оказались в исследовательской ситуации, когда результаты экспериментов заставляли вас чесать голову. Любой тип лабораторных работ иногда подойдет вам, и поверхностный плазмонный резонанс (SPR) не исключение.

Как и в любом аналитическом анализе, качество результатов SPR сильно зависит от качества исходного материала.Не верите? Вот 4 ситуации, которые могут показаться знакомыми, когда отступление и получение образцов белка более высокого качества могут решить ваши проблемы.

1. Что делать, если ваши результаты не такие, как в прошлый раз (и перед тем, как вы собираетесь начать заново!)

Все мы знаем, что в науке, если результат не был получен хотя бы три независимых раза, он не засчитывается. Если результат не может быть воспроизведен, постулируется новая гипотеза и проводятся новые эксперименты.Начать заново может быть абсолютно правильным решением — или это может быть преждевременным, особенно когда результаты выглядят иначе, только потому, что белок, используемый в анализе, ведет себя иначе. Возможно, что-то пошло не так во время очистки последней партии белка, или, может быть, аликвота, использованная в последнем повторе, была случайно пропущена и потеряла свою функцию. Подобные вещи случаются с лучшими из нас, но им не нужно сбивать с толку наши исследования. Возможно, ответом будет повторение ваших шагов и повторное изучение образца материала.

2. Что проверять, если результаты SPR не показывают взаимодействия, хотя оно должно быть

Иногда литература или ортогональные методы ясно показывают, что существует взаимодействие между молекулами, которые вы исследуете. В других случаях это может быть просто действительно сильное интуитивное чувство, что он должен быть. Но что, если ваш анализ SPR не показывает этого взаимодействия? Прежде чем вы позволите этому поколебать вашу уверенность в своих научных способностях, подумайте, может ли белок быть виноватым: возможно, он просто не смог действительно осуществить взаимодействие.Возможно, низкий pH, используемый для иммобилизации лиганда, денатурировал его. Возможно, белок-лиганд просто действительно не любит, когда его иммобилизуют или маркируют, и это нарушает его структурную целостность. Или, может быть, анализируемый белок слишком долго находился в приборе SPR при комнатной температуре, ожидая введения, а за это время он развернулся. Может быть, один (или оба!) Из ваших белков денатурированы при хранении давным-давно. В большинстве случаев развернутый белок не функционирует и не может выполнять взаимодействия, которые он совершил, поэтому это может быть причиной того, что вы не видите того, чего ожидаете.

3. Как объяснить отсутствие сродства и кинетики, даже если ваши результаты показывают взаимодействие, которое вы ожидали

Часто у вас есть представление о том, насколько сильным должно быть взаимодействие, которое вы исследуете, либо из литературы, либо из сравнения с мутантами или вариантами вашего белка (белков). Если аффинность и кинетика не соответствуют вашим ожиданиям, это может снова быть связано с развернутым или денатурированным аналитом — только на этот раз белок развернут только частично, а не полностью.Опять же, это может произойти при хранении или во время анализа, если используется неправильный буфер или если белок хранится в концентрациях, где он нестабилен. Допустим, 50% белковых молекул в образце все еще функционируют — это все еще означает, что 50% не работают, и это будет отражено в результатах просто потому, что числа, использованные в расчетах, также неверны на 50%. Та же проблема возникает, если белок не является мономерным, как вы думали, а димеризован или олигомеризован. Цифры не будут правильными, и поэтому результаты тоже не могут быть правильными.Обнаружив эти вещи заранее, вы сможете использовать правильные числа в расчетах и ​​получить правильные результаты.

4. На что следует обратить внимание, прежде чем обвинять инструмент SPR в плохих результатах.

В ситуациях, когда вы вообще не можете понять результаты экспериментов, хорошая научная практика заключается в рассмотрении всех возможных причин. Если что-то пойдет не так, легко заподозрить ваш SPR-инструмент из-за его сложных микрофлюидических систем, которые требуют регулярного технического обслуживания, ремонта и замены деталей.Это может привести к дорогостоящей головной боли и лишнему времени из-за поддержки на месте и скрытой платы за обслуживание, что в сумме приведет к нескольким тысячам долларов (или евро) и отсрочке проведения ценных экспериментов. И что самое интересное: иногда после того, как все это сделано, проблема не исчезает! Если прибор не виноват, то в чем виноват? Опять же, это могут быть белки плохого качества. Например, агрегированный аналит может прилипать к трубке и впоследствии беспорядочно вытесняться, вызывая странные сигналы в вашем эксперименте (или эксперименте следующего человека).Кроме того, он может прилипать непосредственно к поверхности сенсорного чипа и вызывать неубедительные данные (и разрушать чип). Это определенно то, на что стоит обратить внимание, прежде чем привлекать экспертов!

Вы, наверное, слышали фразу «мусор на входе, мусор на выходе». Сама фраза возникла в информатике, но концепция применима ко всем областям, включая лабораторную работу: если вы подпитываете систему (например, ваш инструмент SPR) неоптимальными входными данными, как может результат быть оптимальным? Давайте разберемся с этими проблемами в корне и постараемся работать с образцами протеина самого высокого качества, насколько это возможно, чтобы получить максимально возможное качество результатов — тех результатов, которые вам нужны для подтверждения вашей гипотезы, или данных, которые нужно опубликовать.Давайте изменим наше мышление на «золото на входе, золото на выходе!»

Об авторе

Беате Керн — менеджер по продукту Tycho. У нее есть степень магистра молекулярной биотехнологии, которую она получила в Мюнхенском техническом университете и Токийском технологическом институте. Беа получила степень доктора микробиологии в Мюнхенском университете Людвига-Максимилиана, а затем присоединилась к NanoTemper. Помимо страсти к науке, она увлекается йогой, музыкой и чтением.В последнее время ее любимыми предметами для чтения были маркетинг, типографика и цвета.

Принцип и протокол поверхностного плазмонного резонанса (SPR)

Поверхностный плазмонный резонанс (SPR) — одна из широко используемых технологий для подробных и количественных исследований белок-белковых взаимодействий и определения их равновесных и кинетических параметров.SPR обеспечивает превосходный инструментарий для исследования белок-белковых взаимодействий в реальном времени без использования меток.

Теперь я хочу познакомить вас с принципом и протоколом SPR.

Принцип
SPR можно также использовать для термодинамического анализа, картирования эпитопов и для определения концентрации аналита. Метод связывания на основе SPR включает иммобилизацию лиганда на поверхности сенсорного чипа, который имеет монослой карбоксиметилированного декстрана, ковалентно прикрепленный к поверхности золота.Интересующий лиганд иммобилизуется на поверхности сенсорного чипа с использованием четко определенной химии, позволяющей растворам с различными концентрациями аналита протекать по нему и характеризовать его взаимодействия с иммобилизованным лигандом (рис. 1). Сигнал SPR возникает из-за изменений показателя преломления на поверхности золотого сенсорного чипа. Увеличение массы, связанное с событием связывания, вызывает пропорциональное увеличение показателя преломления, которое наблюдается как изменение реакции.Эти изменения измеряются как изменения резонансного угла (δθ) преломленного света, когда аналит, протекающий в микрожидкостном канале, связывается с иммобилизованным лигандом и увеличивается в плотности на сенсорном чипе. Важно отметить, что для белок-белковых взаимодействий изменение показателя преломления на поверхности линейно связано с количеством связанных молекул. Сигнал отклика количественно выражается в резонансных единицах (RU) и представляет собой сдвиг резонансного угла, где 1RU равен критическому угловому сдвигу 10 -4 градусов или 10 -12 г · мм -2 .Когда достигается установившееся состояние (все сайты связывания заняты), определяется максимальный RU (n: количество сайтов связывания в лиганде).

RU макс = nRU L (MW A / MW L )

Рис.1. Экспериментальная установка SPR-эксперимента.

Мониторинг изменения сигнала SPR с течением времени дает сенсограмму, график зависимости реакции связывания (RU) от времени, который позволяет визуализировать и оценивать различные стадии события связывания (рис.1). Во время инъекции аналита увеличение реакции связывания происходит из-за образования комплексов аналит-лиганд на поверхности, и на сенсограмме преобладает фаза ассоциации. После определенного времени инъекции достигается устойчивое состояние, в котором связывающие и диссоциирующие молекулы находятся в равновесии. Снижение реакции после прекращения введения аналита происходит из-за диссоциации комплексов, определяющих фазу диссоциации. В зависимости от скорости диссоциации тестируемого лиганда в некоторых анализах может потребоваться стадия регенерации, чтобы снова достичь исходного уровня.Подгонка данных сенсограммы к соответствующей кинетической модели связывания позволяет рассчитать кинетические параметры, такие как константы скорости ассоциации (k a ) и диссоциации (k d ), а также аффинность связывания тестируемых взаимодействий (фиг.2).

Рис.2. Данные сенсограммы SPR

На результат сенсограммы могут влиять три фактора: кинетика, концентрация аналита и скорость диффузии.

Кинетика также может быть проанализирована по сенсограмме, для разных аналитов, которые имеют одинаковое сродство с лигандом, будет различная кинетика.См. Другую сенсограмму ниже.

Рис.3. Различная кинетика с одинаковым сродством

Концентрации аналита должны быть подтверждены перед заключительным экспериментом SPR, который имеет решающее значение для эксперимента. Диапазон концентраций должен составлять от 10 раз ниже Kd до 10 раз выше Kd. Вам следует выбрать оптимальную концентрацию аналита для SPR.

Рис.4. Оптимизируйте концентрацию аналита перед экспериментом SRP

Скорость диффузии также может повлиять на результат сенсограммы.Если скорость диффузии ниже, чем скорость ассоциации, могут наблюдаться эффекты массопереноса. Кажущиеся константы скорости меньше, когда происходит связывание, ограниченное переносом массы. В этой ситуации кинетические данные тоже неточны.

Рис.5. Различный расход влияет на сенсограмму

Протокол

  1. экспрессировать и очищать лиганды и аналиты;
  2. Выберите подходящий сенсорный чип, см. Их обозначения в таблице 1;
  3. Определение pH и концентрации лиганда для оптимальной иммобилизации: разбавьте образец белка в буфере, приготовленном при нескольких pH, следуя процессу ПОДГОТОВКИ ПОВЕРХНОСТИ и выбрав условия более высокой поверхностной концентрации лиганда на чипе.
  4. Разведка регенерации и проверка характеристик поверхности после РЕГЕНЕРАЦИОННОЙ РАЗБОРКИ и ИСПЫТАНИЯ ПОВЕРХНОСТЕЙ, а затем выберите МЕТОД РЕГЕНЕРАЦИИ, чтобы запустить эксперимент.
  5. Выберите BINDING ANALYSIS и DIRECT BINDING, чтобы исследовать связывание с белками.
  6. Выберите КИНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ и выберите ПЕРЕДАЧА МАССЫ, чтобы запустить кинетический анализ вместе с экспериментом по связыванию.
  7. Анализ данных и определение кинетических констант.

Таблица1.Доступные сенсорные чипы, их характеристики и применение

Чип датчика Поверхность Характеристики и применение
CM5 Стандартная поверхность — матрица карбоксиметилированного декстрана Превосходная химическая стабильность; Универсальный чип, подходящий для большинства приложений
CM4 Низкое карбоксилирование — матрица карбоксиметилированного декстрана с более низкой степенью карбоксилирования, чем CM5, т.е.е., менее отрицательно заряженный Снижает неспецифическое связывание высоко положительно заряженных молекул, которые могут быть обнаружены, например, в неочищенных образцах. Удобен для измерения низкого Rmax, необходимого в кинетических приложениях.
CM3 Короткий декстран — матрица карбоксиметилированного декстрана с таким же уровнем карбоксилирования, что и CM5, но более короткая матрица Для низких уровней иммобилизации и работы с клетками, вирусами и многокомпонентными комплексами с высокомолекулярными аналитами
CM7 Высокое карбоксилирование — сопоставимо с чипом CM5, но имеет более высокую плотность карбоксиметилированного декстрана. Обеспечивает более высокую иммобилизационную способность; Идеально подходит для приложений, использующих небольшие молекулы и фрагменты.
C1 Плоская карбоксиметилированная поверхность Для работы с такими частицами, как клетки и вирусы, а также в приложениях, где декстрановая матрица нежелательна
SA Карбоксиметилированный декстрановый матрикс, предварительно иммобилизованный стрептавидином Улавливает биотинилированные лиганды, такие как углеводы, пептиды, белки и фрагменты ДНК
НТА Матрица карбоксиметилированного декстрана, предварительно иммобилизованная NTA (нитрилотриуксусной кислотой) Разработан для связывания лигандов, меченных гистидином, посредством хелатирования металлов; Позволяет контролировать стерическую ориентацию компонента лиганда для оптимального воздействия на сайт
HPA Плоская гидрофобная поверхность Для изучения липидных монослоев, взаимодействующих с мембранно-связывающими биомолекулами и связанных с мембранами взаимодействий
Л1 Матрица карбоксиметилированного декстрана, модифицированная липофильными веществами Для быстрого и воспроизводимого захвата липосом с сохранением двухслойной липидной структуры

Мы будем рады обсудить с вами детали предполагаемых исследований взаимодействия и разработать экспериментальные стратегии / методы в соответствии с вашими требованиями.Пожалуйста, ознакомьтесь с услугой SRP в нашем Интернете и свяжитесь с Creative BioMart.

Ассоциация PND | Дефицит сепиаптеринредуктазы

Дефицит сепиаптеринредуктазы (SPR) — это тип нейромедиаторного расстройства. Как и другие нейротрансмиттерные нарушения, это также можно классифицировать как редкую врожденную ошибку метаболизма. Дефицит SPR нарушает производство фермента сепиаптеринредуктазы, который участвует в производстве молекулы тетрагидробиоптерина (также известной как Bh5) в головном мозге.

Тетрагидробиоптерин помогает обрабатывать несколько строительных блоков белков (аминокислот) и участвует в производстве нейромедиатора дофамина и серотонина.

Когда в головном мозге не вырабатывается тетрагидробиоптерин, производство дофамина и серотонина значительно снижается. Недостаток нейротрансмиттеров вызывает проблемы с движением и другие симптомы, связанные с дефицитом нейромедиаторов.

Какие симптомы связаны с дефицитом SPR? Дефицит SPR часто возникает в первые десять месяцев жизни.

Общие симптомы:

  • Отсроченная разработка
  • Периодический фиксированный взгляд вверх или вбок (окулогирный криз)
  • Пониженный мышечный тонус (гипотония)
  • Необычные позы тела / скручивающие движения (дистония)
  • Тремор
  • Контроль над мышцами лучше в разное время дня (суточные эффекты)

Дополнительные симптомы:

  • Тремор
  • Чрезмерное потоотделение
  • Чрезмерная сонливость

Тяжелые симптомы:

  • Слюни
  • Затруднения при разговоре
  • Аномальные движения языка
  • Случайные изъятия
  • Отсроченный рост
  • Маленький размер головы
  • Слабость мышц бедра и бедра (признак Гауэрса)

Что вызывает дефицит SPR?

Дефицит SPR вызван мутациями в гене SPR.Ген SPR предоставляет инструкции по производству фермента сепиаптеринредуктазы. В частности, сепиаптеринредуктаза отвечает за последний этап производства тетрагидробиоптерина. Большинство мутаций гена SPR приводят к тому, что фермент практически не функционирует.

Нефункциональный ген редуктазы сепиаптерина приводит к недостатку тетрагидробиоптерина, что вызывает нарушение метаболизма нейромедиаторов. Дефицит SPR возникает из-за аутосомно-рецессивного наследования.

В этом типе наследования есть две мутировавшие копии гена, вызывающего заболевание.У человека с дефицитом SPR обычно есть здоровые родители (без симптомов), каждый из которых несет одну копию мутировавшего гена и называется носителями.

Аутосомно-рецессивные расстройства обычно не наблюдаются в каждом поколении затронутой семьи. Когда у двух людей, являющихся носителями аутосомно-рецессивного заболевания, есть ребенок, существует 25% (1 из 4) шанс, что ребенок будет затронут. Для получения дополнительной информации о генетических заболеваниях щелкните ссылку «болезнь», затем ссылку «генетическое заболевание».

У кого возникает дефицит SPR?

Дефицит сепиаптеринредуктазы — редкое состояние. В научной литературе описано не менее 30 случаев.

Как диагностируется недостаточность SPR?

Диагностика основана на специфическом и тщательном исследовании метаболитов нейромедиаторов в спинномозговой жидкости (CSF) с помощью люмбальной пункции. Тестирование спинномозговой жидкости на дефицит SPR показывает нарушения метаболизма дофамина, серотонина, биоптерина и их метаболитов.

Может потребоваться дальнейшее тестирование ЦСЖ на сепиптерин. Также может быть рекомендовано тестирование на дефицит SPR в фибробластах (клетках, которые можно использовать для генетического тестирования).

Для получения дополнительной информации нажмите «Тестирование» на главной странице.

Как лечится недостаточность SPR?

Лечение может включать введение леводопы, карбидопы и 5-гидрокситриптофана. Количества могут варьироваться, и эту комбинированную терапию вводят медленно и медленно увеличивают в течение нескольких дней или недель, пока не будет достигнута конечная целевая концентрация.Также может потребоваться добавка фолиновой кислоты.

Лечение леводопой и карбидопой отдельно или в комбинации с тетрагидробиоптерином может быть рассмотрено для людей, которые плохо реагируют на 5-гидрокситриптофан.

Дети с дефицитом сепиаптеринредукатазы, получавшие лечение леводопой, как правило, демонстрируют значительное улучшение двигательных навыков. Эффективность терапии леводопой для улучшения способностей к обучению варьируется.

Избранные источники

Полный список статей о недостатке SPR можно найти в онлайн-издании «Менделирующее наследование в человеке» (OMIM), ссылка на который приведена ниже.Вам нужно будет ввести Дефицит сепиаптерина редуктазы и выполнить поиск.

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/omim

Характеристики SPR и волноводных структур для сенсорных приложений — Metricon

Управляемый компьютером поворотный стол 2010 / M изменяет угол падения и резкое падение света, отраженного от границы раздела стекло / металлическая пленка, вызванное резонансом SPR, происходит (кривая 1 на рисунке 2). Угол резонанса ППР зависит от длины волны лазера, толщины и типа металлической пленки, но на угол также сильно влияет наличие даже очень тонких слоев (1-10 нм), присутствующих на поверхности металла (кривая 2 на рисунке 2). .Эта чрезвычайная чувствительность резонансного угла как к толщине, так и к показателю преломления тонких адсорбированных слоев делает структуру SPR идеальным датчиком как для органических / биологических, так и для неорганических материалов на уровне нанослоя.

Поскольку резонансы SPR часто возникают при эффективных показателях ниже нормального диапазона большинства призм Metricon, для применений SPR на 2010 / M доступны специальные согласованные призмы. Кроме того, обычно легко разместить устройства SPR, которые включают жидкостный аппарат, чтобы жидкости могли контактировать с датчиком SPR — если мы заранее знаем конструкцию вашей ячейки и другие особые требования, мы обычно можем настроить 2010 / M система в соответствии с вашими потребностями за небольшую дополнительную плату или без нее.

Волноводные датчики работают примерно так же, как датчики ППР, и обычно полагаются на угловой сдвиг, вызванный углами распространения моды, вызванный тонкими адсорбированными слоями целевых молекул на поверхности волновода (см. Bahsi et al, Sensors, vol. 9 (2009), 4890-4900). Обнаружение очень низких уровней молекул ДНК также было продемонстрировано путем поглощения в волноводах из пористого кремния (Rong et al., Appl. Phys. Lett., Vol. 93 (2008), 161109).

Ниже приводится частичный список журнальных статей, относящихся к оборудованию Metricon для биосенсорных приложений:

M-L Anne, J.Кейрсс, В. Назабаль, К. Хиодо, С. Иноуэ, К. Буссар-Пледель, Х. Лермит, Дж. Шаррье, К. Янаката, О. Лореаль, Дж. Ле Персон, Ф. Колас, К. Компер и Б. Bureau, «Оптические волноводы из халькогенидного стекла для инфракрасного биодатчика», Сенсоры, т. 9 (9) (2009), страницы 7398-7411.

Z.B. Бахі, А. Бююкаксой, С.М. Ölmezcan, F. _im_ek, M.H. Аслан, А.Ю. Oral, «Новый безметочный оптический биосенсор, использующий синтетические олигонуклеотиды из E. coli O157: H7: тесты элементарной чувствительности », Сенсоры, т. 9 (2009), страницы 4890-4900.

С. Грего, Дж. Р. МакДэниел и Б. Р. Стонер, «Измерение длины волны решетчатых оптических биосенсоров в конфигурации входного ответвителя», Датчики и исполнительные механизмы B: Chemical, vol. 131, выпуск 2, 14 мая 2008 г., страницы 347-355.

Ю. Цзяо и С. М. Вайс, «Расчетные параметры и анализ чувствительности волноводов из пористого кремния с полимерным покрытием для обнаружения малых молекул», Биосенсоры и биоэлектроника, т. 25, выпуск 6, 15 февраля 2010 г., страницы 1535-1538.

Д. Ллойд, Л.Хорнак, С. Патак, Д. Мортон и И. Стивенсон, «SPARROW: новая технология биосенсорного чипа на основе тонкой пленки», Vacuum Technology & Coating, сентябрь 2004 г., стр. 48-57.

А. К. Манокки, П. Домачук, Ф. Г. Оменетто, Х. Йи, «Простое изготовление биополимерных оптических волноводов на основе желатина», Биотехнология и биоинженерия, т. 103, No. 4, 1 июля 2009 г., страницы 725-732.

М. Нордстром, Д. А. Заунер, А. Бойзен, Дж. Хубнер, «Одномодовые волноводы с полимерным сердечником SU-8 и оболочкой для приложений MOEMS», J.Lightwave Tech., Т. 25, выпуск 5 (2007), страницы 1284-1289.

С. Т. Паркер, П. Домачук, Дж. Амсден, Дж. Бресснер, Дж. А. Льюис, Д. Л. Каплан, Ф. Г. Оменетто, «Биосовместимые оптические волноводы с шелковой печатью», Adv. Материалы, т. 21, выпуск 23, страницы 2411-2415

Дж. Ронг, Дж. Д. Рикман, Р. Л. Мерно и С. М. Вайс, «Волновод с мембраной из пористого кремния без этикеток для зондирования ДНК», Appl. Phys. Lett., 93, 161109. (2008).

G. Rong, A. Najmaie, J. E. Sipe, S. M. Weiss, «Наноразмерный волновод из пористого кремния для определения ДНК без меток», Biosensors and Bioelectronics, Vol.23, выпуск 10, 15 мая 2008 г., страницы 1572-1576.

А. Самок, А. Миневич, М. Самок, Дж. Г. Гроте, «Анизотропия показателя преломления и оптическая дисперсия в пленках дезоксирибонуклеиновой кислоты», J. Appl. Pol. Sci., Т.

Разное

8 Comments

  • accikef
    Reply

    Anxiety Medication In Canada stromectol merck canada

  • Abatiff
    Reply

    buy stromectol australia C type lectin like domain and fibronectin like type II domain of phospholipase A 2 receptor 1 modulate binding and migratory responses to collagen

  • irornon
    Reply

    Gaskell DJ, Hawkins RA, de Carteret S, Chetty U, Sangster K, Forrest APM Indications for primary tamoxifen therapy in elderly women with breast cancer priligy tablets over the counter ALTRAZ 1MG TABLET, Packaging Size 14 Tablet s In A Strip

  • avesomI
    Reply

    Levine 1998 tamoxifen uses

  • anaeniCap
    Reply

    clomid in men Ursolic acid inhibits nuclear factor kappaB activation induced by carcinogenic agents through suppression of IkappaBalpha kinase and p65 phosphorylation correlation with down regulation of cyclooxygenase 2, matrix metalloproteinase 9, and cyclin D1

  • Haiturb
    Reply

    41, 42 It is crucial that the physician takes the preference of patients seriously when prescribing new medications and involves the patient in decision making around planned treatment stromectol for covid PMID 16246613 French

  • incunlibe
    Reply

    hctz vs lasix bimatoprost provision pharmacy The current ceiling of AUD300bn on the Federal debt is set to be breached in December, as the timeframe for reaching a budget surplus has been extended

  • Sweethy
    Reply

    The trick is to get people to eat their veggies, hidden in the pizza, on movie night doxycycline monohydrate 100 mg tablet These studies demonstrated that systemic enzyme therapy significantly decreased tumor induced and therapy induced side effects and complaints such as nausea, gastrointestinal complaints, fatigue, weight loss, and restlessness and obviously stabilized the quality of life

Leave a Comment

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *